主动药物装载⽅法，也称为远程药物装载⽅法，涉及在空脂质体产⽣后装载药物制剂。pH值或离⼦浓度的跨膜梯度是促进药物跨膜扩散进⼊脂质体内核的驱动⼒。药物包载过程⼤约需要5～30分钟，可达到较⾼的装载效率(90%以上)。Doxil是基于硫酸铵跨膜梯度的药物负载的典型例⼦。由于脂质体核⼼的(NH4)2SO4浓度远⾼于外界介质，具有⾼渗透性和⾟醇-缓冲分配系数的DOX-NH2中性分⼦通过脂质双分⼦层扩散，具有纤维状结晶形式的(DOX-NH3)2SO4沉淀在脂质体的核⼼产⽣。(DOX-NH3)2SO4的低溶解度使脂质体内渗透压降⾄比较低，从⽽保持脂质体的完整性。对于Myocet产品临床使⽤前先加载DOX。跨膜pH梯度是DOX加载的驱动⼒。Myocet在⼀个包装中有三瓶，包括1号瓶:：阿霉素HCl红⾊冻⼲粉；2号瓶：脂质体悬浮液溶于pH4-5300mM 柠檬酸中；3号瓶：碳酸钠缓冲液。临床使⽤前将空脂质体(2号瓶)注射到碳酸钠缓冲液(3号瓶)中，调节外脂质体介质pH值为7-8，然后与DOX⽣理盐⽔溶液混合。脂质体介质中中性形式的DOX分⼦(pKa=8.3)穿过脂质体双分⼦层，在囊泡内部形成独特的DOX-柠檬酸复合物。DOX-柠檬酸盐复合物呈现成束的柔性纤维，归因于DOX单体具有相对平坦的环形堆叠在⼀起形成纤维，负载效率可达95%以上。脂质体载药系统在疾病药物领域也具有很大的潜力。定做脂质体载药空化作用
递送核酸的脂质体中的脂质成分脂质体的脂质组成可以影响阳离子脂质的结构性质及其转染效率。由3β[N(N',N'Dimethylaminoethane)carbamoyl]cholesterol,(DC-Chol)和DOPE组成的阳离子脂质体被认为是高效基因传递的代表性脂质体。对于质粒DNA传递，DC-Chol与DOPE的***摩尔比被发现为1:2。质粒DNA的转染效率随着DC-Chol与质粒DNA质量比的增大而降低，比较高转染效率为3:1。**近的一项研究报道了不同的内吞途径对阳离子脂质体组成的可能依赖性。由质粒DNA加DC-Chol或DOPE为基础的阳离子脂质组成的脂质体优先通过内吞作用进入细胞，而包括1,2-二酰-3-三甲基丙烷胺(DOTAP)或DistearoylPhosphatidylcholine(DSPC)为基础的阳离子脂质体的脂质体则被非特异性的液相巨胞饮作用所吸收。重庆脂质体载药siRNA共包载不同的药物或活性成分可以通过协同作用提高脂质体的稳定性和包封率。
利用设计的脂质，他们发现由1,2-二油醇-3-二甲基氨基-丙烷（DODMA）阳离子脂质组成的核酸脂质颗粒在小鼠和食蟹猴中分别以0.01mg/kg和0.3mg/kg的剂量包封siRNA时表现出基因沉默作用。**近的一项构效关系研究表明，脂质结构的细微差异可能导致转染效率的明显差异。作者设计并合成了1,4,7,10-四氮杂环十二烷环基和含咪唑的阳离子脂质，它们具有不同的疏水区域(例如，分别为胆固醇和双薯蓣皂苷配基)。结果表明，这两种阳离子脂质在HEK293细胞中诱导有效的基因转染。
微流体法制备脂质体是一种先进的技术，具有很多优势，如能够精确控制脂质体的尺寸、提高脂质体的均匀性等。以下是微流体法制备脂质体的关键技术参数：一、流量比（FRR）流量比是微流体法制备脂质体的一个关键参数。在多个研究中都表明了FRR对脂质体的性能有着重要影响。例如，有研究指出，通过改变微流体通道中水相和乙醇相的流量比，可以调整脂质体的尺寸和药物负载量2427。当FRR增加时，亲水***物模拟装载效率会增加，并且疏水***物模拟剂加载效率和FRR具有正线性相关性24。同时，FRR还能影响脂质体的结构，通过改变FRR和初始脂质浓度，可以控制脂质体的单多层结构27。此外，FRR也是影响脂质体大小、蛋白质载荷和释放型材的关键因素20。脂质体载药系统需要实现对药物的控制释放，以提高药物的疗效和减少副作用。
两者都含有一种可电离的脂质，在低pH值下带正电荷(使RNA络合)，在生理pH值下为中性(减少潜在的毒性作用并促进有效载荷释放)。它们还含有聚乙二醇化脂质，以减少血清蛋白的抗体结合(调理)和吞噬细胞的***，从而延长体循环。辉瑞公司的阳离子脂质:peg脂质:胆固醇:DSPC的摩尔比为(43:1.6:47:9.4)，莫当纳疫苗的摩尔比为(50:1.5:38.5:10)。这些纳米颗粒直径为80 - 100纳米，每个脂质纳米颗粒含有大约100个mRNA分子。ALC-0315(辉瑞)和SM-102 (Moderna)这两种脂质都是叔胺，在低ph下质子化(因此带正电荷)。它们的碳氢链通过可生物降解的酯基连接，在mRNA传递后能够安全***。mRNA疫苗中使用的阳离子脂质含有支链烃链，这优化了非层状相的形成和mRNA的递送效率。peg -脂质均为PEG-2000偶联物。LNPs是在低pH (pH 4.0)条件下制备的，在这种条件下，可电离的脂质带正电，因此它很容易与mRNA形成复合物。微流控装置用于将水中含有mRNA的流与乙醇中含有脂质混合物的流混合。当快速混合时，这两种流的成分形成纳米颗粒，捕获带负电荷的mRNA。脂质体具有生物相容性好、无免疫原性、表面易功能化等优点。重庆脂质体载药siRNA
建立高效液相色谱（HPLC）法测定黄芩苷脂质体药物包封率，该方法准确、简便、快速。定做脂质体载药空化作用
脂质体成功降低了绿色荧光蛋白(GFP)的表达，并在H4II-E和HepG2细胞中显示出较低的细胞毒性。在其他研究中，精氨酸衍生物N,N-distearyl-N-methyl-N-2-(N’-arginyl)aminoethylammoniumchloride被用于阳离子脂质体与胆固醇的配制。将这些离子脂质体与c-MycsiRNA络合，并静脉注射给B16F10黑色素瘤小鼠(1.2mg/kg，每天1次，连续3天)，导致B16F10**对紫杉醇增敏。另一项研究建议使用精氨酸基DiLA2脂质作为载脂蛋白b特异性siRNA递送的阳离子脂质体组分。经小鼠静脉给药(ED50，0.1mg/kg)后，DiLA2和DOPE制备的阳离子脂质体显示出抑制肝脏载脂蛋白BmRNA表达的潜力。单次全身给药后，在给药后第2天观察到目标mRNA水平的比较大减少(约80%)，并且目标mRNA的减少持续到给药后第9天。定做脂质体载药空化作用
