外泌体的生物学功能:1、first报道的外泌体生物功能是红血球成熟过程中排出来的蛋白质。 2、进一步的研究表明其功能包括排泄不必要的蛋白质和RNA等物质。 3、可促进生物体免疫应答反应。 4、对凝血和血管生成其促进作用。 5、可通过化学信号参与ai细胞的转移。 6、在哺乳期的免疫调节过程中起到重要的作用。 7、不仅参与触发下游信号传导,而且特异性靶向受体细胞和交换蛋白。 8、可提供特殊的核酸且起到运输功能。 9、作为细胞-细胞之间传递信息的重要分子。 10、在病毒和朊蛋白等多种病原体之间起着独特的作用。外泌体无论在疾病诊断、微环境调控机制还是在药物载体改造等方面都受到了越来越多的关注。福建云序外泌体结果
虽然研究者对细胞释放外泌体的具体过程知之甚少,但大多数含有内膜系统的哺乳动物细胞均可分泌外泌体。外泌体有多种分泌途径:一种是组成型分泌途径,例如免疫系统的B细胞、树突状细胞(DCs)和肥大细胞,对外泌体的研究大部分来自于免疫细胞,而目前在非免疫细胞中生理性外泌体的分泌很大程度上是未知的;另一种途径是通过细胞间相互作用刺激分泌外泌体,例如鼠DCs在与抗原特异性CD4+ T淋巴细胞相互作用时可分泌更高水平的外泌体[4];其他类型的细胞还可以通过钙离子载体或其他刺激分泌外泌体[5]。黑龙江技术外泌体平台外泌体在哺乳期的免疫调节过程中起到重要的作用。
外泌体是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡 (30-150nm),现今,其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年,外泌体于绵羊网织红细胞中被发现, 1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中 。 所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。
外泌体蛋白有以下几类:外泌体中常见的蛋白质多与其生物发生机制有关,外泌体含有的细胞质蛋白,如膜蛋白和RAB蛋白,可以促进MVBs与细胞膜的融合及外泌体的释放;Tsg-101及附属蛋白质Alix参与ESCRT过程,促进内体膜的凹陷。外泌体含有参与抗原呈递的蛋白质,如CD1、MHCⅠ和MHCⅡ,其在免疫调节中发挥重要作用,MHCⅠ还参与向T细胞呈递抗原的生理过程。外泌体表面还存在热休克蛋白,如HSP70和HSP90,促进了抗原肽与MHCⅠ及MHCⅡ的结合。外泌体含有信号转导蛋白,如G蛋白和蛋白激酶。外泌体含有丰富的蛋白水解酶,这表明外泌体能够促进细胞转移。外泌体中还含有细胞质微管蛋白、肌动蛋白和肌动蛋白结合蛋白。但目前未发现外泌体中含有与内质网、高尔基体和细胞核相关的蛋白质。外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡,参与细胞间通讯。
流式细胞仪不仅可以检测囊泡的大小、数量,而且通过荧光标记可以检测囊泡的来源,将囊泡进行分类,因此,流式细胞仪是进行囊泡快速、高通量、多参数检测的较优de选择。但是,传统流式细胞仪无法测量<300nm的外泌体,因此很难进行精确地定量和定性分析。 纳米颗粒跟zong分析技术(Nanosight Tracking Analysis,NTA)是一种比较新颖的表征纳米颗粒的方法,它可直接并实时观测纳米颗粒。NTA 通过光学显微镜收集纳米颗粒的散射光信号,拍摄一段纳米颗粒在溶液中做布朗运动的影像,对每个颗粒的布朗运动进行追踪和分析,从而计算出纳米颗粒的流体力学半径和浓度。外泌体可促进生物体免疫应答反应。宁夏云序生物外泌体分析
过滤离心:这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样纯度不足。福建云序外泌体结果
外泌体富含胆固醇和鞘磷脂。2007年, Valadi等发现鼠的肥大细胞分泌 的 exosom e可以被人的肥大细胞捕获,并且其携带的mRNA成分可以进入细胞浆中可以被翻译成蛋白质,不但是mRNA,exosomes所转移的microRNA同样具有生物活性,在进入靶细胞后可以靶向调节细胞中mRNA的水平。这一发现使得研究人员对exosome的研究热情激增,截止目前已经通过286项研究发现了41860种蛋白质、2838种microRNA、3408种mRNA。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不但包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分。福建云序外泌体结果
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