辽宁云序生物外泌体mRNA测序

多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中 。 所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。 有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。 外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡，参与细胞间通讯，对外泌体的研究兴趣日益增长，无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。常规的转录组测序采用Oligo d(T)法纯化带Poly(A)尾巴的RNA分子。辽宁云序生物外泌体mRNA测序

目前，外泌体的分离多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤三种方法。磁珠免疫捕获：利用外泌体表面特有的表面标记物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合，即可将外泌体吸附并分离出来。磁珠法具有特异性高、操作简便、不影响外泌体形态完整等优点，但是效率低，外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响，不利于下游实验，难以普遍普及。人体中几乎所有类型的细胞都能产生外泌体，它普遍存在于组织细胞间隙及体液中。以往认为外泌体属于细胞“垃圾”，且因此低估它的重要作用。虽然外泌体在30多年前被发现，但是直到较近才开始意识到其重要性。宁夏云序外泌体全转录测序所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中。

外泌体（Exosomes）是一种直径在40-100nm的圆形单层膜结构，是细胞外泌囊泡中体积较小的一种。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分，如微小RNA(microRNA，miRNA)、长链非编码RNA（longnon-codingRNA，lncRNA）、mRNA和环状RNA（circularRNA，circRNA）。环状RNA（circularRNA）是近来新发现的一种非编码RNA分子，研究趋势火爆。环状RNA表达具有组织和疾病特异性，与组织发育、疾病发生和发展密切相关。此外环状RNA不易降解，可做为新型疾病分子标志物。外泌体环状RNA的研究势必会为疾病诊断与医治带来极大帮助。

如今外泌体分析用于临床诊断和医治监控显然是一个重要领域。特定的跨膜蛋白信号可以识别tumour特异性的外泌体，而外泌体内蛋白的改变可以用于推断tumour细胞对医治措施的反应。虽然外泌体有如此大的临床价值，但是临床日常外泌体分析却十分困难，这是因为目前缺少足够灵敏且快速的试验平台，尤其是进行外泌体蛋白质分析。 目前人们利用电镜来分析外泌体的大小和形态，利用流式细胞仪来分析细胞表面标记，通过Western blot和ELISA等方法对蛋白进行分析，或通过qPCR和新一代测序NGS来分析RNA。免疫磁珠法：可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操作简单，但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。

外泌体作为一种新型细胞间信息交流的方式，在细胞间物质运输和信号交流中发挥重要作用，并参与了机体多种生理和病理过程。研究发现，外泌体中存在的非编码RNA（ncRNA）与胃ai的发生、发展和耐药性存在关联。此外，外泌体在胃ai进展和幽门螺杆菌感ran（胃ai的主要危险因素）之间的相互作用中起着至关重要的作用。因此，靶向外泌体或这些外泌体衍生的ncRNAs可能是一种医治胃ai的新方法。来自北京大学tumour医院的邢晓芳、季加孚、李子禹等人在MolecularCancer上发表综述文章，总结了外泌体的起源和特征以及外泌体ncRNA和胃ai之间的详细联系，指出靶向外泌体极其衍生ncRNA在诊断、医治胃ai方面具有广阔前景。环状RNA（circular RNA）是近来新发现的一种非编码RNA分子，研究趋势火爆。广西分析外泌体LncRNA测序

细胞样品或新鲜组织块可用TRIZOL或RNA保护剂处理，液氮冻存后-80℃保存。辽宁云序生物外泌体mRNA测序

1983年，外泌体于绵羊网织红细胞中被发现，1987年Johnstone将其命名为“Exosome”。随后的10年，外泌体并未受到足够的重视。直至1996年，G.Raposo发现类似于B淋巴细胞能分泌抗原提呈外泌体，这种外泌体携带MHC-Ⅱ类分子、共刺激因子和粘附因子。研究表明这种B细胞来源的外泌体可以直接刺激效应CD4+细胞的抗tumour反应。1998年，L.Zitvogel等发现树突细胞（DCcell）也能产生有抗原提呈能力的外泌体，而且外泌体含有功能性的MHC-Ⅰ类和Ⅱ类分子，还有共刺激因子。这种外泌体启动了特异性的CTL杀伤作用，促进了T细胞依赖的抗tumour效应。辽宁云序生物外泌体mRNA测序

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