河北分析外泌体

外泌体的基本信息：1983年，外泌体于绵羊网织红细胞中被发现，1987年Johnstone将其命名为“exosome”，即外泌体。 人体几乎所有类型的细胞都能分泌外泌体，外泌体普遍存在并分布于各种体液中，携带多种蛋白质、mRNA、miRNA和脂质类物质等，作为重要的传递信号分子，形成了一种全新的细胞-细胞间信息传递系统，可参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和tumour细胞生长等过程。外泌体与微泡：我们知道，细胞间相互作用可以通过释放蛋白质、核酸、脂质等分子到胞外与受体结合从而介导胞内细胞传导。shou次报道的外泌体生物功能是红血球成熟过程中排出来的蛋白质。河北分析外泌体

外泌体的提取方式： 1、离心法：此种方法得到的外泌体量多，但是纯度不足。 2、过滤离心：这种操作简单、省时，不影响外泌体的生物活性，但同样纯度不足。 3、密度梯度离心法：用此种方法分离到的外泌体纯度较高，但是前期准备工作繁杂 4、免疫磁珠法：这种方法可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操作简单，但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。 5、色谱法：此种方法分离出的外泌体大小均一，但设备特殊，应用不普遍。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分。四川服务外泌体文章外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡，参与细胞间通讯。

已有研究显示人类胚胎干细胞来源的MSC也可释放外泌体发挥心肌保护的作用。有研究在小鼠心肌缺血-再灌注损伤模型中发现，心肌内递送MSCs外泌体，可使心肌梗死面积减少，有效提高心肌细胞存活率。 蔡东升博士及其研究团队证明，下丘脑干细胞分泌的外泌体可以延缓衰老。该研究发现，随着下丘脑干细胞的消失，小鼠开始出现衰老症状。但随着植入经过改造的健康的下丘脑干细胞后，小鼠的衰老症状延迟并且寿命延长，进一步研究发现，该过程一部分是下丘脑干细胞通过释放外泌体来实现的。

超过4 600种蛋白质与外泌体有关。外泌体蛋白有以下几类：①外泌体中常见的蛋白质多与其生物发生机制有关，外泌体含有的细胞质蛋白，如膜蛋白和RAB蛋白，可以促进MVBs与细胞膜的融合及外泌体的释放；Tsg-101及附属蛋白质Alix参与ESCRT过程，促进内体膜的凹陷。②外泌体含有参与抗原呈递的蛋白质，如CD1、MHCⅠ和MHCⅡ，其在免疫调节中发挥重要作用，MHCⅠ还参与向T细胞呈递抗原的生理过程。外泌体表面还存在热休克蛋白，如HSP70和HSP90，促进了抗原肽与MHCⅠ及MHCⅡ的结合。③外泌体含有信号转导蛋白，如G蛋白和蛋白激酶。④外泌体含有丰富的蛋白水解酶，这表明外泌体能够促进细胞转移。⑤外泌体中还含有细胞质微管蛋白、肌动蛋白和肌动蛋白结合蛋白。但目前未发现外泌体中含有与内质网、高尔基体和细胞核相关的蛋白质。研究外泌体在这些过程中的作用影响，发表文章的周期会较长，但是相对的，影响因子也高，很多都在10分以上。

目前，外泌体的分离多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤三种方法。 超速离心：耗时耗力，往往需要8-30个小时；每次较多只能处理6个样品；需要大量的起始材料；产量不高。需一台超速离心机。 将欲提取的细胞培养上清液10ml，在4 ℃的环境下，300×g 10min，2000×g 20min，弃沉淀，去除细胞；然后 l0,000×g 30min ，弃沉淀，去除亚细胞成分；再用10,000×g 60min，弃掉上清液，较后所得沉淀既为exosome ，用30ml PBS 溶液重新悬浮沉淀物，混匀后再以10,000×g 60min，用 l ml PBS溶液悬浮沉淀物提纯的exosome 溶液分别装入eppendorf 管内，置于-80℃冰箱内保存备用。进一步的研究表明外泌体功能包括排泄不必要的蛋白质和RNA等物质。江西服务外泌体平台

外泌体在电镜下具有非常明显单层膜结构，通常为茶托型或一侧凹陷的半球形。河北分析外泌体

外泌体（Exosomes）是一种直径在40-100 nm的圆形单层膜结构，是细胞外泌囊泡中体积较小的一种。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分，如微小RNA ( microRNA，miRNA)、长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）、mRNA和环状RNA（circular RNA，circRNA）。环状RNA（circular RNA）是近来新发现的一种非编码RNA分子，研究趋势火爆。环状RNA表达具有组织和疾病特异性，与组织发育、疾病发生 和发展密切相关。此外环状RNA不易降解，可做为新型疾病分子标志物。外泌体环状RNA的研究势必会为疾病诊断与医治带来极大帮助。河北分析外泌体

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