外泌体(Exosomes)是一种直径在40-100 nm的圆形单层膜结构,是细胞外泌囊泡中体积较小的一种。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分,如微小RNA ( microRNA,miRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)、mRNA和环状RNA(circular RNA,circRNA)。环状RNA(circular RNA)是近来新发现的一种非编码RNA分子,研究趋势火爆。环状RNA表达具有组织和疾病特异性,与组织发育、疾病发生 和发展密切相关。此外环状RNA不易降解,可做为新型疾病分子标志物。外泌体环状RNA的研究势必会为疾病诊断与医治带来极大帮助。外泌体无论在疾病诊断、微环境调控机制还是在药物载体改造等方面都受到了越来越多的关注。贵州测序外泌体结果
15%-25%的结直肠ai(CRC)患者在较初诊断时出现肝转移,然而,肝转移的确切机制尚不清楚。来自东南大学的陈瑞和来自南京医科大学di一附属医院的王学浩研究团队近日在Hepatology发表较新研究,揭示了低氧诱导的外泌体miR-135a-5p通过转移前生态位与CRC肝转移的发展、临床严重程度和预后相关。miR-135a-5p可能是阻止CRC肝转移的一个潜在靶点。原发性结直肠ai(CRC)病变中的低氧微环境促进miR-135a-5p外泌体释放,选择性地在肝脏中启动有利的转移前生态位形成。中国香港上海云序外泌体分析研究外泌体在这些过程中的作用影响,发表文章的周期会较长,但是相对的,影响因子也高,很多都在10分以上。
外泌体的内容物可以通过生物工程手段修饰。其中,将选择的蛋白内容物与外泌体的EV-sorting proteins通过细胞工程融合是较常用的方法。这种方法既可以在腔内储存可输送到靶细胞的内容物,也可以让内容物与靶细胞表面受体结合来增强它们的医治信号特性或靶向能力。因此,Silva等在单外泌体水平上,通过分析工程化外泌体技术对不同外泌体的EV-sorting proteins在促进蛋白内容物的装载效率进行了评估。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分。
外泌体的提取方式: 1、离心法:此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足。 2、过滤离心:这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样纯度不足。 3、密度梯度离心法:用此种方法分离到的外泌体纯度较高,但是前期准备工作繁杂 4、免疫磁珠法:这种方法可以保证外泌体形态的完整,特异性高、操作简单,但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。 5、色谱法:此种方法分离出的外泌体大小均一,但设备特殊,应用不普遍。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分。外泌体核酸包括诸多种类的long RNAs和以microRNA为dai表的small RNAs。
H.Valadi等发现,细胞之间可以通过外泌体中的RNA来交换遗传物质。这意味着细胞可以通过外泌体影响另外一个细胞,甚至可以把自己的基因强加给另外一个细胞。研究人员逐渐对小小的外泌体产生了极大的好奇。他们发现,tumour细胞的外泌体与正常细胞的外泌体之间存在差异,tumour的外泌体会促进tumour的生长和转移,tumour周围组织细胞分泌的外泌体具备杀伤tumour细胞的能力,等等。2013年的诺贝尔生理或医学奖颁给了三位科学家,他们分别是美国科学家James E. Rothman和Randy W. Schekman,德国科学家Thomas C. Südhof,以表彰他们发现细胞内部囊泡(外泌体等)运输调控机制。使外泌体的研究达到全新的高度。就外泌体的研究方向而言,干细胞、免疫、microRNA、靶向给药、ai症的诊断及医治等都是热门研究领域。免疫磁珠法:可以保证外泌体形态的完整,特异性高、操作简单,但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。上海研究外泌体环状RNA测序
细胞样品或新鲜组织块可用TRIZOL或RNA保护剂处理,液氮冻存后-80℃保存。贵州测序外泌体结果
外泌体作为一种新型细胞间信息交流的方式,在细胞间物质运输和信号交流中发挥重要作用,并参与了机体多种生理和病理过程。研究发现,外泌体中存在的非编码RNA(ncRNA)与胃ai的发生、发展和耐药性存在关联。此外,外泌体在胃ai进展和幽门螺杆菌感ran(胃ai的主要危险因素)之间的相互作用中起着至关重要的作用。因此,靶向外泌体或这些外泌体衍生的ncRNAs可能是一种医治胃ai的新方法。来自北京大学tumour医院的邢晓芳、季加孚、李子禹等人在Molecular Cancer上发表综述文章,总结了外泌体的起源和特征以及外泌体ncRNA和胃ai之间的详细联系,指出靶向外泌体极其衍生ncRNA在诊断、医治胃ai方面具有广阔前景。贵州测序外泌体结果
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