鱼精蛋白作为RNA递送稳定剂具有重要作用，其具体作用机制主要包括以下几个方面：一、保护RNA免受降解鱼精蛋白是一种天然阳离子肽混合物，由于其带正电荷的特性，可以与带负电荷的RNA通过相反电荷驱动耦合23。在生物系统中，RNA很容易被RNase降解，而鱼精蛋白可以与RNA复合，形成稳定的复合物，从而保护RNA免受降解1213。例如，通过将单链RNA（ssRNA）与带正电荷的蛋白鱼精蛋白复合，可以稳定阴离子RNA1213。二、增强细胞穿透性鱼精蛋白不仅可以保护RNA，还能增强RNA的穿透细胞的能力。鱼精蛋白-RNA复合物的形成具有双重功能，一方面保护RNA不被降解，另一方面增强其穿透进入细胞的能力23。这种增强的细胞穿透性可能是由于鱼精蛋白的阳离子性质，使其能够与细胞膜相互作用，促进RNA的进入细胞2。基于病毒的转染，或者更具体地称为转导，涉及使用病毒载体将特定的核酸序列带入宿主细胞。海南广州转染试剂
选择合适的转染试剂GenMute试剂在人肝*细胞模型中的应用：在人肝*细胞HepG2和Huh7.5中，研究对比了脂质体类的Lipofectamine™RNAiMAX和HepG2特异性的聚合物类GenMute™两种转染试剂30。通过细胞成像分析发现，GenMute处理的细胞对荧光标记的阴性对照siRNA的摄取高于LipofectamineRNAiMAX转染的细胞。并且，MTT实验表明，GenMute转染的细胞比LipofectamineRNAiMAX处理的细胞具有更高的存活率。这提示在人肝*细胞模型中，GenMute试剂可能是更适合的转染试剂，在提高转染效率的同时降低了细胞死亡。siRNA共轭壳聚糖纳米颗粒在脊髓损伤模型中的应用：在创伤性脊髓损伤（SCI）模型中，通过制备带有抗体靶向部分的siRNA共轭壳聚糖复合物，以抑制诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达，该复合物主要靶向M1巨噬细胞31。实验结果表明，Ab-siRNA共轭壳聚糖纳米颗粒在体外***降低了M1极化巨噬细胞中的iNOS表达，具有高转染效率和低细胞毒性。在体内应用该纳米颗粒后，SCI后的iNOS表达和细胞凋亡均减少。这说明在特定的病理模型中，针对性设计的纳米颗粒转染试剂可以在提高转染效率的同时降低细胞死亡。甘肃体内转染试剂用二乙基氨基乙基修饰，右旋糖酐链的酰胺化很容易被质子化，这使得它可以自组装成带负电荷核酸的纳米颗粒。
在鲤上皮瘤细胞中的应用在鲤上皮瘤细胞进行基因功能研究时，转染试剂和DNA的剂量以及取样时间缺乏统一的数据支持。选取两种常用转染试剂Lipofectamine®2000和FuGENE®HD进行多配组转染试验，在28℃，以35mm培养皿铺板，16μLLipofectamine®2000和4μgDNA在转染后48h达到比较高转染效率(±)%；12μLFuGENE®HD和4μgDNA在转染72h后转染效率达到(±)%。通过构建鲤高不饱和脂肪酸合成相关转录因子过氧化物酶体增殖物***受体蛋白α（PPARα）的EGFP标签载体进行验证，两种转染试剂分别获得了约4%和约8%的转染效率，并对下游脂肪酸去饱和酶2（fads2）基因的转录调控效应进行检测，结果为后续利用鲤上皮瘤细胞进行基因功能研究提供了数据支持5。在巨噬细胞中的应用商业转染试剂Lipofectamine已***用于核酸的细胞质递送和与细胞内先天免疫传感器进行细胞源啮合，以触发I型干扰素（IFN）生产。然而，单独对IIFN响应的脂质切积胺的影响尚未详细研究。研究表明，Lipofectamine诱导在原始，I型IFN诱导依赖于干扰素调节因子（IRF）3和IRF7，并且部分需要达洛/白细胞介素-1受体-含有结构域的适配器诱导的干扰素-β。相比之下，转染试剂XFECT未***IIFN信令6。
转染时间：转染时间的长短也会影响转染效率。过长或过短的转染时间都可能导致转染效率降低。在阳离子脂质体Lipofectamine2000对PC12细胞的转染实验中，转染时间为6h时转染效率较高3。在优化宫颈*细胞系转染效率的实验中，Hela细胞系和Siha细胞系的比较好转染时间为24小时1。细胞接种密度：细胞接种密度也会影响转染效率。过高或过低的细胞接种密度都可能导致转染效率降低。在脂质体介导法转染肿瘤细胞效率的优化实验中，2×105接种密度时转染效率比较高9。在优化宫颈*细胞系转染效率的实验中，Hela细胞系和Siha细胞系的比较好接种密度分别为1.5×104（每孔24孔板）1。血清的有无：血清的存在可能会影响脂质体转染效率。一些实验表明，血清可能会降低转染效率，而另一些实验则表明血清对转染效率没有影响。在优化宫颈*细胞系转染效率的实验中，与含血清培养基相比，只有Siha细胞在无血清培养基中培养时在转染前获得了更高的转染效率（P＜0.01）1。在脂质体介导法转染肿瘤细胞效率的优化实验中，血清在本实验室条件下并不影响转染效率。RNA 转染试剂在不同实验环境下表现出不同的效果。
联合使用其他技术优化DNA和RNA转移的转染试剂在肌肉细胞中的应用：在C2C12细胞中，比较了五种商业转染试剂（Lipofectamine®3000、Viafect™、Fugene®HD、C2C12CellAvalanche®和JetOPTIMUS®）的转染效率7。通过优化DNA:转染剂比例和细胞密度，所有试剂都达到了超过60%的转染效率，且对细胞生长和活力的影响有限。然而，在C2C12细胞中优化的用于DNA转移的条件下，这些试剂对siRNA的转移效率较低，并且对原代肌肉细胞的毒性较高。这提示在使用转染试剂时，可以通过联合使用其他技术或优化转染条件，以提高转染效率并降低细胞死亡。例如，可以进一步研究不同试剂之间的联合使用，或者优化转染后的培养条件，以降低细胞毒性。综上所述，在不同细胞模型中提高RNA转染试剂的转染效率同时降低细胞死亡，可以通过选择合适的转染试剂、优化转染条件以及联合使用其他技术等方法来实现。未来的研究可以进一步深入探讨不同细胞模型中比较好的转染策略，以满足不同研究领域的需求。一项与抗血管生成基因传递高度相关的发现是，阳离子脂质体（CLs）选择性地靶向的血管系统。海南小鼠转染试剂
流式细胞术可以更精确地定量表达特定荧光基因的细胞，以评估转染效率。海南广州转染试剂
RNA转染试剂是一类能够将RNA分子导入细胞内的物质，其作用原理主要涉及以下几个方面。利用电荷相互作用：许多RNA转染试剂是阳离子性的，它们可以与带负电荷的RNA分子通过静电相互作用结合形成复合物。例如，鱼精蛋白是一种天然阳离子肽混合物，由于相反电荷驱动的耦合作用，被用于细胞内核酸的递送8。鱼精蛋白不仅可以保护RNA免受生物系统中的降解，还能增强其对细胞的穿透能力。阳离子脂质体也是常见的转染试剂之一。以LipofectamineTM2000为例，它可以介导携带绿色荧光蛋白基因的真核表达载体转染至鸡成骨细胞9。阳离子脂质体通过其阳离子头部与RNA的负电荷相互作用，形成脂质体-RNA复合物，然后通过与细胞膜的融合或内吞作用将RNA导入细胞内。内吞作用途径：一些RNA转染试剂通过内吞作用进入细胞。如合成的8-mer两亲性反式多聚2'-O-甲基尿苷硫代磷酸三酯RNA元件（2'-OMeUtaPS），它能介导将不带电荷的聚A尾磷酸二酰胺基吗啉代序列（PMO）高效递送至HeLapLuc705细胞或肌管肌肉细胞。已确定大胞饮作用是HeLapLuc705细胞中使用的主要内吞途径。海南广州转染试剂
