湖南云序外泌体分析

外泌体（Exosomes）来源于晚期核内体（也称为多囊泡体）的囊泡，是由活细胞分泌而来，是一类大小介于30-200nm的含有DNA、RNA、蛋白质和脂类的微囊，几乎所有类型的细胞都能分泌，普遍存在于血清、血浆 、尿液等各种体液中。Exosomes 参与调控重要的细胞生理活动，在免疫应答、凋亡、血管生成、炎症反应、凝结过程中的作用均有报道，成为多种疾病医治的潜在靶点、早期诊断标记物、靶向药物载体等，成为近年来生命科学及医学领域的重要研究热点。外泌体（Exosomes）是一种直径在40-100 nm的圆形单层膜结构，是细胞外泌囊泡中体积较小的一种。湖南云序外泌体分析

外泌体蛋白有以下几类：外泌体中常见的蛋白质多与其生物发生机制有关，外泌体含有的细胞质蛋白，如膜蛋白和RAB蛋白，可以促进MVBs与细胞膜的融合及外泌体的释放；Tsg-101及附属蛋白质Alix参与ESCRT过程，促进内体膜的凹陷。外泌体含有参与抗原呈递的蛋白质，如CD1、MHCⅠ和MHCⅡ，其在免疫调节中发挥重要作用，MHCⅠ还参与向T细胞呈递抗原的生理过程。外泌体表面还存在热休克蛋白，如HSP70和HSP90，促进了抗原肽与MHCⅠ及MHCⅡ的结合。外泌体含有信号转导蛋白，如G蛋白和蛋白激酶。外泌体含有丰富的蛋白水解酶，这表明外泌体能够促进细胞转移。外泌体中还含有细胞质微管蛋白、肌动蛋白和肌动蛋白结合蛋白。但目前未发现外泌体中含有与内质网、高尔基体和细胞核相关的蛋白质。湖北上海云序外泌体结果近年来,研究学者相继发现子宫液、输卵管液、胎盘中也存在外泌体。

大多数常规的膜出芽过程是使膜从细胞器变形到细胞质中，而外泌体是由于细胞膜内吞形成内体，内体限制膜发生多处凹陷，向内出芽形成微囊泡(intraluminal vesicles，ILVs)，从而转变为具有动态亚细胞结构的多囊泡体(multi-vesicle bodys，MVBs)，即晚期内体。MVBs可以在内体限制膜处通过至少2种机制产生：一种是内吞体分选转运复合体机制(endosomal sorting complex required for transport，ESCRT)，另一种是非依赖性的ESCRT机制。ESCRT机制由一组胞质蛋白复合物发挥作用，其能识别泛素化修饰的膜蛋白。

抗血管生成的酪氨酸激酶抑制剂（AA-TKI）是结直肠ai的有效疗法。在临床应用中，部分患者因各种原因停用AA-TKI后，常发生tumour血管再生。暨南大学的张冬梅团队及叶文才团队在JournalofExtracellularVesicles上发表的一项较新研究发现，在结直肠ai小鼠模型中，停用AA-TKI后，tumour血管周围的细胞可通过胞外囊泡中的Gas6激huoAXL信号通路，以招募血管内皮祖细胞，从而促进tumour血管再生。AXL抑制剂可抑制tumour血管再生，而联用AA-TKI与AXL抑制剂可抑制结直肠ai小鼠的tumour生长并延长生存期。外泌体发表的文章也绝大部分与其在tumour的形成，耐药性，检测等方面有关。

外泌体由细胞分泌释放出来，在血液等体液内传播，较后又可被其他细胞吞噬，是细胞间通讯的重要介质。越来越多的证据表明，宿主细胞或tumour细胞分泌的外泌体参与了tumour发生、生长、侵袭和转移。免疫细胞和tumour细胞之间通过外泌体进行信息交换，这种通讯方式在调节tumour免疫中发挥了双重作用。外泌体既可以通过抑制免疫细胞（DCs、NK细胞、CD4+和CD8+T细胞等）引发的抗tumour反应，以及诱导免疫抑制或调节细胞群（MDSCs、Tregs和Bregs）的免疫抑制。外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。安徽云序外泌体价格

常规的转录组测序采用Oligo d(T)法纯化带Poly(A)尾巴的RNA分子。湖南云序外泌体分析

外泌体的分离方法包括差速离心法、ExoQuick外泌体快速提取试剂盒法、免疫亲和沉降法、蔗糖密度梯度-超速离心法和微流体分离法等。其中差速离心法是较常用的外泌体分离方法，即通过较低的离心速度从培养基中分离出颗粒较大的物质，然后外泌体、小胞外囊泡及蛋白质再以非常高的速度(100000×g)离心产生沉淀。因此，差速离心只能富集而不能纯化外泌体。富集的外泌体、小胞外囊泡及蛋白质通过生物化学、质谱或电子显微镜等相关技术进行物理、化学及生物表征，从而得到进一步鉴别。湖南云序外泌体分析

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