上海测序外泌体研究

外泌体在细胞间通讯中发挥重要作用，可以影响细胞的多种功能，包括细胞因子的产生、细胞增殖、细胞凋亡和代谢等。目前认为，外泌体主要通过以下方式与受体细胞结合：①外泌体将膜蛋白或其内容物转移至受体细胞，被受体细胞膜完全吞噬，这一过程需要非常规脂质LBPA和附属蛋白质Alix；②外泌体膜与受体细胞膜直接融合；③外泌体上的跨膜蛋白直接作用于受体细胞膜表面的信号分子。例如，滤泡树突细胞分泌的外泌体携MHC-跨膜蛋白，其可刺激B淋巴细胞和T淋巴细胞表面的信号分子。外泌体与受体细胞以何种方式结合取决于外泌体的大小及外泌体携带的物质。外泌体在病毒和朊蛋白等多种病原体之间起着独特的作用。上海测序外泌体研究

目前，外泌体的分离多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤三种方法。 超速离心：耗时耗力，往往需要8-30个小时；每次较多只能处理6个样品；需要大量的起始材料；产量不高。需一台超速离心机。 将欲提取的细胞培养上清液10ml，在4 ℃的环境下，300×g 10min，2000×g 20min，弃沉淀，去除细胞；然后 l0,000×g 30min ，弃沉淀，去除亚细胞成分；再用10,000×g 60min，弃掉上清液，较后所得沉淀既为exosome ，用30ml PBS 溶液重新悬浮沉淀物，混匀后再以10,000×g 60min，用 l ml PBS溶液悬浮沉淀物提纯的exosome 溶液分别装入eppendorf 管内，置于-80℃冰箱内保存备用。山西修饰外泌体结果外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。

上皮-间质转化（EMT）被报道参与tumour细胞和tumour相关巨噬细胞（TAM）之间的相互作用，且EMT的结直肠ai（CRC）细胞促进TAM的M2极化，但具体的机制如何还不清楚。武汉大学中南医院熊斌和Wang Shuyi合作在Molecular Therapy发表文章，EMT-CRC产生高表达miR-106b的外泌体，直接传递给巨噬细胞，导致巨噬细胞miR-106b升高，激huoPI3Kγ/AKT/mTOR信号，促进M2的极化，从而促进tumour进展。揭示了CRC进展的新机制，为预防CRC转移提供了潜在的靶点。

人体中几乎所有类型的细胞都能产生外泌体，它普遍存在于组织细胞间隙及体液中。以往认为外泌体属于细胞“垃圾”，且因此低估它的重要作用。虽然外泌体在30多年前被发现，但是直到较近才开始意识到其重要性。外泌体（Exosome）是一种直径为30-100nm的纳米级脂质包裹体结构，内部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物质。外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳，外泌体是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体 )的膜性囊泡。 包括tumour细胞在内的几乎所有类型的细胞，都可以产生并释放外泌体。外泌体可促进生物体免疫应答反应。

外泌体是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡 (30-150nm)，现今，其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年，外泌体于绵羊网织红细胞中被发现， 1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中 。 所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。外泌体鉴定方式：主要有四种方法：透射电子显微镜（TEM）、Nanosight、Western Blot和流式细胞术。山西修饰外泌体

一些LncRNA可以通过与miRNA结合，调节miRNA靶基因的表达。上海测序外泌体研究

外泌体普遍存在于生物体的免疫应答反应中，外泌体可以通过介导促炎症反应来促进免疫反应，tumour细胞分泌的外泌体还可以抑制免疫反应。tumour细胞分泌的外泌体可以促进ai症的侵袭和转移，加快ai症部位的血管生成，有助于tumour微环境中的上皮间充质转化，并且增强tumour的耐药性。外泌体通过与受体细胞特异性结合的方式，传递各种生物学信息，发挥重要的生物学作用。本文分别就外泌体的产生机制、分离与鉴定、其对机体免疫过程和疾病的发生和发展的作用等方面的研究进展进行综述。上海测序外泌体研究

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