近红外荧光成像：一些荧光染料在近红外区域发射荧光，具有组织穿透能力强的优势。例如，苯并吩噻嗪类近红外光敏剂通过***溶酶体-膜破坏途径，利用PDT辐射产生的超氧化物（Ⅰ型）和1O2（Ⅱ型）来消融肿瘤细胞。该系列光敏剂ET-NB-C12在体外和体内*****中表现出突出的***性能29。基于塞来昔布和苯并吩噁嗪的近红外发射（700nm）荧光探针（NB-C6-CCB），在COX-2高表达的肿瘤细胞或组织中发射出近红外荧光，用于检测细胞内高尔基体中COX-2酶29。光控开关与药物释放检测：设计的***药物递送系统，以NaYF4：Yb3+，Tm3+上转换纳米晶为荧光源，并将其用静电纺丝的方式掺杂在介孔二氧化硅纤维中。通过低温氧化处理保留了纤维的出色的荧光性能和柔性，并在载药后的纤维的孔洞处加装光控开关。通过二次载药，使得纤维可以载有更多的抗**药品。与传统药物递送系统相比，该载药系统可在近红外光控制下释放药物，并且利用FRET原理，实时的检测药物释放量。噁嗪衍生物荧光染料由于其在动物神经成像方面的潜在应用价值，近年来受到了关注。细胞膜荧光染料Cy5
可视化经络：向人体穴位（PC5、PC6和PC7）和非穴位对照处注射两种荧光染料（荧光素钠和吲哚菁绿，以评估在人体中是否也能观察到过去40年动物研究中示踪染料在特定皮肤点注射后产生与针灸经络密切对齐的线性迁移现象。结果表明，在PC6注射的19次荧光素试验中，有15次（79%）染料沿与心包经密切匹配的路径向近端缓慢扩散，并在穴位PC3处近端出现并合并。PC6对照处注射两种染料均未产生任何***的线性通路跟踪药物生物分布：合成并制备各种染料纳米颗粒，通过体内荧光成像测定研究Bel-7402**瘤小鼠对荧光纳米颗粒的生物分布，结果表明某些染料纳米颗粒可以反映紫杉醇的组织分布，基于这些结果可以为药物分布调查和疾病靶向***中选择染料提供指导。用于量子点标记**成像：量子点是一类新型的荧光标记物，其独特的光学性质使其成为有吸引力的体内标记物，可用于深层组织成像。通过荧光扩散断层扫描（FDT）方法对CdTe/CdSe-核/壳荧光纳米晶体进行实验，展示了将含有量子点的胶囊放入小动物食管中模拟标记**的死后实验结果，并应用基于计算比较大曲率零点的算法处理荧光图像以检测荧光包含物的边界，证明了FDT方法在人类组织或人类**动物模型中对深层荧光**成像的潜在能力。上海长沙荧光染料动物成像技术的一个重要发展方向是多模态融合成像。
荧光染料的作用过程吸收激发光：当荧光染料暴露在特定波长的激发光下时，染料分子中的电子吸收光子的能量，从基态跃迁到激发态。这个过程非常迅速，通常在飞秒到皮秒的时间尺度内完成25。激发态的电子弛豫：处于激发态的电子不稳定，会通过各种方式释放能量，回到基态。这个过程包括内部转换和振动弛豫等。内部转换是指激发态的电子通过无辐射跃迁的方式回到能量较低的激发态，而振动弛豫则是指激发态的电子通过与周围分子的碰撞等方式，将多余的能量转化为分子的振动能，从而使电子处于激发态的比较低振动能级35。发射荧光：当激发态的电子回到基态时，会发射出荧光。荧光的波长通常比激发光的波长更长，这是因为在发射荧光的过程中，电子释放的能量一部分以热能的形式散失，导致发射的光子能量较低，波长较长。
在细胞内转运机制与ABC转运蛋白的关系：在某些细胞中，如多柔比星（DOX）-耐药乳腺*细胞（MCF-7/DOX），D-荧光素钾盐是ATP结合盒转运蛋白（ABCtransporters）的底物14。ABC转运蛋白在细胞内负责物质的转运，包括将某些物质排出细胞外。研究发现，β-榄香烯（β-ELE）可以通过两种方式影响D-荧光素钾盐在细胞内的转运。一是减弱ABC转运蛋白的功能，从而减少D-荧光素钾盐的外排；二是下调ABC转运蛋白的基因和蛋白表达量，同样减少D-荧光素钾盐的外排14。在多药耐药中的作用：ABC转运蛋白与多药耐药（MDR）现象密切相关。在耐药细胞中，ABC转运蛋白过度表达，会将化疗药物等排出细胞外，降低药物的疗效。而D-荧光素钾盐作为ABC转运蛋白的底物，其在细胞内的转运情况可以反映ABC转运蛋白的功能状态。因此，通过研究D-荧光素钾盐的转运机制，可以为理解和逆转多药耐药提供线索14。不同结构修饰的噁嗪衍生物荧光染料在神经与其他组织的对比度上也存在差异。
浓度测量方法：文献12提出了一种简单而通用的测量活细胞内荧光标记目标分子的细胞内浓度的方法。该方法基于染料荧光与量子产率和分子数量成正比的常识，通过已知浓度的一种染料和未知浓度的另一种染料的荧光比例以及特定的比例系数来确定未知染料的浓度。例如，在测量神经元中荧光标记的蛋白质浓度时，通过这种方法可以进行快速、廉价且可靠的定量分析13。自组织状态空间模型的应用：文献13提出了一种同时测量荧光强度和荧光信号的方法来估算细胞内Ca探针的浓度，并提出了细胞内Ca〜（2+）动力学、膜电流测量过程和荧光信号强度测量过程被描述为状态空间模型，进而扩展为自组织状态空间模型，用粒子滤波法进行估计，通过数值实验验证了该方法的有效性，可以估计细胞内钙离子指示剂染料的浓度和钙离子浓度的时间过程。通过神经鞘的电泳标记神经元群体机制。广东纳米荧光染料
荧光染料在动物成像中标记神经元的机制较为复杂。细胞膜荧光染料Cy5
荧光染料在细胞内离子浓度测量中起着至关重要的作用，不同种类的荧光染料在测量细胞内离子浓度时存在多方面的具体差异。以下将从多个角度进行详细阐述。一、测量的离子种类不同钙敏感荧光染料：文献0提到“Calciumsensitivefluorescentindicatorssincecalciumisthemostcommonlystudiedion”，即钙敏感荧光指示剂是**常被研究的离子之一。这类染料主要用于测量细胞内的钙离子浓度。例如在实验中，将细胞注入钙敏感荧光染料后，在高倍显微镜下观察，通过过滤特定带宽的照明光激发染料分子，使其发出荧光，从而测量钙离子浓度1。氢离子敏感荧光染料：在一些研究中，也有用于测量细胞内氢离子浓度的荧光染料。文献10提到“该系统使用1µm的pH敏感荧光染料涂层磁性纳米颗粒进行了细胞内pH定位”，这里的pH敏感荧光染料就是用于测量氢离子浓度的，通过这种染料可以确定细胞内的pH值，进而反映氢离子浓度的变化11。细胞膜荧光染料Cy5
