做免疫组化时如何选择一抗？
1、单克隆和多克隆抗体的选择。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合，就像导弹精确地命中目标一样。另一方面，即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中，一般单克隆抗体特异性强，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对就低；而多克隆抗体特异性稍弱，但抗体的亲和力强，灵敏度高，但易出现非特异性染色（可以通过封闭等避免）。
2、应用范围的选择。有的一抗只能用于Westernblotting，或免疫组化、免疫荧光、免疫沉淀等；甚至标明石蜡切片或冰冻切片。
3、种属反应性的选择（speciesreactivity）。这一点很重要，表明这种抗体可能存在种属差别，且这种抗体适合检测哪种种属动物体内的抗原。
4、种属来源，一般兔来源的多是多克隆抗体；而小鼠来源的多是单克隆抗体，但也有另外。根据此来源来选择相应的二抗。
5、生产厂家的选择。
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免疫组化在在病理诊断中，随着各种抗体新的用途不断被发现及越来越多的新型抗体的出现，免疫组化在cancer诊断及鉴别诊断、分类、预后判断等方面产生了重大的影响。由于免疫组化技术也存在一些局限性，因此，深入研究免疫组化原理和技术，并努力实现规范化的操作，才能充分发挥免疫组化在病理的诊断及鉴别诊断、判断预后、指导临床医疗中的作用。
观察组织切片中抗原的数量及其在组织中的分布情况，对抗原进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学，由于抗原与抗体特异性结合，因此通过免疫组化使标记抗体的显色剂(酶、荧光素、同位素、金属离子等等)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)。IHC所用标本主要为两大类:组织标本和细胞标本，其中制作组织标本更常用、更基本的方法是石蜡切片。石蜡切片对于组织形态保存好，有利于各种染色对照观察，而且能长期保存;石蜡切片中使用的甲醛固定剂对组织内抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中优先选择的组织标本制作方法。 宁夏动物组织免疫组化哪家好免疫组化样本如何处理？
病理医师日常工作中经常说的一句话应该就是“做个免疫组化吧”；不管是临床医师，还是患者，他们问的多的问题则是“为什么要做免疫组化？”病理医师通过“特殊染色”来进行细胞的识别。这一做法的依据是特定细胞和组织中的成分不同、则化学性质不同，通过染色的方法则可以呈现不同颜色。不过，由于组织固定或储存等，会造成相应物质的活性降低甚至消失，因而限制了特殊染色方法的应用。随着免疫学研究的进展，根据抗原与相应抗体间特异性结合的性质，则有了现在免疫组化的方法：不同细胞、不同组织中抗原有一定差异，抗体与被测组织中的特定抗原结合，进而通过一定显色方法将结合的抗体显示出来。如有相应显色，则证实可能有被测抗原；无显色则可能无被测抗原。当然，这一方法中需注意相应的“例外”，如抗体的非特异性结合、非特异性显色，则容易造成“假阳性”；或者虽有相关抗原、但所用抗体与该抗原并未结合等，则容易造成“假阴性”。随着免疫组化的应用经验的增加，这些问题在常规应用中尽量得以避免，前者如各种显色方法的优化；后者如抗原修复方法的优化、新型抗体开发及选择。
免疫组化（IHC）利用抗体检测组织切片中蛋白质和其他抗原的定位。
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抗体-抗原的相互作用通过有色酶底物显色检测或荧光染料荧光检测进行观察。虽然IHC在定量方面不如蛋白质印迹或ELISA，但是IHC可以提供完整组织中蛋白定位的宝贵信息。蛋白表达谱对病理学家以及作为诊断工具都具有重要意义。
IHC实验成功的关键在于稳定、优化且可重复的染色方案，而该方案应使用高质量的特异性试剂。 在南京英瀚斯做的免疫组化，效果不错！
免疫组化的抗原修复
很多抗原的可视性可以通过抗原修复来提高，抗原修复可以打破福尔马林固定时形成的蛋白质交联，从而使被掩藏的抗原显现出来。抗原修复技术包括不同时间长度的加热或者利用蛋白酶来做酶消化，例如蛋白酶K，胰蛋白酶或胃蛋白酶。加热的方法通常会用到微波炉，高压锅，蒸箱或水浴。将样品在接近100°C高温加热20分钟后再冷却同等的时间。**常用的抗原修复液有a)柠檬酸盐缓冲剂,pH6.0,b)Tris-EDTA,pH9.0和c)EDTA,pH8.0.如需要可用柠檬酸盐缓冲剂做抗原修复：柠檬酸盐缓冲剂配方:10mM柠檬酸钠,0.05%Tween-20,pH6.0或10mM柠檬酸,0.05%Tween-20,pH6.0将含有柠檬酸钠或柠檬酸盐缓冲剂的染色盘放到蒸箱或者水浴中，预热到95-100°C。将切片浸没于染色盘中。盖子虚掩，孵育20-40分钟(研究者需自己决定比较好的孵育时间)。关掉蒸箱或水浴，将染色盘置于室温下，让切片冷却20分钟。在TBS-Tween-20中漂洗切片2次，每次2分钟。开始封闭步骤。 免疫组化如何得到好的效果？宁夏动物组织免疫组化哪家好
做免疫组化意味什么？四川小鼠免疫组化检测
免疫组化染色切片的好坏直接影响着病理医生对其染色结果的判断，进而影响病理诊断，所以制作一张良好的免疫组化切片至关重要，它需要病理医生与病理技师两者间的相互协调，密切配合和共同努力，病理医生选择抗体，设置对照，判读结果，指导技术;而技术人员进行实验操作，保证染色质量。在免疫组化切片的制作过程存在多个环节，每一环节的失误都可能影响检测结果，如抗原保存，蛋白酶消化，增强技术及对抗体的管理、使用和试剂的浓度等等，因此制作一张高质量的免疫组织化学切片是多方面相互配合的结果。四川小鼠免疫组化检测
