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外泌体蛋白有以下几类:外泌体中常见的蛋白质多与其生物发生机制有关,外泌体含有的细胞质蛋白,如膜蛋白和RAB蛋白,可以促进MVBs与细胞膜的融合及外泌体的释放;Tsg-101及附属蛋白质Alix参与ESCRT过程,促进内体膜的凹陷。外泌体含有参与抗原呈递的蛋白质,如CD1、MHCⅠ和MHCⅡ,其在免疫调节中发挥重要作用,MHCⅠ还参与向T细胞呈递抗原的生理过程。外泌体表面还存在热休克蛋白,如HSP70和HSP90,促进了抗原肽与MHCⅠ及MHCⅡ的结合。外泌体含有信号转导蛋白,如G蛋白和蛋白激酶。外泌体含有丰富的蛋白水解酶,这表明外泌体能够促进细胞转移。外泌体中还含有细胞质微管蛋白、肌动蛋白和肌动蛋白结合蛋白。但目前未发现外泌体中含有与内质网、高尔基体和细胞核相关的蛋白质。外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡,参与细胞间通讯。中国澳门平台外泌体平台

目前,外泌体的分离多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤三种方法。 超速离心:耗时耗力,往往需要8-30个小时;每次较多只能处理6个样品;需要大量的起始材料;产量不高。需一台超速离心机。 将欲提取的细胞培养上清液10ml,在4 ℃的环境下,300×g 10min,2000×g 20min,弃沉淀,去除细胞;然后 l0,000×g 30min ,弃沉淀,去除亚细胞成分;再用10,000×g 60min,弃掉上清液,较后所得沉淀既为exosome ,用30ml PBS 溶液重新悬浮沉淀物,混匀后再以10,000×g 60min,用 l ml PBS溶液悬浮沉淀物提纯的exosome 溶液分别装入eppendorf 管内,置于-80℃冰箱内保存备用。江苏服务外泌体价格外泌体是从母本细胞内部分泌出来,因此会带有母本细胞特定的遗传物质(蛋白、核酸等)。

外泌体由细胞分泌释放出来,在血液等体液内传播,较后又可被其他细胞吞噬,是细胞间通讯的重要介质。越来越多的证据表明,宿主细胞或tumour细胞分泌的外泌体参与了tumour发生、生长、侵袭和转移。免疫细胞和tumour细胞之间通过外泌体进行信息交换,这种通讯方式在调节tumour免疫中发挥了双重作用。外泌体既可以通过抑制免疫细胞(DCs、NK细胞、CD4+ 和CD8+ T细胞等)引发的抗tumour反应,以及诱导免疫抑制或调节细胞群(MDSCs、Tregs和Bregs)的免疫抑制。

纳米颗粒跟zong分析技术(Nanosight Tracking Analysis,NTA)是一种比较新颖的表征纳米颗粒的方法,它可直接并实时观测纳米颗粒。NTA 通过光学显微镜收集纳米颗粒的散射光信号,拍摄一段纳米颗粒在溶液中做布朗运动的影像,对每个颗粒的布朗运动进行追zong和分析,从而计算出纳米颗粒的流体力学半径和浓度。 通过SDS-PAGE电泳分析得到Exosome中蛋白的含量及种类;通过Western-Blot检测Exosome中特定的蛋白表达情况。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分。外泌体发表的文章也绝大部分与其在tumour的形成,耐药性,检测等方面有关。

外泌体的提取方式: 1、离心法:此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足。 2、过滤离心:这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样纯度不足。 3、密度梯度离心法:用此种方法分离到的外泌体纯度较高,但是前期准备工作繁杂 4、免疫磁珠法:这种方法可以保证外泌体形态的完整,特异性高、操作简单,但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。 5、色谱法:此种方法分离出的外泌体大小均一,但设备特殊,应用不普遍。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中。分析外泌体研究

外泌体对凝血和血管生成其促进作用。中国澳门平台外泌体平台

外泌体(Exosomes)是一种直径在40-100 nm的圆形单层膜结构,是细胞外泌囊泡中体积较小的一种。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分,如微小RNA ( microRNA,miRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)、mRNA和环状RNA(circular RNA,circRNA)。环状RNA(circular RNA)是近来新发现的一种非编码RNA分子,研究趋势火爆。环状RNA表达具有组织和疾病特异性,与组织发育、疾病发生 和发展密切相关。此外环状RNA不易降解,可做为新型疾病分子标志物。外泌体环状RNA的研究势必会为疾病诊断与医治带来极大帮助。中国澳门平台外泌体平台

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