养猪场非洲猪瘟检测技术

非洲猪瘟的临床症状因毒株毒力、猪只年龄及体质不同而存在差异，主要可分为超急性型、急性型、亚急性型和慢性型四种类型。超急性型多见于新疫区或高敏猪群，猪只通常无明显前兆症状即突然死亡，少数病例死亡前会出现短暂高热、呼吸急促及皮肤发红发绀，剖检无特征病变，易被误判。急性型是常见且危害比较大的类型，病死率接近100%，典型症状包括体温升至41-42℃并持续稽留，耳、四肢、腹部皮肤出现点状或斑块状出血，指压不褪色，同时伴随精神沉郁、厌食、呕吐、血便等症状，妊娠母猪会出现流产，剖检可见脾脏极度肿大、淋巴结严重出血等特征病变。非洲猪瘟（African swine fever, ASF）是由非洲猪瘟病毒 （ASF virus, ASFV）引起；养猪场非洲猪瘟检测技术

非洲猪瘟现场生物安全实操要点。生物安全是非洲猪瘟防控的关键防线，现场实操需覆盖人员、物资、环境、运输全环节。人员进场需经过更衣、消毒、脚踏消毒池，场外人员与车辆严禁进入生产区，场内人员固定岗位，禁止跨区流动。物资与饲料需经过熏蒸、紫外线消毒，严禁使用泔水、餐余垃圾喂猪，从源头阻断病毒传入。环境消毒需选择高效消毒剂，次氯酸盐、氢氧化钠、卫可等对病毒杀灭效果较好，栏舍、工具、地面需定期消杀，重点清理粪便、血渍等有机物残留。同时做好虫媒防控，定期灭杀软蜱、蚊蝇、老鼠等传播媒介，封堵鼠洞、清理杂草，消除媒介滋生环境。养殖场应设置隔离区，新引进猪只需隔离观察至少30天，检测阴性后方可混群，通过全流程闭环管理，很大程度降低病毒接触风险。东帝汶蓝通元非洲猪瘟发病症状表现非洲猪瘟是高度接触性传播性疾病，通过生物安全手段可以防止非洲猪瘟病毒传入猪场。

猪场常态化监测需构建异常猪优先、环境补位、抗体兜底的三级体系。每日巡栏重点观察采食、精神、粪便、行为，发现异常立即采样；每周对猪舍风机、水帘、料槽、门把手等高风险环境点位抽样检测；后备猪、引种猪、复养猪群常规开展尾根血抗体快检，纳入日常监测，快速筛查潜伏；结合便携式PCR定期复核，确保不漏过弱阳性、间歇性排毒样本，守住早期预警关口。

精细拔牙是阳性场控疫关键，需遵循快、准、严、全原则。一旦确诊阳性，立即锁定同栏、同单元、同通道关联猪只，快速采样判定，同步隔离、快速淘汰；对污染区域彻底空栏、清洗、消毒、静置，反复检测确认阴性后方可复养；复养前严格执行双阴（抗原阴、抗体阴）评估，优先引入健康后备群，避免带毒复养导致二次暴发，比较大限度降低扩散损失。

实验室检测是非洲猪瘟防控的抓手，当前主流方案为抗原快检卡、抗体快检卡、便携式荧光PCR三位一体组合。抗原快检卡适用于异常猪、死猪现场初筛，10分钟出结果，Ct≤32判定阳性；抗体快检卡适配尾根血/血清，***后7天即可检出，与ELISA符合率达100%，获WOAH认证，适合潜伏监测；便携式PCR搭配冻干微球试剂，灵敏度达0.1copy/μL，可常温保存，适合家庭农场、偏远猪场多点快速复核，实现早发现、早处置。

外生物安全是阻断病毒入场的有效防线，聚焦人员、车辆、物资、环境四大关键节点。节假日后必须强化人员淋浴更衣、鞋底消毒、核酸检测闭环管理；淘汰猪、转运猪专车，执行进场前彻底洗消、烘干、静置流程，严禁场外车辆随意靠近生产区；生产、生活物资进场前统一熏蒸或浸泡消毒，分类分区存放；雨后重点加强场区环境消毒，优化排水系统，避免积水滋生病毒，切断雨水传播途径。 鉴于非洲猪瘟（ASF）防控面临的挑战及高昂成本，防控工作重点放在预防上。基础生物安全措施至关重要。

非洲猪瘟的流行病学很复杂，迄今为止描述了四种流行传播循环。虽然这四种流行循环，但由于人类活动，可能发生循环间病毒溢出和传播。特别是，人类在非洲猪瘟病毒的长距离转运中扮演角色，从而有助于扩大其地理范围。在东部和南部非洲，非洲猪瘟病毒通过古老的森林循环持续存在，涉及自然生物媒介（即钝缘蜱属（Ornithodoros）软蜱）和自然哺乳动物宿主（即普通疣猪）。这种循环确保了病毒在局部环境中的持续存在(Jorietal.2013)。在非洲部分和伊比利亚半岛的家猪-蜱循环中，莫氏钝缘蜱复合体和不规则钝缘蜱分别作为生物媒介和局部病毒储存库(PJWilkinson1984)。在当今存在非洲猪瘟的世界大部分地区，家猪循环占主导地位。在此循环中，病毒通过动物间接触、摄入受污染的猪肉或其他受污染材料，或通过与污染物（如衣物、运输车辆或饲料供应）间接接触在家猪间传播。因此，人类活动在此传播循环中起关键作用，流行病学模式与当地/区域猪价值链的特性密切相关，这些特性可能因区域内外而异。除上述之外，还描述了第四种循环，称为野猪-栖息地循环。这种循环在欧洲大部分地区观察到，涉及野猪作为宿主，野猪尸体和局部环境在病毒持续存在中起关键作用。许多有机溶剂可通过破坏脂质包膜使病毒失活，但非洲猪瘟病毒对蛋白酶和核酸酶具有抗性。养猪场非洲猪瘟检测技术

非洲猪瘟病毒田间分离株的复苏须在原代猪单核细胞 / 巨噬细胞中进行，在常规细胞培养系统中复制效果不佳。养猪场非洲猪瘟检测技术

非洲猪瘟病毒的复制主要发生在单核细胞和巨噬细胞的细胞质中，尽管早期复制阶段也在细胞核中被描述。病毒进入通过网格蛋白介导的、发动蛋白依赖性的内吞作用和巨胞饮作用(Galindoetal.2015;HernaezandAlonso2010;Sánchez,Quintas,etal.2012)。肌动蛋白依赖性内吞作用和涉及微管活性的内吞流也参与其中，表明存在经典吞噬作用(Bastaetal.2010)。细胞受体及其病毒配体的身份仍未知。CD163曾被提议为推定受体(Lithgowetal.2014;Sánchez-Torresetal.2003)，但CD163基因敲除猪对非洲猪瘟病毒仍完全易感(Popescuetal.2017)。病毒基因组长度在170至193kb之间变化，包含150-167个开放阅读框。已鉴定出超过68种病毒蛋白，但其中一些的功能仍未知。养猪场非洲猪瘟检测技术

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