同样唾液和口腔拭子中核酸提取方法与血液的提取方法相似包括以下4个过程:1.通过裂解液裂解口腔脱落细胞,释放核酸物质。2.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质,去除其他杂质。3.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。4.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。传统的提取方法由于核酸提取纯化过程耗时长,成本较高,步骤繁多,增加了基因污染的风险。因此需要一种血液、唾液和口腔拭子样本经过简单处理就可以作为模板进行荧光PCR扩增检测方法,满足科研和医学领域快速检测的要求。技术实现要素:本发明提供了一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。该发明通过快速简单处理口腔拭子和血液样本,且无需纯化可直接用于荧光PCR扩增的DNA。10分钟内即可得到应用于ARMS-PCR反应体系的模板DNA。同时优化ARMS-PCR荧光体系,在反应液中加入防污染UDG酶以及提高Taq酶稳定性的的BSA,从而实现血液和口腔拭子基因组快速荧光PCR扩增检测。该方法快速简单,成本低廉,检测灵敏,且用该方法提取的基因组与商品化试剂盒提取的基因组的检测结果相近。口腔拭子 非常大限度的样本洗脱及转移,对微量DNA样本采集尤为出色。官方口腔拭子交易价格

加入20μteinaseK溶液,混匀。加入200μL缓冲液GB,充分颠倒混匀,在56℃放置14min(期间颠倒混合样品数次),溶液应变清亮,若未完全变清亮,延长裂解时间至完全变清亮。加人200μL无水乙醇,充分振荡混匀10s,此时可能会出现絮状沉淀。将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12,000rpm离心30s,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD(已加入无水乙醇),12,000rpm离心30s,弃废液,将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW(已加入无水乙醇),12,000rpm离心30s,弃废液,将吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm(~13,400×g)离心2min。将吸附柱放置新的,以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。向吸附柱中悬空滴加50~200μL洗脱缓冲液,室温放置2~5分钟,12,000rpm(~13,400×g)离心2min,将溶液收集到离心管中,测定浓度及纯度后,取3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。用本发明和对照产品对8份样本同时进行荧光PCR扩增。结果如图6,本发明所有反应孔背景信号好、Ct值都在21~25之间,荧光扩增曲线呈典型的S型。福建高质量口腔拭子口腔拭子是由手柄、连接杆和采样头组成。

所有反应孔背景信号好、Ct值都在19~25之间,荧光扩增曲线呈典型的S型,说明本发明实例1提供的血液样本快速提取法用于荧光PCR扩增的方法具有较好的可行性。将四份不同来源不同的人血液样本进行荧光PCR扩增检测,每份样本平行三次,结果分别如图2、图3、图4、图5所示,由图可见,每个样本的平行实验,其曲线的Ct值很接近且≤25。说明本发明实例提供的血液样本快速提取法用于荧光PCR扩增的方法有可靠的重复性以及较好的均一性。实施例2与市场现有的血液基因组提取试剂盒产品对比。本发明的具体步骤如下:将**管颠倒混匀后,吸取100μL血液至,加入200μL的核酸释放剂(20mM~80mM的氢氧化钠溶液、~、~、~、~***钠、~3%甲酰胺),涡旋混匀,然后5000g离心30s,弃上清,获得细胞沉淀;然后再加入200μL核酸释放剂,涡旋1min至沉淀完全散开,5000g离心30s,弃上清;向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂,涡旋振荡1min,室温放置5min,12000g离心30s,取上清液即为提取的血液基因组DNA;取上清液3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。选用某公司的血液基因组提取试剂盒作为方法比对,具体操作过程:将取血管颠倒混匀数次,吸取200μL血液于。
基因采样套装用途:基因检测,分子诊断,DNA采集,细胞学,基因检测采样,**基因,遗传学,公安DNA系统基因身份证,基因密码,疾病筛查分析研...查看全文全外显子基因突变检测采样盒全外显子基因突变检测采样盒,是贝瑞和康推出的一款便携式口腔脱落细胞采样盒,用于与乳腺AI、卵巢AI等发生密切相关的BRCA1/2基因突变检测的前期取样过程。该采样盒内置两套口腔拭子,口腔拭子采用自封袋单独包
检测口腔拭子采样流程指南口腔拭子采样方法(口腔脱落细胞)取样是简单、无痛、无创的DNA标本采集方法。
该方法适用于采集任何年龄段人群的DNA样本。 口腔拭子有着独有的喷射式植入尼龙纤维技术,增加标本的采集及释放量。

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产品简介:口腔拭子DNA快速提取试剂盒专门为从口腔拭子刮取的黏膜组织和浸润的唾液中提取基因组DNA而设计,能有效回收>50 bp已降解的DNA,包括降解的基因组DNA,线粒体DNA和DNA等。本试剂盒使用DNA吸附柱-C4回收DNA,很小洗脱体积为10 μl。原理:Buffer SL与蛋白酶K裂解细胞释放DNA,Buffer GBR调整结合条件,材料选择性吸附DNA,洗涤去除蛋白和盐,低盐溶液洗脱DNA。
建议采样方式:使用吸水性强的棉质或无纺布材质的口腔拭子,含口中充分浸润唾液(唾液中DNA含量丰富)在脸颊内测刮10-20次。
产品使用说明书:口腔拭子DNA快速提取试剂盒更多产品信息请关注:
产品特点:试剂盒包含的Buffer SL可作为样品保护液(如使用自备的保护液,请联系技术支持);
预期产量为2-5 μg DNA/ 100 μl唾液(与拭子材质和采样方式有关);适合处理无纺布和棉质的拭子,不适合处理海绵材质的拭子。
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