考虑多因子转染能力如果实验需要同时转染多个RNA分子或进行共转染实验，那么选择具有多因子转染能力的试剂是重要的。共转染效果：一些转染试剂可以有效地实现多个RNA分子的共转染，而另一些试剂可能在共转染方面效果不佳。在脂质体方法用于modRNA转染各种类型细胞的初步研究中，MessageMax能将modGFP高效转染入多种细胞中，并实现modGFP和modmCherry在MEF细胞中的共转及核内因子nGFP和mTBX5在MEF细胞核中的定位5。选择适合多因子转染的试剂：根据实验需求，选择能够满足多因子转染要求的转染试剂。例如，如果实验需要同时转染多个基因或进行基因编辑实验，那么选择具有多因子转染能力的转染试剂可以提高实验效率。Severino et al.进行的研究也指出了阳离子脂质作为基因递送纳米载体的潜在毒性。lipo3000转染试剂毒性低
纳米颗粒递送药物并发挥功能的能力在很大程度上取决于它们被细胞摄取的机制。以蒲公英汤剂体为例，研究发现亲溶酶体物质能***抑制蒲公英汤剂体进入细胞；巨胞饮抑制剂细胞松弛素D和阿米洛利能***降低蒲公英汤剂体的胞内摄入，且呈现剂量依赖性，敲减Rac1和PAK1也有效地抑制其进入细胞。这些结果提示蒲公英汤剂体通过内吞进入A549细胞且主要由巨胞饮介导26。同理，RNA转染试剂在某些情况下也可能利用巨胞饮途径进入细胞。电穿孔转染中的内吞途径电穿孔转染是一种用于基因递送的技术，在研究其机制时发现，用冰冷介质处理或在电穿孔转染前使用内吞抑制剂处理三种不同的人类细胞系（HEK293、HCT116和HT29）。结果表明，用冰冷介质、氯丙嗪或染料木黄酮处理会***降低所有三种细胞系的电穿孔转染效率，但阿米洛利处理对电穿孔转染效率影响不***。对于用小干扰RNA（siRNA）处理的细胞，只有敲低网格蛋白重链（CLTC）会导致所有三种细胞系的电穿孔转染效率降低。这些数据表明，网格蛋白介导的内吞作用在电穿孔转染中起着重要作用27。中国澳门重庆转染试剂RNA 转染试剂在不同细胞类型中的效果存在明显差异。
调节免疫刺激特性鱼精蛋白稳定的RNA还可以调节免疫刺激特性。鱼精蛋白-RNA复合物可以刺激树突状细胞（DC），使其上调成熟标志物，并以剂量依赖的方式产生促炎性细胞因子1213。此外，两个DC亚群均以与IL-10有利的比率诱导T细胞增殖和IFNγ分泌1213。这表明鱼精蛋白-RNA复合物可用于离体刺激人mDC和pDC，用于免疫***环境1213。四、灵活的RNA递送系统平台鱼精蛋白作为RNA递送稳定剂，构建了一个灵活且多功能的平台。可以根据***目标进行调整，例如可以与靶向抗体融合实现精确递送，或者被消化成细胞穿透肽以提高转染效率，也可以与功能性聚合物非共价混合23。综上所述，鱼精蛋白作为RNA递送稳定剂，通过保护RNA免受降解、增强细胞穿透性、调节免疫刺激特性以及构建灵活的递送系统平台等多种机制，在RNA递送中发挥着重要作用。
阳离子聚合物作为转染试剂结合机制：以阳离子聚合物EZTransCellReagent为例，在优化RNA干扰（RNAi）条件的研究中发现，阳离子聚合物通过与RNA分子结合来实现转染14。例如，设计针对GFP的shRNA，使用EZ转染试剂将其转染到细胞中，shRNA***降低了GFP的表达。预稀释的转染试剂在室温下以及小核酸的存在可增加转染效率，且在24小时时达到峰值。与环状核酸相比，线性核酸与阳离子聚合物结合时显示出更高的转染效率和更高的基因组整合率。作用特点：阳离子聚合物介导的RNAi条件优化后，为未来的RNAi研究提供了有用的数据。在选择合适的小RNA分子进行转染相关功能分析之前，应先确定其实验需要。
对于容易转染的贴壁细胞如人胚肾细胞（HEK293）和人宫颈*细胞（HeLa），脂质体转染效率相对较高。这些细胞具有较强的内吞能力，能够有效地摄取脂质体-核酸复合物。例如，在标准的转染条件下，HEK293细胞的转染效率可以达到50%-70%。而对于一些难转染的贴壁细胞，如原代肝细胞和某些神经细胞，其转染效率较低。这是因为它们的细胞膜结构比较复杂，可能存在较厚的糖萼或者紧密的细胞间连接，阻碍了脂质体-核酸复合物的进入。例如，原代肝细胞的转染效率可能只有10%-20%。
一般来说，贴壁细胞对脂质体的耐受性相对较好。但是，在高浓度脂质体转染的情况下，即使是耐受性好的细胞也会受到影响。例如，HeLa细胞在高浓度脂质体转染时，可能会出现细胞膜完整性受损，表现为细胞内乳酸脱氢酶（LDH）释放增加，细胞的代谢活动也会受到一定程度的干扰。对于难转染的贴壁细胞，由于其本身比较脆弱，较低浓度的脂质体也可能产生明显的细胞毒性。比如原代神经细胞，脂质体可能会破坏其精细的神经突起结构，影响细胞的正常生理功能。 核酸与转染试剂的比例对转染效率也有影响。安徽脂质体转染试剂
南京星叶生物正是利用将核酸封装在纳米级脂质体囊泡中的技术，开发出了Gemate系列转染试剂。lipo3000转染试剂毒性低
脂质复合物又称阳离子脂质-核酸复合物(CLNACs)，是由非离子核酸与阳离子脂质体（CLs）表面结合，**终形成多层脂质-核酸复合物而形成的。带负电荷的核酸被吸引到带正电荷的囊泡表面，**初与停靠在阳离子囊泡表面的核酸分子形成复合物，然后发展到核酸分子持续粘在脂质分子上的阶段，脂质双分子层围绕紧实的核脂质颗粒。复合物形态的这种异质性可能归因于囊泡的脂质组成、复合物形成的方式、脂质:核酸比例、核酸结构的大小、试剂的批次差异以及用于处理和可视化这些复合物的技术。除了静电吸引外，疏水相互作用被认为有助于脂质和核酸之间的复合物形成。因此，根据正电荷(阳离子脂质)与负电荷(核酸上的磷酸基)的电荷比，脂质体可能通过与细胞表面的蛋白聚糖基团等带电残基的静电相互作用，或通过与质膜疏水区域的疏水相互作用进入细胞。lipo3000转染试剂毒性低
