MSCs是干细胞家族的重要成员,属于多能干细胞,因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。人间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下,可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞,还能向受损组织趋化。MSCs通过旁分泌方式释放细胞因子,连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能,可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器guan损伤修复,是一种有前景的能够用于疾病医治的干细胞来源。在神经系统和精神疾病,中医学及其他领域也有不少外泌体相关项目中标。服务外泌体
目前,外泌体的分离多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤三种方法。磁珠免疫捕获:利用外泌体表面特有的表面标记物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合,即可将外泌体吸附并分离出来。磁珠法具有特异性高、操作简便、不影响外泌体形态完整等优点,但是效率低,外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响,不利于下游实验,难以普遍普及。人体中几乎所有类型的细胞都能产生外泌体,它普遍存在于组织细胞间隙及体液中。以往认为外泌体属于细胞“垃圾”,且因此低估它的重要作用。虽然外泌体在30多年前被发现,但是直到较近才开始意识到其重要性。福建技术外泌体环状RNA测序外泌体对凝血和血管生成其促进作用。
虽然研究者对细胞释放外泌体的具体过程知之甚少,但大多数含有内膜系统的哺乳动物细胞均可分泌外泌体。外泌体有多种分泌途径:一种是组成型分泌途径,例如免疫系统的B细胞、树突状细胞(DCs)和肥大细胞,对外泌体的研究大部分来自于免疫细胞,而目前在非免疫细胞中生理性外泌体的分泌很大程度上是未知的;另一种途径是通过细胞间相互作用刺激分泌外泌体,例如鼠DCs在与抗原特异性CD4+ T淋巴细胞相互作用时可分泌更高水平的外泌体[4];其他类型的细胞还可以通过钙离子载体或其他刺激分泌外泌体[5]。
外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族(CD63, CD81 和CD9))、热休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些细胞特异性的蛋白包括A33(结肠上皮细胞来源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈细胞来源)、CD86(抗原提呈细胞来源)以及乳凝集素(不成熟的树突状细胞)。其它一些外泌体中的蛋白包括多种的代谢类的酶( 烯醇化酶 1, 醛缩酶 1, PKM2, PGK1, PDIA3, GSTP1,DPP4, AHCY, TPL1, 抗氧化蛋白, P4HB, LDH, 亲环素 A,FASN, MDH1 和CNP)、核糖体蛋白(RPS3)、信号转导因子(黑色素瘤分化相关因子, ARF1, CDC42, 人类红细胞膜整合蛋白, SLC9A3R1)、粘附因子(MFGE8、整合素)、细胞骨架蛋白以及泛素等。免疫磁珠法:可以保证外泌体形态的完整,特异性高、操作简单,但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。
外泌体的生物学功能:1、first报道的外泌体生物功能是红血球成熟过程中排出来的蛋白质。 2、进一步的研究表明其功能包括排泄不必要的蛋白质和RNA等物质。 3、可促进生物体免疫应答反应。 4、对凝血和血管生成其促进作用。 5、可通过化学信号参与ai细胞的转移。 6、在哺乳期的免疫调节过程中起到重要的作用。 7、不仅参与触发下游信号传导,而且特异性靶向受体细胞和交换蛋白。 8、可提供特殊的核酸且起到运输功能。 9、作为细胞-细胞之间传递信息的重要分子。 10、在病毒和朊蛋白等多种病原体之间起着独特的作用。离心法:此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足。河南云序生物外泌体分析
外泌体是从母本细胞内部分泌出来,因此会带有母本细胞特定的遗传物质(蛋白、核酸等)。服务外泌体
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