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虽然研究者对细胞释放外泌体的具体过程知之甚少，但大多数含有内膜系统的哺乳动物细胞均可分泌外泌体。外泌体有多种分泌途径：一种是组成型分泌途径，例如免疫系统的B细胞、树突状细胞(DCs)和肥大细胞，对外泌体的研究大部分来自于免疫细胞，而目前在非免疫细胞中生理性外泌体的分泌很大程度上是未知的；另一种途径是通过细胞间相互作用刺激分泌外泌体，例如鼠DCs在与抗原特异性CD4+ T淋巴细胞相互作用时可分泌更高水平的外泌体[4]；其他类型的细胞还可以通过钙离子载体或其他刺激分泌外泌体[5]。外泌体的磷脂双分子层与普通细胞膜具有同源性。新疆修饰外泌体平台

外泌体是细胞分泌的50-150nm粒径大小，并具有磷脂双分子层结构的微囊泡。由于外泌体是从母本细胞内部分泌出来，因此会带有母本细胞特定的遗传物质（蛋白、核酸等）。同时，外泌体的磷脂双分子层与普通细胞膜具有同源性，很容易被其母本细胞同类的或异类的细胞摄取，进而释放遗传物质进入这些摄取外泌体的细胞内部。由于上述特性的存在，外泌体无论在疾病诊断、微环境调控机制还是在药物载体改造等方面都受到了越来越多的关注，国自然资助的项目数和总金额也逐年攀升，占据近2年生物医学研究热点的榜首。西藏服务外泌体研究样品运输：样品置于1.5mLEppendorf管中，封口膜封好，干冰运输。

目前，外泌体的分离多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤三种方法。 超速离心：耗时耗力，往往需要8-30个小时；每次较多只能处理6个样品；需要大量的起始材料；产量不高。需一台超速离心机。 将欲提取的细胞培养上清液10ml，在4 ℃的环境下，300×g 10min，2000×g 20min，弃沉淀，去除细胞；然后 l0,000×g 30min ，弃沉淀，去除亚细胞成分；再用10,000×g 60min，弃掉上清液，较后所得沉淀既为exosome ，用30ml PBS 溶液重新悬浮沉淀物，混匀后再以10,000×g 60min，用 l ml PBS溶液悬浮沉淀物提纯的exosome 溶液分别装入eppendorf 管内，置于-80℃冰箱内保存备用。

奥沙利铂耐药性是结直肠ai医治中的一大挑战，调节性T细胞（Treg）的免疫抑制作用可能在其中发挥作用。另外，外泌体中的miRNA可能作为预测化疗敏感性的潜在生物标志物。天津医科大学的巴一团队及应国光团队在Molecular Therapy上发表的一项较新研究，发现结直肠ai细胞通过外泌体分泌的miR-208b可抑制CD4+ T细胞中的PDCD4表达，以促进Treg扩增，从而导致结直肠ai小鼠模型对奥沙利铂医治的耐药性。另外，在结直肠ai患者中，miR-208b的高表达与较差的预后相关。色谱法：此种方法分离出的外泌体大小均一，但设备特殊，应用不普遍。

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