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外泌体的分离方法包括差速离心法、ExoQuick外泌体快速提取试剂盒法、免疫亲和沉降法、蔗糖密度梯度-超速离心法和微流体分离法等。其中差速离心法是较常用的外泌体分离方法,即通过较低的离心速度从培养基中分离出颗粒较大的物质,然后外泌体、小胞外囊泡及蛋白质再以非常高的速度(100 000×g)离心产生沉淀。因此,差速离心只能富集而不能纯化外泌体。富集的外泌体、小胞外囊泡及蛋白质通过生物化学、质谱或电子显微镜等相关技术进行物理、化学及生物表征,从而得到进一步鉴别。1987年Johnstone将其命名为“exosome”。中国澳门研究外泌体LncRNA测序

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外泌体作为一种新型细胞间信息交流的方式,在细胞间物质运输和信号交流中发挥重要作用,并参与了机体多种生理和病理过程。研究发现,外泌体中存在的非编码RNA(ncRNA)与胃ai的发生、发展和耐药性存在关联。此外,外泌体在胃ai进展和幽门螺杆菌感ran(胃ai的主要危险因素)之间的相互作用中起着至关重要的作用。因此,靶向外泌体或这些外泌体衍生的ncRNAs可能是一种医治胃ai的新方法。来自北京大学tumour医院的邢晓芳、季加孚、李子禹等人在Molecular Cancer上发表综述文章,总结了外泌体的起源和特征以及外泌体ncRNA和胃ai之间的详细联系,指出靶向外泌体极其衍生ncRNA在诊断、医治胃ai方面具有广阔前景。江苏云序外泌体LncRNA测序外泌体中携带有多种蛋白质、脂类、RNA等重要信息。

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转移导致绝大多数的结直肠ai(CRC)相关死亡,但目前对CRC原发灶中转移起始细胞的具体特征和潜在机制知之甚少,而环状RNA(circRNAs)是否参与其中也尚不明确。来自中山大学的谢丹研究团队较新发表在Molecular Cancer的研究揭示了名为circLONP2的环状RNA(circRNAs)在CRC进展过程中是关键的转移启动分子。circLONP2通过调控miR-17的细胞内成熟和细胞间转移,导致原发部位的转移启动能力扩散,加速tumour细胞跨器guan转移。circLONP2或可作为CRC医治中的预后预测因子和新的抗转移医治靶点。

外泌体的内容物可以通过生物工程手段修饰。其中,将选择的蛋白内容物与外泌体的EV-sorting proteins通过细胞工程融合是较常用的方法。这种方法既可以在腔内储存可输送到靶细胞的内容物,也可以让内容物与靶细胞表面受体结合来增强它们的医治信号特性或靶向能力。因此,Silva等在单外泌体水平上,通过分析工程化外泌体技术对不同外泌体的EV-sorting proteins在促进蛋白内容物的装载效率进行了评估。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。

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外泌体中包含多种miRNA,调控靶细胞生理活性,本文发现脂肪组织巨噬细胞(adipose tissue macrophages,ATMs)分泌的外泌体中含有miRNA并可以转移到胰岛素的靶细胞中,从而调节靶细胞对胰岛素的敏感性以及体内的总糖代谢稳态。Olefsky团队从肥胖小鼠脂肪组织内分离出巨噬细胞,再收集细胞里的外泌体,用它们处理体型瘦的健康小鼠,发现接受了外源外泌体的小鼠虽然体重依然正常,但却出现肥胖诱导型胰岛素抵抗症状。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分,过滤离心:这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样纯度不足。吉林云序外泌体分析

一些LncRNA可以通过与miRNA结合,调节miRNA靶基因的表达。中国澳门研究外泌体LncRNA测序

目前,外泌体的分离多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤三种方法。磁珠免疫捕获:利用外泌体表面特有的表面标记物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合,即可将外泌体吸附并分离出来。磁珠法具有特异性高、操作简便、不影响外泌体形态完整等优点,但是效率低,外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响,不利于下游实验,难以普遍普及。人体中几乎所有类型的细胞都能产生外泌体,它普遍存在于组织细胞间隙及体液中。以往认为外泌体属于细胞“垃圾”,且因此低估它的重要作用。虽然外泌体在30多年前被发现,但是直到较近才开始意识到其重要性。中国澳门研究外泌体LncRNA测序

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外泌体是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡 (30-150nm),现今,其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年,外泌体***于绵羊 网织红细胞中被发现, 1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中 。 所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。 有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。 外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡,参与细胞间通讯,对外泌体的研究兴趣日益增长,无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。
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