ChIP-Seq(ChromatinImmunoprecipitationSequencing)因能真实、完整地反映靶蛋白与DNA序列的结合情况,因而成为研究DNA-蛋白相互作用的经典方法。但ChIP-Seq继承了ChIP的难点与局限性:需要大量细胞投入(106-107),甲醛交联易导致假阳性或假阴性,对染色质的完整性、免疫沉淀抗体的特异性较为敏感,整体实验步骤复杂耗时长,测序数据背景信号高等,这些难点使得低投入量、低丰度的靶蛋白、弱结合DNA-蛋白质的研究变得较为困难。此外,和胎儿线性DNA类似,胎儿环状DNA在分娩后从母血中迅速分离。四川云序表观遗传组测序结果
样品类型:tumsor患者的血浆、血清或cfDNA。血浆和血清相比较而言,推荐使用血浆,以减少淋巴细胞来源的cfDNA干扰。样品量:血浆>5mL;血清>10mL;cfDNA>10ng。血浆提取:使用EDTA抗凝管收集全血,切勿冷冻保存,只能在2-8℃冰箱短暂存放,并尽快进行低温离心获取血浆。若不能进行低温离心,则需要使用添加专有稳定剂的STRECK无创管来保存全血,可在常温条件下离心。为了消除残留的细胞,血浆需要进行二次离心:first在4℃条件下以1600g离心10分钟;第二次在4℃条件下以16000g离心10分钟。样品保存:血浆、血清样品液氮速冻后-80℃冰箱保存。样品保存期间避免反复冻融。样品运输:封口膜封好样品,干冰运输。黑龙江云序生物表观遗传组测序价格游离于染色体基因组之外的DNA 被发现常常以环状的形式存在。
CUT&Tag技术的基本原理为:在抗体引导下,ChiTag酶在目的组蛋白修饰标志、或转录因子、或染色质调控蛋白结合染色质的局部进行目的DNA的片段化,同时添加测序接头,并释放到细胞外,而绝大部分无关的染色质还留在细胞核内,因而整个实验的信噪比大幅提高,同时简化了实验步骤。该方法可一管式高通量应用,并可与单细胞测序平台"无缝"结合。ChiTag酶在打断基因组的同时加上接头,不需要繁琐的补平加A加接头,在一个工作日内可以完成从细胞到测序文库制备全流程。
而NGS技术能够检测基因突变。靶向深度测序和基于捕获物测序的方法可以在指定区域进行检测。重要的是,外显子血浆DNA分析开辟了一种新的机遇,即其可以描述突变组的特征,而不需要关注之前或者现在存在的突变。基于NGS的ctDNA全基因组测序,不仅可以发现染色体重组,易位等情况,其对tumsor标记物还具有敏感性和特异性。同时,在选定的情况下,基于NGS的ctDNA测序还能发现体细胞拷贝数的畸变。正是基于以上优势,NGS在ctDNA检测中,开始扮演越来越重要的角色。而基于NGS的ctDNA检测的效果,也在很多临床实验中得到了证实。后续进行文库构建与高通量测序,从而获得发生甲基化修饰的环状DNA。
案例1:孕妇血浆中胎儿环状DNA的特征是:呈甲基化状态以及被clear原文:CharacteristicsofFetalExtrachromosomalCircularDNAinMaternalPlasma:MethylationStatusandClearance期刊:ClinicalChemistry影响因子:8.322近期,NIPT之父卢煜明教授团队开发了一种环状DNA甲基化分析的测序方案,通过对不同产后时间点的胎儿环状DNA含量的评估,研究了胎儿环状DNA的体外clear效率。作者还发现血浆中的胎儿环状DNA与母体环状DNA相比甲基化程度相对较低。此外,和胎儿线性DNA类似,胎儿环状DNA在分娩后从母血中迅速clear。总之,该团队基于转座酶和m5C位点酶学转化方法开发出了环状DNA甲基化测序技术,并揭示了孕妇血浆中的胎儿环状DNA甲基化状况,为环状DNA的深入研究及新型分子标志物的开发提供了新的技术手段。云序生物质控流程严格,层层把关,为客户提供高准确度的结果。江西项目表观遗传组测序分子
环状DNA连登《Nature》《Cell》等期刊,彻底颠覆了人们对基因遗传的传统认知。四川云序表观遗传组测序结果
染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)是研究蛋白质与DNA相互作用的经典技术,被普遍应用于转录因子结合位点或组蛋白修饰位点的研究。 云序生物提供的ChIP-Seq服务,将ChIP和高通量测序技术结合,在全基因组范围内检测与特定转录因子或组蛋白结合的DNA位点。配合强大的生信分析实力,云序生物提供的不仅是海量的测序数据,而且是根据您的研究目的,有针对性地挖掘提炼出取之即可用的结果及出版级图片。云序生物提供的MeDIP测序服务,将甲基化DNA免疫共沉淀技术(MeDIP)和高通量测序相结合,能够帮助客户快速地获取全基因组范围内的DNA甲基化图谱,并比较不同样品中的甲基化分布差异。四川云序表观遗传组测序结果
上海云序生物科技有限公司办公设施齐全,办公环境优越,为员工打造良好的办公环境。专业的团队大多数员工都有多年工作经验,熟悉行业专业知识技能,致力于发展高通量测序,测序合成,科研,技术服务的品牌。公司坚持以客户为中心、上海云序生物科技有限公司于2015年3月成立,坐落于上海漕河泾新兴技术开发区,专注于表观修饰以及转录组领域,依托于高通量测序、定量PCR、质谱技术和生物信息学等技术,集科研服务、医学检测、产品研发于一体的****。市场为导向,重信誉,保质量,想客户之所想,急用户之所急,全力以赴满足客户的一切需要。云序生物始终以质量为发展,把顾客的满意作为公司发展的动力,致力于为顾客带来***的RNA甲基化,表观遗传学,转录组测序,外泌体。