优化转染条件MOI值对Lentivirus载体转染许旺细胞的影响：以Lentivirus三质粒系统构建病毒载体，在体外对原代大鼠许旺细胞进行转染，研究不同MOI值（***复数）对转染效率的影响32。结果显示，在病毒转染3天后，各不同MOI值的培养孔中开始出现少量荧光反应，第5天时荧光数量明显增多，第7天达到高峰，第9天与第7天变化不明显。从细胞转染效率来看，不同的MOI值效果不同，MOI值为5和10时转染效率较高。这表明在使用Lentivirus载体转染许旺细胞时，优化MOI值可以提高转染效率。同时，未提及该转染过程对细胞死亡的影响，但可以通过进一步的实验，如细胞活性检测等，来确定在提高转染效率的同时对细胞死亡的影响。脂质复合物(CLNACs)通过网格蛋白参与的内吞作用进入细胞。福建长沙转染试剂
emlikiForestvirus相关细胞：利用基于SemlikiForestvirus的RNA和DNA向量研究非病毒细胞穿透肽递送载体PepFect6与阳离子脂质体Lipofectamine2000的转染效率，并评估它们对病毒复制的影响。结果表明，PepFect6***证明能够将大（13-19kbp）构建体转运穿过细胞膜。但使用PepFect6试剂递送的DNA分子被发现比使用Lipofectamine2000试剂递送的DNA分子晚约。***，虽然PepFect6和Lipofectamine2000试剂都可用于alphavirus研究，但PepFect6更受青睐，因为它不会引起正常细胞表型的变化，也不会影响先前转染细胞中病毒的正常复制***周期12。奶牛子宫内膜原代上皮细胞：应用带有FAM标记的miRNA-185mimics为报告基因，检测两种不同转染试剂（LipofectamineRNAiMAX与Lipofectamine2000）在细胞接种12、18、24h后的转染效率。结果显示，无论使用Lipofectamine2000还是LipofectamineRNAiMAX作为奶牛子宫内膜原代上皮细胞的转染试剂，各组间12h的转染效率均极***高于18、24h，18h的转染效率均极***高于24h；LipofectamineRNAiMAX各时间点的转染效率均极***高于Lipofectamine2000。使用LipofectamineRNAiMAX作为奶牛子宫内膜原代上皮细胞的转染试剂时，12h的荧光强度极***高于18、24h。 高分子转染试剂难转染脂质复合物又称阳离子脂质-核酸复合物(CLNACs)。
原代细胞和干细胞的转染效率通常较低。原代细胞刚刚从组织中分离出来，还保留着体内复杂的生理特性，其细胞膜上的受体和内吞机制等可能不适应脂质体转染。例如，原代间充质干细胞的转染效率可能低于10%。干细胞由于其特殊的自我更新和分化潜能，其细胞内部的信号通路和膜运输机制对脂质体转染比较敏感，转染效率也不高。而且在转染过程中，还需要考虑不影响干细胞的干性，这也增加了转染的难度。
原代细胞和干细胞对脂质体的毒性反应比较敏感。脂质体可能会干扰它们的正常生理功能，如影响干细胞的自我更新和分化能力。对于原代细胞，可能会改变其原有的表型或者***细胞的应激反应，导致细胞提前衰老或者死亡。
纳米颗粒递送药物并发挥功能的能力在很大程度上取决于它们被细胞摄取的机制。以蒲公英汤剂体为例，研究发现亲溶酶体物质能***抑制蒲公英汤剂体进入细胞；巨胞饮抑制剂细胞松弛素D和阿米洛利能***降低蒲公英汤剂体的胞内摄入，且呈现剂量依赖性，敲减Rac1和PAK1也有效地抑制其进入细胞。这些结果提示蒲公英汤剂体通过内吞进入A549细胞且主要由巨胞饮介导26。同理，RNA转染试剂在某些情况下也可能利用巨胞饮途径进入细胞。电穿孔转染中的内吞途径电穿孔转染是一种用于基因递送的技术，在研究其机制时发现，用冰冷介质处理或在电穿孔转染前使用内吞抑制剂处理三种不同的人类细胞系（HEK293、HCT116和HT29）。结果表明，用冰冷介质、氯丙嗪或染料木黄酮处理会***降低所有三种细胞系的电穿孔转染效率，但阿米洛利处理对电穿孔转染效率影响不***。对于用小干扰RNA（siRNA）处理的细胞，只有敲低网格蛋白重链（CLTC）会导致所有三种细胞系的电穿孔转染效率降低。这些数据表明，网格蛋白介导的内吞作用在电穿孔转染中起着重要作用27。为了在体外和体内可重复地传递基因和siRNA，含有核酸的脂质体、脂丛和多丛的配方需要精确组成转染试剂。
转染时间对奶牛子宫内膜原代上皮细胞转染的影响：在奶牛子宫内膜原代上皮细胞中，应用带有FAM标记的miRNA-185mimics为报告基因，检测两种不同转染试剂（LipofectamineRNAiMAX与Lipofectamine2000）在细胞接种不同时间后的转染效率33。结果显示，无论使用哪种转染试剂，12h的转染效率均极***高于18、24h，LipofectamineRNAiMAX各时间点的转染效率均极***高于Lipofectamine2000。并且，使用LipofectamineRNAiMAX作为转染试剂时，12h的荧光强度也比较高。这说明在奶牛子宫内膜原代上皮细胞中，选择合适的转染试剂和转染时间可以提高转染效率。同时，该研究未明确转染对细胞死亡的影响，但可以进一步研究不同转染条件下细胞的存活率，以确定在提高转染效率的同时降低细胞死亡的比较好条件。在聚葡萄糖、精胺(PG)偶联物和第四代聚酰胺树状大分子(PAMAM G4)的帮助下。河北Lipo2000转染试剂
deae-葡聚糖是一种化学修饰的葡聚糖类似物。福建长沙转染试剂
阳离子聚合物作为转染试剂结合机制：以阳离子聚合物EZTransCellReagent为例，在优化RNA干扰（RNAi）条件的研究中发现，阳离子聚合物通过与RNA分子结合来实现转染14。例如，设计针对GFP的shRNA，使用EZ转染试剂将其转染到细胞中，shRNA***降低了GFP的表达。预稀释的转染试剂在室温下以及小核酸的存在可增加转染效率，且在24小时时达到峰值。与环状核酸相比，线性核酸与阳离子聚合物结合时显示出更高的转染效率和更高的基因组整合率。作用特点：阳离子聚合物介导的RNAi条件优化后，为未来的RNAi研究提供了有用的数据。福建长沙转染试剂
