实时动态成像实时动态成像对于研究动物体内的生理和病理过程具有重要意义。通过将PET动态成像技术应用于高吞吐量多鼠成像方法，可以同时获取动态脑图像4。这为研究动物大脑的功能连接和神经活动提供了新的途径。动物成像技术还可以结合基因编码的神经调节工具，实现对动物大脑活动的实时监测和调控13。这将有助于深入了解动物的行为和认知过程，以及神经系统疾病的发生机制。四、标准化和质量控制小动物成像的标准化对于提高数据的有效性和可靠性至关重要。使用小动物成像设备的标准化，以及一般的动物处理，是确保数据可重复性和可靠性的关键14。例如，提供有效的小动物成像质量控制的指导，使用幻像建立质量控制计划，可以标准化多中心研究或多扫描仪的图像质量参数。在动物实验中，需要解决由于动物处理引起的额外复杂性，以确保标准化的成像程序。实施标准化的动物神经成像协议将促进动物群体成像努力以及元分析和复制研究，提高研究结果的可比性和可靠性。近红外荧光染料在实际应用中可能会受到氧气等氧化剂的影响。免疫组化荧光染料绿色
控制聚集状态荧光染料的聚集状态会影响其荧光性能。江琳等人在2024年的研究中指出，氟硼荧染料在生物环境中的聚集猝灭效应限制了其实际应用3235。通过在氟硼荧染料的meso位引入具有大空间位阻的三甲基苯，可以有效抑制聚集诱导的发光猝灭，提高荧光染料的性能。在实际应用中，可以通过控制荧光染料的浓度、添加表面活性剂等方法来调节其聚集状态，从而提高其荧光性能。例如，适量添加表面活性剂可以增加染料的荧光强度34。控制环境中的其他因素除了上述因素外，环境中的其他因素也可能会影响荧光染料的性能。例如，在地下水流动追踪中，荧光染料的定量测定会受到溶液pH值、温度、天然有机物的共存以及过滤等因素的影响37。可以通过缓冲溶液调节pH值、调整样品温度、研究天然有机物的荧光/淬灭特性以及使用清洗过的聚四氟乙烯过滤器等方法来控制这些因素的影响。在荧光染料废水处理中，需要考虑废水的COD、BOD5、NH3-N、SS等指标，通过沉淀气浮一体化设备和SBR工艺等方法进行处理，以降低废水对环境的影响33。综上所述，在实际应用中，可以通过控制温度、pH值、溶剂、聚集状态以及环境中的其他因素等方法来有效提高荧光染料的性能。中国台湾荧光染料Cy5.5通过不同的连接方法将四种氨基菁染料通过反相微乳液共价封装在二氧化硅纳米颗粒内。
荧光染料的作用过程吸收激发光：当荧光染料暴露在特定波长的激发光下时，染料分子中的电子吸收光子的能量，从基态跃迁到激发态。这个过程非常迅速，通常在飞秒到皮秒的时间尺度内完成25。激发态的电子弛豫：处于激发态的电子不稳定，会通过各种方式释放能量，回到基态。这个过程包括内部转换和振动弛豫等。内部转换是指激发态的电子通过无辐射跃迁的方式回到能量较低的激发态，而振动弛豫则是指激发态的电子通过与周围分子的碰撞等方式，将多余的能量转化为分子的振动能，从而使电子处于激发态的比较低振动能级35。发射荧光：当激发态的电子回到基态时，会发射出荧光。荧光的波长通常比激发光的波长更长，这是因为在发射荧光的过程中，电子释放的能量一部分以热能的形式散失，导致发射的光子能量较低，波长较长。
神经特异性荧光染料：噁嗪类荧光染料YQN-3能够精细定位并识别出动物（大鼠）的喉返神经，从而在术中保留这些神经的完整性8。这表明该类荧光染料对特定的神经组织具有较高的特异性。良好的稳定性可以确保在动物成像过程中始终保持对特定神经部位的准确识别和定位，为手术操作提供可靠的指导。如果稳定性不佳，可能会导致成像部位的特异性降低，出现错误定位或无法清晰显示目标神经的情况。荧光染料标记的氧化铁磁性纳米颗粒（MNP）：使用双重荧光染料标记的MNP，其中附着在**（DY-730）上的染料在小鼠施用后的一天，其荧光在肝脏和脾脏中较为突出，但此后的时间点不明显。相反，在体内粘附到PEG涂层上的染料Dy-555的荧光较为稳定14。这说明不同部位的荧光染料稳定性差异会影响对特定***（如肝脏和脾脏）的成像特异性。稳定性好的染料能够更准确地反映目标***的情况，而稳定性差的染料可能会导致成像结果的不确定性，影响对动物体内特定部位的准确判断。PAT 结合了光学的高对比度和声学的高分辨率的优势，在近红外光波段，血红蛋白有较高的吸收系数。
X射线发光成像：文献《小动物的X射线发光成像》中提到，X射线发光成像结合了X射线成像的高空间分辨率和光学成像的高测量灵敏度，可能成为小动物分子成像的工具。目前有两种类型的X射线发光计算断层扫描（XLCT）成像，一种用铅笔光束X射线以获得高空间分辨率但测量时间较长，另一种使用锥梁X射线在很短的时间内获得XLCT图像但空间分辨率受损7。近红外高光谱成像（NIRHSI）：文献《NIRhyperspectralimagingforanimalfeedingredientapplications》中探索了近红外高光谱成像（NIRHSI）在动物饲料中的应用。其能够在像素级别提供样品的化学成分信息，相比传统的近红外光谱具有优势。例如，在预测大豆粕和干酒糟及其可溶物（DDGS）中的赖氨酸浓度时，结合偏**小二乘回归或光谱角度映射（SAM）分类取得了有前景的结果8。红外热成像：文献《Infraredimaginganewnon-invasivemachinelearningtechnologyforanimalhusbandry》指出，红外热成像在生物学和兽医学中有无数应用。由于其非侵入性、易于自动化和高度敏感性，在动物疾病检测和缓解中的应用越来越受欢迎。例如，可以通过红外扫描确认***动物身体部位的温度升高，用于诊断常见的猪疾病，如口蹄疫、跛行、呼吸道疾病和腹泻等。 不同结构修饰的噁嗪衍生物荧光染料在神经与其他组织的对比度上也存在差异。免疫组化荧光染料Fluor 555
荧光染料作为一种重要的科研和应用工具，近年来得到了广泛的关注和研究。免疫组化荧光染料绿色
肿瘤细胞成像：近红外荧光染料IR-780具备使多种肾透明细胞*细胞显像的能力，对正常肾胚上皮细胞则无此能力，可用于血液中肾透明细胞*细胞的特异性诊断。这为肿瘤细胞的检测和诊断提供了新的方法21。疾病标志物检测：设计合成的近红外荧光探针RB-Phenylacrylate(NOF1)，用于高选择性和高灵敏度检测半胱氨酸(Cys)，并成功应用于活细胞、斑马鱼和小鼠中半胱氨酸的近红外荧光成像检测。近红外荧光探针RB-Phenyldiphenylphosphinate(NOF2)用于过氧亚硝酸根的荧光成像，实现了活细胞和小鼠炎症模型中ONOO⁻的荧光成像检测。这些探针为疾病标志物的检测和成像提供了新的手段23。四、支持超分辨率成像新型近红外氧杂蒽荧光染料如KRhs，可用于超分辨率成像。KRhs显示出强烈的近红外发射峰，在700nm处具有高荧光量子产率，且在没有增强缓冲液的帮助下，表现出随机荧光开关特性，支持单荧光团的时间分辨定位。KRhs被功能化为KRh-MitoFix、KRh-Mem和KRh-Halo，分别具有线粒体、质膜和融合蛋白靶向能力，可用于活细胞中这些目标的超分辨率成像20。免疫组化荧光染料绿色
