选择**适合的RNA转染试剂是一个复杂的过程，需要综合考虑多个因素。以下是一些关键的考虑因素和方法来帮助选择**适合的RNA转染试剂。一、考虑转染效率转染效率是选择RNA转染试剂的重要指标之一。较高的转染效率可以确保更多的细胞成功摄取和表达RNA。实验细胞类型：不同的细胞类型对转染试剂的敏感性可能不同。例如，一些细胞系可能更容易被某些转染试剂转染，而另一些细胞则可能对不同的试剂更敏感。在肾*细胞系786-O和ACHN中，微小RNA-1180（miR-1180）转染后，通过实时定量PCR和Westernblot等方法检测到p21mRNA和蛋白表达的变化，表明该转染在肾*细胞中有一定的效果1。在乳腺*细胞系T47D和非*性细胞MCF-10A中，研究比较了Lipofectamine2000和PAMAMG5两种转染试剂对短RNA的转染效率，结果显示Lipofectamine的转染效率明显高于PAMAMdendrimer2。检测方法：可以使用多种方法来检测转染效率，如荧光显微镜、流式细胞仪分析、实时定量PCR等。例如，在脂质体方法用于modRNA转染各种类型细胞的初步研究中，分别用RNAiMax及MessageMax将modGFP转染入MEF细胞，应用荧光显微镜、流式细胞分析仪检测并比较两种转染试剂的转染效率和蛋白表达效果5。转染是将外源核酸送入细胞的过程，其目的是使外源基因编码的蛋白能够在细胞中表达。吉林南京转染试剂
RNA转染试剂在不同细胞类型中的转染机制存在多种差异。以下将详细阐述不同RNA转染试剂在不同细胞类型中转染机制的差异表现。脂质体转染试剂：机制概述：脂质体转染试剂通常由阳离子脂质和中性脂质组成，其转染机制主要是通过与带负电的RNA分子结合，形成脂质体-RNA复合物。这个复合物能够与细胞膜相互作用，通过内吞作用或膜融合等方式进入细胞。进入细胞后，脂质体-RNA复合物逐渐释放RNA分子，使其能够在细胞内发挥作用。在不同细胞类型中的表现：在肾*细胞系786-O和ACHN中，目前虽未明确提及脂质体转染试剂的作用，但可以推测其可能通过类似的机制进入细胞，影响细胞内的基因表达和细胞生长。例如，微小RNA-1180（miR-1180）转染对肾*细胞生长产生影响，虽然未明确指出转染试剂类型，但脂质体转染试剂可能在类似的研究中发挥作用1。在MEF细胞、3T3细胞、Hela细胞及MCF-7细胞中，MessageMax脂质体转染试剂能将modGFP高效转染入细胞，并实现modGFP和modmCherry在MEF细胞中的共转及核内因子nGFP和mTBX5在MEF细胞核中的定位。这表明脂质体转染试剂在不同类型的细胞中能够有效地将RNA分子转运到细胞内，并实现特定蛋白的表达。广西厦门转染试剂RNA 转染试剂在不同细胞类型中的转染机制存在多种差异。
二、影响因素的差异细胞接种密度：不同类型的细胞在比较好转染效率下的细胞接种密度不同。例如，宫颈*细胞Hela和Siha的比较好接种密度为每24孔板的每孔1.5×10⁴个细胞1，而研究中Caco-2细胞的比较好接种密度为2×10⁵9。DNA用量：各种细胞所需的DNA用量也存在差异。如PC12细胞转染的比较好DNA用量为2μg3，而Caco-2细胞转染时比较好DNA用量为4μg9。脂质体与DNA的比例：不同细胞类型对应的比较好脂质体与DNA的比例不同。Hela细胞中miRNA与脂质体比例为1:0.5，Siha细胞中为1:0.71；Caco-2细胞转染时比较好脂质体与DNA比例为2.5:19。复合物形成时间和孵育时间：不同细胞类型对脂质体-DNA复合物的形成时间和细胞与复合物的孵育时间要求不同。例如，Hela和Siha细胞未明确提及复合物形成时间和孵育时间，而Caco-2细胞的比较好脂质体-DNA复合物形成时间为30min，细胞与复合物孵育时间为6h9。
核细胞、关节软骨细胞、间充质干细胞（MSCs）：选择两种合成转染试剂（阳离子脂质商业试剂LipofectamineRNAiMAX和聚乙烯亚胺（PEI））以及两种天然衍生转染试剂（多糖壳聚糖（98%脱乙酰化）和透明质酸（20%酰胺化）），用于将siRNA递送到包括髓核细胞、关节软骨细胞和间充质干细胞在内的原代间充质细胞中。以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（***DH）作为内源性模型基因，在转染后第3天和第6天评估由20nM或200nMsiRNA引起的沉默程度。除了沉默效率外，还评估了细胞毒性、DNA含量变化和细胞分化潜能等非特异性影响。在四种转染试剂中，基于商业脂质体的试剂在20nMsiRNA时是**有效的siRNA递送试剂，其次是壳聚糖。使用阳离子脂质体、壳聚糖和PEI转染显示出不同程度的活力和DNA含量下降，这取决于所评估的siRNA剂量和细胞类型，但与***DH敲低无关。一些对DNA含量的影响并不伴随着活力的相应变化。然而，细胞周期抑制或进展的标记基因（如p21和PCNA）的表达变化不能解释DNA含量的变化。有趣的是，发现了***DH活性的非特异性上调，这***于软骨细胞15。肝*细胞HepG2和：比较两种人类细胞模型中两种转染剂，即基于脂质体的Lipofectamine™RNAiMAX和基于聚合物的GenMute™。 脂质复合物(CLNACs)通过网格蛋白参与的内吞作用进入细胞。
对细胞周期的影响：在微小RNA-1180转染肾*细胞的实验中，FCM结果显示，转染miR-1180后，位于G0/G1期的细胞比例明显增大，而位于S期和G2/M期的细胞比例明显下降，表明细胞周期被阻滞在G0/G1期1。对转染效率的影响：在脂质体介导RNA干扰质粒转染鸡成骨细胞条件的优化实验中，对转染前细胞融合度、质粒质量与脂质体体积比及转染时间进行优化，在荧光倒置显微镜下观察并计算转染效率。结果表明，在转染前细胞融合达到90％以上，质粒DNA与脂质体比例为1:2.5时转染效率比较高，并且在转染后48h转染效果比较好3。在筛选更优的脂质体转染试剂的实验中，分别用RNAiMax及MessageMax将modGFP转染入MEF细胞，流式分析发现MessageMax的转染效率为（83.33%±3.23%），略高于RNAiMax的（78.77%±6.12%），两者没有统计学差异，但是流式分析和荧光显微镜观察均表明MessageMax转染后1周内的蛋白翻译表达效率更高，是更高效的modRNA转染试剂8。
RNA 转染试剂的效果受到多种因素的影响，包括细胞类型、转染试剂种类、转染条件等。在实际应用中，需要根据具体的实验需求选择合适的转染试剂和优化转染条件，以提高转染效率并减少对细胞的毒性作用。 RNA 转染试剂在不同细胞类型中的效果存在明显差异。江西shRNA转染试剂
阳离子脂质体合成中常用的分子是中性脂质二油基磷脂酰乙醇胺(DOPE)。吉林南京转染试剂
选择合适的转染试剂阳离子脂质体：如LipofectamineTM2000等阳离子脂质体是常用的转染试剂。通过优化转染条件，如转染前细胞融合度、质粒质量与脂质体体积比及转染时间等，可以提高转染效率。例如，在脂质体介导RNA干扰质粒转染鸡成骨细胞的试验中，当转染前细胞融合达到90％以上，质粒DNA与脂质体比例为1:2.5时转染效率比较高，并且在转染后48h转染效果比较好，对细胞的毒性作用较小4。二、利用天然阳离子肽混合物——鱼精蛋白作为稳定剂和增强剂：鱼精蛋白不仅可以作为肝素的中和药物和缓释胰岛素配方中的化合物，还可以用于核酸的细胞递送。自***作为转染增强剂使用以来，鱼精蛋白已被***用作RNA递送的稳定剂。它能保护RNA免受生物系统内的降解，并增强其对细胞的穿透能力。例如，鱼精蛋白稳定的RNA递送系统可以根据***目标进行调整，如与靶向抗体融合实现精确递送、消化成细胞穿透肽提高转染效率或与功能性聚合物非共价混合等。吉林南京转染试剂
