人体中几乎所有类型的细胞都能产生外泌体,它普遍存在于组织细胞间隙及体液中。以往认为外泌体属于细胞“垃圾”,且因此低估它的重要作用。虽然外泌体在30多年前被发现,但是直到较近才开始意识到其重要性。外泌体(Exosome)是一种直径为30-100nm的纳米级脂质包裹体结构,内部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物质。外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液和母乳,外泌体是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体 )的膜性囊泡。 包括tumour细胞在内的几乎所有类型的细胞,都可以产生并释放外泌体。外泌体鉴定方式:主要有四种方法:透射电子显微镜(TEM)、Nanosight、Western Blot和流式细胞术。测序外泌体文章
外泌体富含胆固醇和鞘磷脂。2007年, Valadi等发现鼠的肥大细胞分泌 的 exosom e可以被人的肥大细胞捕获,并且其携带的mRNA成分可以进入细胞浆中可以被翻译成蛋白质,不但是mRNA,exosomes所转移的microRNA同样具有生物活性,在进入靶细胞后可以靶向调节细胞中mRNA的水平。这一发现使得研究人员对exosome的研究热情激增,截止目前已经通过286项研究发现了41860种蛋白质、2838种microRNA、3408种mRNA。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不但包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分。云序生物外泌体miRNA测序人体几乎所有类型的细胞都能分泌外泌体,外泌体普遍存在并分布于各种体液中。
外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分,如微小RNA ( microRNA,miRNA)、长链非编码RNA和mRNA、环状RNA(circular RNA,circRNA)。外泌体所携带的这些RNA统称为外泌体来源RNA,具有完整的序列结构和生物活性。外泌体中大约含几百种miRNAs,通过外泌体miRNA测序,研究人员可获得与疾病相关的遗传特征(生物标志物),为将来tumour医治领域通过液体活检来寻找有效药 物。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分。
已有研究显示人类胚胎干细胞来源的MSC也可释放外泌体发挥心肌保护的作用。有研究在小鼠心肌缺血-再灌注损伤模型中发现,心肌内递送MSCs外泌体,可使心肌梗死面积减少,有效提高心肌细胞存活率。 蔡东升博士及其研究团队证明,下丘脑干细胞分泌的外泌体可以延缓衰老。该研究发现,随着下丘脑干细胞的消失,小鼠开始出现衰老症状。但随着植入经过改造的健康的下丘脑干细胞后,小鼠的衰老症状延迟并且寿命延长,进一步研究发现,该过程一部分是下丘脑干细胞通过释放外泌体来实现的。免疫磁珠法:可以保证外泌体形态的完整,特异性高、操作简单,但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。
目前,外泌体的分离多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤三种方法。磁珠免疫捕获:利用外泌体表面特有的表面标记物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合,即可将外泌体吸附并分离出来。磁珠法具有特异性高、操作简便、不影响外泌体形态完整等优点,但是效率低,外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响,不利于下游实验,难以普遍普及。人体中几乎所有类型的细胞都能产生外泌体,它普遍存在于组织细胞间隙及体液中。以往认为外泌体属于细胞“垃圾”,且因此低估它的重要作用。虽然外泌体在30多年前被发现,但是直到较近才开始意识到其重要性。色谱法:此种方法分离出的外泌体大小均一,但设备特殊,应用不普遍。中国香港研究外泌体文章
外泌体大小均一, 直径在40~100 nm。测序外泌体文章
上皮-间质转化(EMT)被报道参与tumour细胞和tumour相关巨噬细胞(TAM)之间的相互作用,且EMT的结直肠ai(CRC)细胞促进TAM的M2极化,但具体的机制如何还不清楚。武汉大学中南医院熊斌和Wang Shuyi合作在Molecular Therapy发表文章,EMT-CRC产生高表达miR-106b的外泌体,直接传递给巨噬细胞,导致巨噬细胞miR-106b升高,激huoPI3Kγ/AKT/mTOR信号,促进M2的极化,从而促进tumour进展。揭示了CRC进展的新机制,为预防CRC转移提供了潜在的靶点。测序外泌体文章
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