二、影响因素的差异细胞接种密度：不同类型的细胞在比较好转染效率下的细胞接种密度不同。例如，宫颈*细胞Hela和Siha的比较好接种密度为每24孔板的每孔1.5×10⁴个细胞1，而研究中Caco-2细胞的比较好接种密度为2×10⁵9。DNA用量：各种细胞所需的DNA用量也存在差异。如PC12细胞转染的比较好DNA用量为2μg3，而Caco-2细胞转染时比较好DNA用量为4μg9。脂质体与DNA的比例：不同细胞类型对应的比较好脂质体与DNA的比例不同。Hela细胞中miRNA与脂质体比例为1:0.5，Siha细胞中为1:0.71；Caco-2细胞转染时比较好脂质体与DNA比例为2.5:19。复合物形成时间和孵育时间：不同细胞类型对脂质体-DNA复合物的形成时间和细胞与复合物的孵育时间要求不同。例如，Hela和Siha细胞未明确提及复合物形成时间和孵育时间，而Caco-2细胞的比较好脂质体-DNA复合物形成时间为30min，细胞与复合物孵育时间为6h9。其结构的一个共同特征是分子中存在许多带正电的基团，这些基团被质子化成带正电的聚合物。山东难转细胞转染试剂
RNA转染试剂在不同细胞类型中的效果存在***差异。以下将详细阐述不同细胞类型对RNA转染试剂效果的具体影响。肾*细胞系786-O和ACHN：微小RNA-1180（miR-1180）转染对肾*细胞系786-O和ACHN生长有影响。实时定量（qRT）-PCR检测显示转染miR-1180后，786-O和ACHN细胞中p21mRNA水平分别上调。Westernblot检测表明p21蛋白表达趋势与qRT-PCR结果相符，同时细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）4、CDK6和CyclinD1蛋白的表达明显下调。流式细胞术（FCM）结果显示转染miR-1180后，位于G0/G1期的细胞比例明显增大，而位于S期和G2/M期的细胞比例明显下降，表明细胞周期被阻滞在G0/G1期。MTS结果显示转染miR-1180后，两种肾*细胞活力明显降低。集落形成实验显示miR-1180组的集落数数量明显较少，表明细胞增殖能力降低1。HeLa细胞：两种常见的RNA干扰（RNAi）转染试剂DharmaFECT1和INTERFERin，在使用非靶向siRNAs的模拟转染中，会引起HeLa细胞脂质组的改变。一些脂质对两种可能化学性质不同的转染试剂都有反应，而其他脂质种类只对其中一种试剂有反应。虽然这些脂质组改变的功能影响尚待研究，但实验表明在RNAi实验中使用适当的模拟转染对照非常重要，比较好辅以正交扰动。 体外转染试剂价格提高 RNA 转染试剂的转染效率同时降低细胞死亡。
联合使用其他技术优化DNA和RNA转移的转染试剂在肌肉细胞中的应用：在C2C12细胞中，比较了五种商业转染试剂（Lipofectamine®3000、Viafect™、Fugene®HD、C2C12CellAvalanche®和JetOPTIMUS®）的转染效率7。通过优化DNA:转染剂比例和细胞密度，所有试剂都达到了超过60%的转染效率，且对细胞生长和活力的影响有限。然而，在C2C12细胞中优化的用于DNA转移的条件下，这些试剂对siRNA的转移效率较低，并且对原代肌肉细胞的毒性较高。这提示在使用转染试剂时，可以通过联合使用其他技术或优化转染条件，以提高转染效率并降低细胞死亡。例如，可以进一步研究不同试剂之间的联合使用，或者优化转染后的培养条件，以降低细胞毒性。综上所述，在不同细胞模型中提高RNA转染试剂的转染效率同时降低细胞死亡，可以通过选择合适的转染试剂、优化转染条件以及联合使用其他技术等方法来实现。未来的研究可以进一步深入探讨不同细胞模型中比较好的转染策略，以满足不同研究领域的需求。
转染试剂用量：转染试剂的用量是影响转染效率的重要因素之一。过多或过少的转染试剂都可能导致转染效率降低。在阳离子脂质体Lipofectamine2000对PC12细胞的转染实验中，发现lipo2000用量为5μL，DNA2μg，转染时间为6h时，PC12细胞转染率高达40%，且未影响细胞的正常分泌3。在脂质体介导法转染肿瘤细胞效率的优化实验中，研究了细胞接种密度、DNA用量、脂质体与DNA的比例等因素对脂质体转染效率的影响。结果表明，2-5次细胞传代，2×105接种密度、4μgDNA用量、2.5:1的脂质体与DNA比例、30min脂质体-DNA复合物形成时间以及6h细胞与复合物孵育时间，转染效率比较高9转染是将外来核酸传递到真核细胞中以修饰宿主细胞的遗传组成的过程。
阳离子壳交联的类Knedel纳米粒子作为转染试剂结合机制：阳离子壳交联的类Knedel纳米颗粒（cSCKs）含有不同百分比伯胺和叔胺，通过与siRNA结合来发挥作用18。含100％伯胺的cSCK在HeLa细胞中的沉默效率比较高，能够抑制人血清中siRNA降解以及转染HeLa和小鼠巨噬细胞系。与融合的GALA肽复合可以增强iNOS在较低siRNA浓度下的siRNA沉默，这被证明可以增强摄取后的内体逃逸，进一步说明其结合机制可能涉及与siRNA的紧密结合以及促进细胞内转运。作用特点：cSCK-pa100在HeLa细胞、293T细胞和人支气管上皮（HEK）细胞中显示出比Lipofectamine2000更高的沉默效率，但在人支气管上皮（BEAS-2B）细胞和人乳腺上皮（MCF10a）细胞中可比。在小鼠巨噬细胞系中，cSCK-pa100表现出更大的iNOS沉默，并提供了更好的保护免于血清降解，证明了其作为siRNA转染剂的潜在用途。综上所述，不同类型的阳离子RNA转染试剂在结合RNA分子的机制上存在差异，主要涉及静电相互作用、纳米复合物形成以及与其他分子的协同作用等方面。这些差异导致了它们在转染效率、细胞毒性、对不同细胞类型的适用性等方面的不同特点。研究人员集中研究了将合成t细胞免疫原作为DNA疫苗使用的方法。Lipo2000转染试剂便宜
随着寡核苷酸生物合成产业的发展，不同类型的修饰寡核苷酸也被引入市场，以提高小RNA寡核苷酸转染的效率。山东难转细胞转染试剂
脂质体转染是一种常用的将外源基因导入细胞的方法，脂质体大小：脂质体的大小也可能影响转染效率。较小的脂质体可能更容易进入细胞，但可能携带的 DNA 量较少。较大的脂质体可能携带更多的 DNA，但可能更难进入细胞。研究发现，阳离子脂质体的大小与转染效率之间存在一定的关系。随着脂质体尺寸的增加，转染的主要途径可能从网格蛋白介导的内吞作用转变为脂筏介导的内吞作用，同时也可能观察到巨胞饮作用。这种变化可能会影响脂质体在细胞内的运输和释放，从而影响转染效率。山东难转细胞转染试剂
