外泌体(Exosomes)是一种直径在40-100 nm的圆形单层膜结构,是细胞外泌囊泡中体积较小的一种。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分,如微小RNA ( microRNA,miRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)、mRNA和环状RNA(circular RNA,circRNA)。环状RNA(circular RNA)是近来新发现的一种非编码RNA分子,研究趋势火爆。环状RNA表达具有组织和疾病特异性,与组织发育、疾病发生 和发展密切相关。此外环状RNA不易降解,可做为新型疾病分子标志物。外泌体环状RNA的研究势必会为疾病诊断与医治带来极大帮助。云序生物环状RNA测序服务,采用Cloudseq CircRNA Enrichment Kit。湖北服务外泌体全转录测序
外泌体的内容物可以通过生物工程手段修饰。其中,将选择的蛋白内容物与外泌体的EV-sorting proteins通过细胞工程融合是较常用的方法。这种方法既可以在腔内储存可输送到靶细胞的内容物,也可以让内容物与靶细胞表面受体结合来增强它们的医治信号特性或靶向能力。因此,Silva等在单外泌体水平上,通过分析工程化外泌体技术对不同外泌体的EV-sorting proteins在促进蛋白内容物的装载效率进行了评估。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分。四川外泌体LncRNA测序云序生物提供外泌体LncRNA测序,同时分析样品中全部外泌体来源LncRNA和mRNA。
超过4 600种蛋白质与外泌体有关。外泌体蛋白有以下几类:①外泌体中常见的蛋白质多与其生物发生机制有关,外泌体含有的细胞质蛋白,如膜蛋白和RAB蛋白,可以促进MVBs与细胞膜的融合及外泌体的释放;Tsg-101及附属蛋白质Alix参与ESCRT过程,促进内体膜的凹陷。②外泌体含有参与抗原呈递的蛋白质,如CD1、MHCⅠ和MHCⅡ,其在免疫调节中发挥重要作用,MHCⅠ还参与向T细胞呈递抗原的生理过程。外泌体表面还存在热休克蛋白,如HSP70和HSP90,促进了抗原肽与MHCⅠ及MHCⅡ的结合。③外泌体含有信号转导蛋白,如G蛋白和蛋白激酶。④外泌体含有丰富的蛋白水解酶,这表明外泌体能够促进细胞转移。⑤外泌体中还含有细胞质微管蛋白、肌动蛋白和肌动蛋白结合蛋白。但目前未发现外泌体中含有与内质网、高尔基体和细胞核相关的蛋白质。
外泌体作为一种新型细胞间信息交流的方式,在细胞间物质运输和信号交流中发挥重要作用,并参与了机体多种生理和病理过程。研究发现,外泌体中存在的非编码RNA(ncRNA)与胃ai的发生、发展和耐药性存在关联。此外,外泌体在胃ai进展和幽门螺杆菌感ran(胃ai的主要危险因素)之间的相互作用中起着至关重要的作用。因此,靶向外泌体或这些外泌体衍生的ncRNAs可能是一种医治胃ai的新方法。来自北京大学tumour医院的邢晓芳、季加孚、李子禹等人在Molecular Cancer上发表综述文章,总结了外泌体的起源和特征以及外泌体ncRNA和胃ai之间的详细联系,指出靶向外泌体极其衍生ncRNA在诊断、医治胃ai方面具有广阔前景。外泌体是从母本细胞内部分泌出来,因此会带有母本细胞特定的遗传物质(蛋白、核酸等)。
MSCs是干细胞家族的重要成员,属于多能干细胞,因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。人间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下,可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞,还能向受损组织趋化。MSCs通过旁分泌方式释放细胞因子,连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能,可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器guan损伤修复,是一种有前景的能够用于疾病医治的干细胞来源。RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中,-80℃保存,避免反复冻融。浙江研究外泌体价格
外泌体对凝血和血管生成其促进作用。湖北服务外泌体全转录测序
目前,外泌体的分离多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤三种方法。 超速离心:耗时耗力,往往需要8-30个小时;每次较多只能处理6个样品;需要大量的起始材料;产量不高。需一台超速离心机。 将欲提取的细胞培养上清液10ml,在4 ℃的环境下,300×g 10min,2000×g 20min,弃沉淀,去除细胞;然后 l0,000×g 30min ,弃沉淀,去除亚细胞成分;再用10,000×g 60min,弃掉上清液,较后所得沉淀既为exosome ,用30ml PBS 溶液重新悬浮沉淀物,混匀后再以10,000×g 60min,用 l ml PBS溶液悬浮沉淀物提纯的exosome 溶液分别装入eppendorf 管内,置于-80℃冰箱内保存备用。湖北服务外泌体全转录测序
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