猪赛内卡病毒PCR诊断试剂价目表

八方同创依托国际生物技术，结合各类猪病临床特征，研发出系列猪病PCR诊断试剂盒、抗体检测试剂盒。其中高灵敏、高特异性、易操作的BIO MINI PCR仪，核酸检测限达0.2拷贝/微升，全程检测耗时不足60分钟；非洲猪瘟抗体快速检测卡获世界动物卫生组织（WAHO）认证，发病后7天即可检出抗体，15分钟出结果，适用于全球180多个国家和地区，保障疫病防控与净化措施科学高效落地。非洲猪瘟抗原快检卡，准确率高，可用于现场异常猪检测，比较大检测限度相当于PCR试剂盒Ct值32的样品。此外，八方同创还研发各种非洲猪瘟鉴别诊断试剂盒以及其他猪病诊断试剂盒，供广大养猪户选择使用。八方同创提醒金属离子和消毒液对PCR检测结果有影响，环境消毒后等干燥再进行采样。猪赛内卡病毒PCR诊断试剂价目表

八方同创提醒猪场，增加环境样品检出率的措施如下：1、实验室环境采样采用多点“S型划线”采样的方法，不能立即检测的使用核酸保护液保存样品。采集环境样品的纱布不宜过湿，可满足后端核酸提取量即可。2、避开环境中的PCR抑制物：由于环境中存在各种消毒使用的酸性或碱性物质，还有其他一些抑制PCR的物质，采样时应尽量避免接触这些物质，使后续PCR工作能正常进行。如不在刚消毒后进行环境采样。3、使用专门用于环境样本提取的试剂盒。4、双倍检测体系和核酸模板。5、浓缩核酸样品：使用DNA浓缩纯化试剂盒浓缩核酸样品后再进行样品检测，提高检出率。猪繁殖与呼吸综合征病毒PCR诊断试剂生产八方同创提醒，控瘟先控人，人员可以携带非洲猪瘟病毒走动传播。因此，洗手、洗澡、更换鞋衣帽很重要。

非洲猪瘟病毒检测和鉴定技术中方便的、安全的且常用的技术是PCR和红细胞吸附试验（Hemad-sorptionTest,HAT），HAT是非洲猪瘟病毒的参考标准试验。几种基于PCR的方法已被证明具有可重复性、分析特异性，并对当前流行的非洲猪瘟病毒基因型以及非红细胞吸附和低毒力病毒分离株具有高度的分析敏感性。引物组和探针靶向基因组p72区域内高度保守区域的序列。一些在实时PCR系统中使用时，为慢性动物（包括D.Kingetal.(2003)、Tignon,C.Gallardo,Iscaro,etal.(2011)和Fernandez-Pineroetal.(2013)报告的试验）的非洲猪瘟病毒检测提供了比较高的诊断敏感性。此外，越来越多的商业化试剂盒已投放市场，一些已被证明具有良好的性能，例如八方同创的非洲猪瘟病毒荧光定量PCR试剂盒（冻干微球型）。对于资源有限的国家，完全验证且易于使用的检测系统是有益的。在这种情况下，价格合理且对额外实验室耗材要求更少的商业化试剂盒是关键。

八方同创提醒猪场，PCR扩增完成后读取和分析结果方法如下：1、反应结束后保存结果，仪器将对结果进行自动分析，给出CT值，注意查看结果的扩增曲线的性状，存在CT值的结果需呈S型曲线。2、根据说明书，查看阴阳对照是否符合质控标准，扩增曲线是否为标准的S型曲线，曲线异常或不满足质量控制的情况下样品检测结果无效。3、质控成立，按照试剂盒判定标准对结果进行阴性、阳性及可疑（可疑样品需复测，两次可疑判阳性）判定。4、对于可疑样本选用50ul的体系复测。5、注意结果是否有内标，内标CT值是否均匀一致，从而验证核酸是否存在抑制物。6、若无内标，则考虑：体系配置错误（未加内标）、仪器设置问题、样品中存在抑制剂、体系未混匀、分装误差等，需对样品进行复测。7、若阳性对照不出值，则考虑：仪器未设置孔位、体系配置错误、人员操作失误、试剂失效等原因。8、若阴性对照出值，则考虑：污染（产物污染、气溶胶污染、试剂污染）；人员操作不当等。立即停止实验排查原因并启动实验室消毒，排除污染后再做样品检测。9、填写检测结果统计表。八方同创推出的非洲猪瘟冻干微球试剂盒适用于防控中一级洗消点环境、人员、车辆、物资检测。

八方同创提醒猪场，建立猪场实验室PCR检测区各功能分区的设施设备配备要求如下：1、缓冲区：进出实验室的过渡区，需要配备洗手池洗手液、更衣换鞋柜；2、收样区：存放样品、编号及样品前处理。需要配备样品冰箱、离心机、涡旋振荡仪 、研磨仪、排样板架 、PBS 缓冲液等；3、试剂准备区：配置试剂用。该区域不做任何跟样本相关的操作，严禁跟样本相关的任何物品进入。需要配备试剂冰箱（2-8℃，-20℃）、掌上离心机、超净工作台 、小黄板 、荧光定量PCR八连管（需适配PCR仪）、PCR试剂盒 等。4、核酸提取区：样本核酸提取。需要配备核酸提取仪、高速离心机 、涡旋振荡仪、生物安全柜 、核酸提取试剂盒等；5、扩增区：PCR扩增。需要配备荧光定量PCR仪、电脑 等；八方同创提醒猪场监测是指系统地、持续地收集和评估群体中的数据，意图在满足特定阈值或条件时 采取行动。猪赛内卡病毒PCR诊断试剂价目表

八方同创董事长赖志博士受邀赴香港、越南等地开展生物安全防控交流。猪赛内卡病毒PCR诊断试剂价目表

红细胞吸附试验（Hemadsorption Test, HAT）(Malmquist and Hay 1960)是非洲猪瘟病毒的参考标准试验。HAT试验的诊断敏感性和特异性使其在普遍条件下都很有用。然而，它需要专业实验室和经验丰富的技术人员。HAT基于红细胞附着到体外培养的非洲猪瘟病毒***猪巨噬细胞的外部（细胞质）膜上。通常，在非洲猪瘟病毒诱导的细胞病变效应出现之前，红细胞在***巨噬细胞周围形成玫瑰花结。然而，一些非洲猪瘟病毒田间分离株已被证明可在巨噬细胞中诱导细胞病变效应而不诱导红细胞吸附。这些毒株可通过PCR或直接免疫荧光法鉴定。猪赛内卡病毒PCR诊断试剂价目表

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