日本初冬季节非洲猪瘟诊断方法介绍

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，非洲猪瘟的预防与控制，鉴于非洲猪瘟（ASF）防控面临的挑战及高昂成本，防控工作应将重点放在预防上。疫苗终可能成为有效的预防手段，但基础生物安全措施始终至关重要。非洲猪瘟病毒（ASFV）的某些特性，对防止病毒进入猪场及在猪群内部和外部扩散较为有利。具体包括：正常情况下，病毒传播速度较慢。病毒能在密闭空间内短距离空气传播，目前尚无确凿证据表明其可在户外通过空气传播。由于病毒具有脂质包膜，对热、阳光和干燥敏感，且多种易获取的消毒剂均可将其杀灭。病毒在环境中的存活依赖于有机物质（如血液）的保护。因此，采取限制猪只活动、管控人员进入、确保饲料安全，以及防范通过受污染物品（如鞋具、设备）传播等措施，足以预防病毒传入。在资源有限的情况下，需与养猪户充分沟通，制定可行、经济且符合当地文化习惯的防控措施。猪场爆发非洲猪瘟后可以通常检测选择性淘汰阳性猪和关联猪减少损失。日本初冬季节非洲猪瘟诊断方法介绍

非洲猪瘟疫苗研发历程艰难，主要在于缺乏明确的保护相关物、抗体的中和能力有限以及病毒的复杂性，都导致了开发有效疫苗的挑战。

多年的研究努力在非洲猪瘟病毒疫苗开发方面取得了有希望的进展，但商业化的疫苗仍未普及，并且报告了当前疫苗在田间使用后出现问题，例如在越南。基于康复动物的血清学有良好的反应，学者们将重组的靶向结构蛋白（如p30、p54、p72、pp62和CD2v）疫苗、DNA疫苗和病毒载体疫苗等作为非洲猪瘟病毒疫苗开发的重点。许多项目利用计算机预测的抗原通过各种载体系统表达，但大多数方法显示出极小或无保护效力。

近期，一种包含8种非洲猪瘟病毒抗原的组合，通过复制缺陷型人腺病毒5（初免）和改良痘苗病毒安卡拉株（加强）给药，在非洲猪瘟病毒基因型I攻毒后保护猪免于死亡。该研究方法在抗原选择方面具有前景，并支持DIVA兼容的亚单位疫苗可提供一定程度保护的概念。不幸的是，未识别出明确的保护指标，因为所有动物都发病并表现出病毒血症。此外，尝试用基因型II毒株攻读复制这些结果未成功。因此，仍然缺乏有说服力的载体或亚单位疫苗候选株。 韩国蓝通元非洲猪瘟养殖技术要点非洲猪瘟病毒的弱毒株阳性猪群体现无症状或轻微症状，需要通过高灵敏度的PCR试剂盒检测才能确诊。

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，当下非洲猪瘟流行的主流毒株类型，主要是流行非洲猪瘟Ⅰ型毒株，Ⅱ型缺失毒株，及Ⅰ型/Ⅱ型的重组毒株，致病力相对较弱。

非洲猪瘟弱毒珠及缺失毒株主要临床特点有：无症状或症状轻微、传播隐蔽、间歇性排毒，应激后排毒等特点，不容易被监测到，等异常猪出现，病毒已成扩散局面，难以做到精细去除。

主要临床表现：母猪：不吃料或少吃料、流产（与蓝耳病症状相似）、关节疼痛、多发前肢瘫痪，站立不起，皮肤出现坏死斑疹，死亡等。保育育肥猪：不吃料或少吃料、呼吸困难（与蓝耳病症状相似）、关节疼痛、皮肤发红，皮肤坏死斑疹，死亡等。

非洲猪瘟的传播媒介除已知的生物媒介（即钝缘蜱属软蜱）外，其他吸血节肢动物或昆虫，特别是叮咬蝇，被建议作为机械媒介。实验证明，厩螫蝇（Stomoxyscalcitrans）可通过叮咬和摄入机械传播非洲猪瘟病毒。在非洲猪瘟受影响地区采集的吸血蝇（厩螫蝇和虻）中也检测到非洲猪瘟病毒DNA(Olesen,Stelder,etal.2023)。然而，这些蝇类在田间传播中是否起重要作用仍有待确定。近期的实验室研究表明，吸血昆虫可以以温度依赖的方式携带活病毒一段时间，例如在凉爽温度下长达7天。在家猪和欧亚野猪中，非洲猪瘟潜伏期通常为3-7天，取决于病毒特性、宿主相关因素和暴露途径。病毒排泄可能在潜伏期开始，在观察到临床症状之前，但会随着发烧开始而增加。值得注意的是，分泌物和排泄物（如唾液、粪便、尿液和生殖道分泌物）中的排泄通常较低且间歇性，除非发生出血。在大多数情况下，非洲猪瘟具有中等传染性，但当涉及非洲猪瘟病毒污染的56424.4发病机制血液（鼻出血、血性腹泻或伤口）时具有高度传染性。此外，**中病毒排泄发生在***早期，通过人工授精（ArtificialInsemination,AI）传播可导致疾病传播(Friedrichs,Reicks,etal.2022)。八方同创提醒病毒主要侵害猪的单核巨噬细胞、树突细胞。

    几种非洲猪瘟病毒蛋白具有高度抗原性，包括病毒衣壳的主要结构成分（p72），以及膜蛋白p54、p30和p12。总共超过50种病毒蛋白可在耐过或康复猪中诱导可检测的抗体反应。虽然作为血清学诊断中的抗原很有用，但它们在诱导保护性免疫中的作用尚不清楚，因为非洲猪瘟病毒不诱导完全的中和抗体免疫反应。非洲猪瘟病毒粒子在无血清培养基中pH4-10时保持稳定，但在pH低于4或高于。血液中的粒子在5°C(41°F)下可保持复制性6年，在含25%血清的培养基中pH下可保持数天复制能力。病毒粒子可通过60°C(140°F)加热30分钟或56°C(133°F)加热70分钟灭活。许多有机溶剂通过破坏脂质包膜使病毒失活，但非洲猪瘟病毒对蛋白酶和核酸酶具有抗性。非洲猪瘟病毒田间分离株的回收必须在原代猪单核细胞/巨噬细胞中进行，因为田间毒株在常规细胞培养系统中复制不佳。出于研究目的，几种非洲猪瘟病毒分离株已适应在非洲绿猴肾稳定细胞系（包括VERO、MS和CV-1细胞）或野猪肺细胞中生长。近期，几种单核细胞来源的猪细胞系已被开发用于研究目的。尽管该领域取得了进展，细胞系仍然是疫苗病毒生产的限制因素。 非洲猪瘟的重组蛋白是一种安全性好的疫苗，但是有效性需要提出疑问，尤其是交叉保护性。哺乳母猪非洲猪瘟养殖技术要点

2018年非洲猪瘟病毒传入中国，从北方到南方迅速蔓延，在34个省、自治区均有报道，给猪业带来巨大影响。日本初冬季节非洲猪瘟诊断方法介绍

非洲猪瘟活疫苗策略可追溯到1960年代，涉及在葡萄牙和西班牙田间条件下使用的减毒非洲猪瘟病毒毒株。然而，这些早期活疫苗导致慢性病变和病例数增加终被停用。近期的进展引入了几种有前景的活非洲猪瘟病毒疫苗候选株，能够在实验环境中提供针对攻毒实验组完全的或接近完全的保护。除了自然发生的变异株外，基因改造的缺失突变株，如“ASFV-G-ΔI177L”、“ASFV-G-ΔMGF”、“ASFV-G-Δ9GL/UK”和“HLJ/18-7GD”，已显示出对抗当前基因型II非洲猪瘟病毒毒株的潜力。此外，CD2ν（EP402R）缺失突变株也显示出一些前景，能够提供针对基因型I和II毒株的保护。天然衍生的非红细胞吸附病毒“Lv17/WB/Rie1”及其衍生物也被探索作为疫苗替代品。值得注意的是，病毒“ASFV-G-ΔA137R”在具有保护特性的缺失突变株中脱颖而出。因此，现在有多种活疫苗候选株可考虑用于潜在批准，其中至少两种已获准在越南市场销售。尽管如此，先前涉及不当使用可能非法疫苗的事件强调，在没有彻底临床评估的情况下，在现实场景中部署活疫苗需要谨慎。 日本初冬季节非洲猪瘟诊断方法介绍

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