转染试剂相关图片
  • 悬浮细胞转染试剂定制,转染试剂
  • 悬浮细胞转染试剂定制,转染试剂
  • 悬浮细胞转染试剂定制,转染试剂
转染试剂基本参数
  • 品牌
  • 星叶生物
  • 型号
  • 定制
  • 是否定制
转染试剂企业商机

优化转染条件MOI值对Lentivirus载体转染许旺细胞的影响:以Lentivirus三质粒系统构建病毒载体,在体外对原代大鼠许旺细胞进行转染,研究不同MOI值(***复数)对转染效率的影响32。结果显示,在病毒转染3天后,各不同MOI值的培养孔中开始出现少量荧光反应,第5天时荧光数量明显增多,第7天达到高峰,第9天与第7天变化不明显。从细胞转染效率来看,不同的MOI值效果不同,MOI值为5和10时转染效率较高。这表明在使用Lentivirus载体转染许旺细胞时,优化MOI值可以提高转染效率。同时,未提及该转染过程对细胞死亡的影响,但可以通过进一步的实验,如细胞活性检测等,来确定在提高转染效率的同时对细胞死亡的影响。超声辅助转染涉及在宿主细胞膜上制造微小的孔,以促进核酸(包括DNA和RNA)的传递。悬浮细胞转染试剂定制

考虑细胞毒性低细胞毒性的转染试剂对于保持细胞的活性和正常生理功能至关重要。评估细胞活力:可以通过检测细胞的存活率、增殖能力等指标来评估转染试剂的细胞毒性。在研究不同转染试剂对C2C12细胞的转染效率时,通过优化DNA:转染剂比例和细胞密度,使所有试剂在达到较高转染效率的同时,对细胞生长和活力的影响有限6。在比较不同转染试剂递送siRNA的摄取、敲低效率和毒性情况的研究中,新开发的CALNPRNAi转染试剂转染效率***高于传统转染试剂,同时毒性比较低7。选择温和的试剂:一些转染试剂可能对细胞的毒性较小,例如基于脂质的转染试剂通常比基于病毒的转染试剂更温和。在颅内递送合成mRNA的研究中,使用常用的转染试剂将合成mRNA递送至小鼠大脑,结果表明该模型中合成mRNA可以成功递送至大脑,且没有可测量的毒性8。上海小动物转染试剂纳米颗粒可以参与内体途径,并可以通过细胞质将DNA运输到细胞核。

鸡胚成纤维(CEF)细胞、293细胞、PK细胞和MDCK细胞:在RNA干涉中,转染试剂的用量与siRNAs的量成正相关关系,但转染试剂对细胞有一定毒性作用。相同用量的RNAiFectTM和SuperFect两种转染试剂对293细胞、PK细胞和MDCK细胞的生长影响远远小于对CEF细胞的影响。两种转染试剂用于外源小分子转染时,建议在293细胞、PK细胞和MDCK细胞上的用量不超过3ul。两种转染试剂对CEF细胞的毒性较大,不适合用于转染111316。MEF细胞、3T3细胞、Hela细胞及MCF-7细胞:分别用RNAiMax及MessageMax将modGFP转染入MEF细胞,流式分析发现MessageMax的转染效率略高于RNAiMax,但两者没有统计学差异。但是流式分析和荧光显微镜观察均表明MessageMax转染后1周内的蛋白翻译表达效率更高,是更高效的modRNA转染试剂。MessageMax能将modGFP高效转染入3T3细胞、Hela细胞及MCF-7细胞中,并实现modGFP和modmCherry在MEF细胞中的共转及核内因子nGFP和mTBX5在MEF细胞核中的定位。

    在鲤上皮瘤细胞中的应用在鲤上皮瘤细胞进行基因功能研究时,转染试剂和DNA的剂量以及取样时间缺乏统一的数据支持。选取两种常用转染试剂Lipofectamine®2000和FuGENE®HD进行多配组转染试验,在28℃,以35mm培养皿铺板,16μLLipofectamine®2000和4μgDNA在转染后48h达到比较高转染效率(±)%;12μLFuGENE®HD和4μgDNA在转染72h后转染效率达到(±)%。通过构建鲤高不饱和脂肪酸合成相关转录因子过氧化物酶体增殖物***受体蛋白α(PPARα)的EGFP标签载体进行验证,两种转染试剂分别获得了约4%和约8%的转染效率,并对下游脂肪酸去饱和酶2(fads2)基因的转录调控效应进行检测,结果为后续利用鲤上皮瘤细胞进行基因功能研究提供了数据支持5。在巨噬细胞中的应用商业转染试剂Lipofectamine已***用于核酸的细胞质递送和与细胞内先天免疫传感器进行细胞源啮合,以触发I型干扰素(IFN)生产。然而,单独对IIFN响应的脂质切积胺的影响尚未详细研究。研究表明,Lipofectamine诱导在原始,I型IFN诱导依赖于干扰素调节因子(IRF)3和IRF7,并且部分需要达洛/白细胞介素-1受体-含有结构域的适配器诱导的干扰素-β。相比之下,转染试剂XFECT未***IIFN信令6。 为了在体外和体内可重复地传递基因和siRNA,含有核酸的脂质体、脂丛和多丛的配方需要精确组成转染试剂。

考虑多因子转染能力如果实验需要同时转染多个RNA分子或进行共转染实验,那么选择具有多因子转染能力的试剂是重要的。共转染效果:一些转染试剂可以有效地实现多个RNA分子的共转染,而另一些试剂可能在共转染方面效果不佳。在脂质体方法用于modRNA转染各种类型细胞的初步研究中,MessageMax能将modGFP高效转染入多种细胞中,并实现modGFP和modmCherry在MEF细胞中的共转及核内因子nGFP和mTBX5在MEF细胞核中的定位5。选择适合多因子转染的试剂:根据实验需求,选择能够满足多因子转染要求的转染试剂。例如,如果实验需要同时转染多个基因或进行基因编辑实验,那么选择具有多因子转染能力的转染试剂可以提高实验效率。与DNA转染类似,RNA可以通过基于RNA的病毒或非病毒载体导入真核细胞。甘肃转染试剂细胞实验

RNA 转染试剂是一类能够将 RNA 分子导入细胞内的物质作用原理。悬浮细胞转染试剂定制

对细胞活力的影响:一些研究表明,在阳离子脂质体LipofectamineTM2000介导下鸡TRPV6基因RNA干扰(RNAi)质粒转染入成骨细胞的实验中,当转染前细胞融合达到90%以上,质粒DNA与脂质体比例为1:2.5时转染效率比较高,并且在转染后48h转染效果比较好,对细胞的毒性作用较小3。在人肝瘤两种细胞模型中,通过比较LipofectamineRnaimax和Genmute转染剂发现,用基因***的细胞呈现荧光阴性对照siRNA的更高摄取,并且观察到与基因转染的细胞相对于脂质积rnaimax的细胞具有较高的活力6。有研究使用两种常见的RNA干扰(RNAi)转染试剂DharmaFECT1和INTERFERin,在模拟转染中使用非靶向siRNAs,结果表明这些试剂会引起HeLa细胞脂质组的变化,但功能影响仍有待研究,这也暗示在RNAi实验中使用适当的模拟转染对照非常重要。


悬浮细胞转染试剂定制

与转染试剂相关的**
信息来源于互联网 本站不为信息真实性负责