中国澳门外泌体文章

多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中 。 所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。 有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。 外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡，参与细胞间通讯，对外泌体的研究兴趣日益增长，无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。一些LncRNA可以通过与miRNA结合，调节miRNA靶基因的表达。中国澳门外泌体文章

外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分，如微小RNA ( microRNA，miRNA)、长链非编码RNA和mRNA、环状RNA（circular RNA，circRNA）。外泌体所携带的这些RNA统称为外泌体来源RNA，具有完整的序列结构和生物活性。外泌体中大约含几百种miRNAs，通过外泌体miRNA测序，研究人员可获得与疾病相关的遗传特征（生物标志物），为将来tumour医治领域通过液体活检来寻找有效药 物。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分。福建云序外泌体全转录测序外泌体可通过化学信号参与ai细胞的转移。

超速离心法既耗时又费力。现在您可以通过使用灵活可控的总外泌小体分离试剂，从不同的起始样本中方便地富集完整的外泌小体。这些试剂及其配套的试验方案完美适用于普遍的实验计划，包括小输入样本量和多种样本处理实验。 从培养细胞中富集的总外泌小体（使用总外泌小体分离试剂或超速离心）可以通过免疫磁性捕获法进一步纯化为亚组分。可使用基于Dynabeads?的CD63特异性试剂，或将链霉亲和素试剂与特定的生物素化抗体结合使用，可基于表面抗原的免疫反应纯化得到任何所需的亚组分。

上皮-间质转化（EMT）被报道参与tumour细胞和tumour相关巨噬细胞（TAM）之间的相互作用，且EMT的结直肠ai（CRC）细胞促进TAM的M2极化，但具体的机制如何还不清楚。武汉大学中南医院熊斌和Wang Shuyi合作在Molecular Therapy发表文章，EMT-CRC产生高表达miR-106b的外泌体，直接传递给巨噬细胞，导致巨噬细胞miR-106b升高，激huoPI3Kγ/AKT/mTOR信号，促进M2的极化，从而促进tumour进展。揭示了CRC进展的新机制，为预防CRC转移提供了潜在的靶点。在神经系统和精神疾病，中医学及其他领域也有不少外泌体相关项目中标。

超过4 600种蛋白质与外泌体有关。外泌体蛋白有以下几类：①外泌体中常见的蛋白质多与其生物发生机制有关，外泌体含有的细胞质蛋白，如膜蛋白和RAB蛋白，可以促进MVBs与细胞膜的融合及外泌体的释放；Tsg-101及附属蛋白质Alix参与ESCRT过程，促进内体膜的凹陷。②外泌体含有参与抗原呈递的蛋白质，如CD1、MHCⅠ和MHCⅡ，其在免疫调节中发挥重要作用，MHCⅠ还参与向T细胞呈递抗原的生理过程。外泌体表面还存在热休克蛋白，如HSP70和HSP90，促进了抗原肽与MHCⅠ及MHCⅡ的结合。③外泌体含有信号转导蛋白，如G蛋白和蛋白激酶。④外泌体含有丰富的蛋白水解酶，这表明外泌体能够促进细胞转移。⑤外泌体中还含有细胞质微管蛋白、肌动蛋白和肌动蛋白结合蛋白。但目前未发现外泌体中含有与内质网、高尔基体和细胞核相关的蛋白质。样品运输：样品置于1.5mLEppendorf管中，封口膜封好，干冰运输。天津云序外泌体文章

RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中，-80℃保存，避免反复冻融。中国澳门外泌体文章

目前，外泌体的分离多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤三种方法。磁珠免疫捕获：利用外泌体表面特有的表面标记物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合，即可将外泌体吸附并分离出来。磁珠法具有特异性高、操作简便、不影响外泌体形态完整等优点，但是效率低，外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响，不利于下游实验，难以普遍普及。人体中几乎所有类型的细胞都能产生外泌体，它普遍存在于组织细胞间隙及体液中。以往认为外泌体属于细胞“垃圾”，且因此低估它的重要作用。虽然外泌体在30多年前被发现，但是直到较近才开始意识到其重要性。中国澳门外泌体文章

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