福建如何使用糖原染色试剂盒

糖原D-PAS染色液：使用方法：1、两张相同切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇入水。2、一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h。另一张不用淀粉酶溶液处理，入水中1h作为对照。3、流水冲洗两张切片各5～10min。4、入过碘酸溶液，室温放置5～8min，一般不宜超过10min。5、自来水冲洗1次，再用蒸馏水浸洗2次。6、入SchiffReagent，置于室温阴暗处浸染10～20min。7、自来水冲洗10min。8、入Mayer苏木素染色液，染细胞核1～2min。9、(可选)酸性乙醇分化液分化2～5s。10、自来水冲洗10～15min，更换蒸馏水清洗使其返蓝。11、二甲苯透明，中性树胶封固。加入少量活性碳并震荡、过滤，此时溶液应为无色。福建如何使用糖原染色试剂盒

糖原染色正常值:正常情况下，红细胞系统的原、幼红细胞和成熟红细胞;粒细胞系统的原粒细胞、原单核细胞和大多数淋巴细胞为阴性反应。自早幼粒阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。糖原染色临床意义:(1)急性淋巴细胞白血病、淋巴组织恶性增生性疾病、红白血病、戈谢病的原始细胞呈强阳性反应或阳性反应;缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍、骨髓增生异常综合征亦可呈阳性反应;急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、良性淋巴细胞增多症、尼曼-皮克细胞呈阴性反应或弱阳性反应。巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等，幼红细胞为阴性反应。偶有个别幼红细胞呈阳性反应。(2)帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞，巨核细胞呈强阳性反应;霍奇金细胞呈弱阳性或阴性反应。(3)帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞，腺细胞呈阳性反应。福建如何使用糖原染色试剂盒细胞核、染色体以及基因表达的研究。

糖原染色：1、概况PAS染色法（PeriodicAcid-Schiffstain）在组织学上，主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基，再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。2、原理PAS染色又称过碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛，再与Schiff氏液的无色品红结合，红色，定位于胞浆上。3、应用随着医学实验技术的发展，糖原染色应用的范围更加普遍，如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质，心肌病变及其他心血管疾病的诊断，糖原累积病诊断和研究，糖尿病的诊断和研究，用于某些的诊断等。

医院检验中心糖原染色操作规程：1．雪夫氏试剂：400m1蒸馏水煮沸除去C02，逐渐加碱性品红2．08溶解后，待冷却至60℃，加1mm01儿HCl40ml，再加偏重亚硫酸钠(NaHSO：)4g，次日加活性碳1．5g，放置半天后过滤。配好后液体为无色透明，保存于4℃冰箱中。2．过碘酸作用液：过碘酸1g溶于蒸馏水100ml中，或取过碘酸钾(1tI04)0。698加蒸馏水100ml，微加热使溶解，再加浓硝酸0．3m1，置冰箱中保存。3．固定液：95％乙醇90ml与甲醛10m1混匀。4．20g/l甲基绿：甲基绿2g溶于100m1蒸馏水。[操作]_x005f_x005f_x005f_x005f_x005f_x005f_x005f_x000c_(1)新鲜或陈旧血片、骨髓片于固定液内10分钟。(2)水洗数次后，对照片先用唾液消化30分钟，也可在同一片，在其中间用蜡笔划界，一半做对照，另一半做测定。(3)水洗后，滴加过碘酸数滴于涂片上，作用10分钟后，再水洗数次。自早幼粒阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。

特殊染色方法选择应遵循：染色结果对比鲜明、结果易保存、阳性突出的染色方法；突出的阳性结果在于所选择方法表达的色调及如何进行背景的复染。结果能够长时间保存、不褪色对于后续的调阅、科研、论文均较为有利。如显示淀粉样物质，甲基紫染色法虽然流程较为简单，但结果不易保存，阳性对比度相对不突出；刚果红染色法阳性结果明显，长时间保存不褪色，流程简便，更是实用的方法。如显示弹性纤维，地衣红染色染液虽配制较方便，但结果对比度相对欠佳，与其他几个染色法相比，多不选择使用。帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞，腺细胞呈阳性反应。湖南品牌糖原染色试剂盒进货价

过碘酸氧化时间不宜过久，氧化时的温度以18～22℃佳。福建如何使用糖原染色试剂盒

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面：PAS染色时需于暗处加盖反应，染色时间10～20min（染色时间长短取决于试剂的质量和环境温度，SO浓度高，染色时间适当缩短；环境温度高，染色时间也应适当缩短，反之则需适当延长反应时间）。染色过程中不能接触伊红，以免造成颜色误差[4]。作糖原染色时，较好作消化对照，即取两张连续切片，其中一张脱蜡至水后，用1％淀粉酶于37℃消化30min，水洗后与不经消化处理的切片一起置0.5％高碘酸液氧化，如经消化处理的切片染色阴性，不经消化处理的切片染色阳性，即肯定为糖原[6]。偏重亚硫酸钠（钾）溶液配置后，不能保存，因此，必须现配现用，用过一次即应废弃。各种试剂必须是化学纯或者分析纯。器皿、染色缸必须洁净而干燥。福建如何使用糖原染色试剂盒