考虑细胞毒性低细胞毒性的转染试剂对于保持细胞的活性和正常生理功能至关重要。评估细胞活力：可以通过检测细胞的存活率、增殖能力等指标来评估转染试剂的细胞毒性。在研究不同转染试剂对C2C12细胞的转染效率时，通过优化DNA:转染剂比例和细胞密度，使所有试剂在达到较高转染效率的同时，对细胞生长和活力的影响有限6。在比较不同转染试剂递送siRNA的摄取、敲低效率和毒性情况的研究中，新开发的CALNPRNAi转染试剂转染效率***高于传统转染试剂，同时毒性比较低7。选择温和的试剂：一些转染试剂可能对细胞的毒性较小，例如基于脂质的转染试剂通常比基于病毒的转染试剂更温和。在颅内递送合成mRNA的研究中，使用常用的转染试剂将合成mRNA递送至小鼠大脑，结果表明该模型中合成mRNA可以成功递送至大脑，且没有可测量的毒性8。其结构的一个共同特征是分子中存在许多带正电的基团，这些基团被质子化成带正电的聚合物。甘肃Lipo2000转染试剂
选择**适合的RNA转染试剂是一个复杂的过程，需要综合考虑多个因素。以下是一些关键的考虑因素和方法来帮助选择**适合的RNA转染试剂。一、考虑转染效率转染效率是选择RNA转染试剂的重要指标之一。较高的转染效率可以确保更多的细胞成功摄取和表达RNA。实验细胞类型：不同的细胞类型对转染试剂的敏感性可能不同。例如，一些细胞系可能更容易被某些转染试剂转染，而另一些细胞则可能对不同的试剂更敏感。在肾*细胞系786-O和ACHN中，微小RNA-1180（miR-1180）转染后，通过实时定量PCR和Westernblot等方法检测到p21mRNA和蛋白表达的变化，表明该转染在肾*细胞中有一定的效果1。在乳腺*细胞系T47D和非*性细胞MCF-10A中，研究比较了Lipofectamine2000和PAMAMG5两种转染试剂对短RNA的转染效率，结果显示Lipofectamine的转染效率明显高于PAMAMdendrimer2。检测方法：可以使用多种方法来检测转染效率，如荧光显微镜、流式细胞仪分析、实时定量PCR等。例如，在脂质体方法用于modRNA转染各种类型细胞的初步研究中，分别用RNAiMax及MessageMax将modGFP转染入MEF细胞，应用荧光显微镜、流式细胞分析仪检测并比较两种转染试剂的转染效率和蛋白表达效果5。悬浮细胞转染试剂现货由于CRISPR/Cas的发现，基因组编辑领域经历了一场变革。
阳离子树状大分子和阳离子脂质作为转染试剂结合机制：阳离子树状大分子如第五代聚酰胺酰胺树状大分子（PAMAMG5）和阳离子脂质如N-[1-(2,3-二醇油酰氧基)]-N,N,N-三甲基丙烷丙烷磺酸甲酯（DOTAP）作为转染试剂时，通过与小干扰RNA（siRNA）结合形成纳米复合物来实现转染1216。其结合过程涉及多种理化特性的相互作用，如原子力显微镜、凝胶电泳、siRNA结合和释放测定以及大小和ζ电势测量等方法可用于表征试剂-siRNA纳米复合物的理化特性。高摩尔比的DOTAP和低摩尔比的PAMAM可以比商业试剂相对更好地敲除OCT4转录，说明它们在结合RNA分子方面具有特定的优势。这种结合机制可能与它们的阳离子性质有关，能够与带负电的RNA分子通过静电相互作用结合。作用特点：在小鼠胚胎干细胞中进行评估发现，这些转染试剂对短核酸转染具有适当效率，从临床角度来看，有助于将短核酸分配到干细胞疗法中。
优化电转方法筛选**适电压和脉冲时间：不同细胞种类电转所需的**适电压和脉冲时间不同。例如，人成纤维细胞电转modRNA的**适电压为440V，**适脉冲时间为30ms；Hela、293T、3T3细胞电转**适电压分别为425V、400V、440V，**适脉冲时间均为30ms；人/兔外周血来源的悬浮的单个核细胞的**适电压分别为840V和860V，**适脉冲时间均为20ms。通过筛选**适电压和脉冲时间，可以提高RNA转染效率，同时证明了电转法转染modRNA进入细胞的可行性，且可同时将两种modRNA导入同一个细胞内6。RNA电穿孔高效转染原代淋巴细胞：使用体外转录的mRNA通过电穿孔可以实现高基因转染效率和低转染相关毒性。例如，在用GFP或mCD62L转染的受激原代人和鼠T淋巴细胞中观察到90％以上的转基因表达和80％以上的活细胞。GFPRNA对未刺激的人PBMC或鼠脾细胞进行电穿孔，分别产生95％和56％的GFP⁺细胞。此外，基因表达迅速且持久，对经过RNA电穿孔的T淋巴细胞未观察到不良影响7。是由非离子核酸与阳离子脂质体（CLs）表面结合，形成多层脂质-核酸复合物而形成的。
脂质体组成：脂质体的组成对转染效率有重要影响。不同的脂质体可能具有不同的电荷性质、大小和稳定性，这些因素都会影响脂质体与细胞的相互作用。阳离子脂质体通常具有较高的转染效率，因为它们可以与带负电荷的DNA结合，并通过静电作用与细胞表面结合。例如，Lipofectamine2000和Lipofectamine3000都是常用的阳离子脂质体，它们在不同类型的细胞中都表现出较高的转染效率11316。脂质体的组成还可能影响其在细胞内的释放和稳定性。一些脂质体可能更容易被细胞内的酶降解，从而降低转染效率。阳离子聚合物是一种非病毒载体。广西inhibtor转染试剂
转染试剂的冻融被认为是另一个可能影响转染效率的潜在因素。甘肃Lipo2000转染试剂
emlikiForestvirus相关细胞：利用基于SemlikiForestvirus的RNA和DNA向量研究非病毒细胞穿透肽递送载体PepFect6与阳离子脂质体Lipofectamine2000的转染效率，并评估它们对病毒复制的影响。结果表明，PepFect6***证明能够将大（13-19kbp）构建体转运穿过细胞膜。但使用PepFect6试剂递送的DNA分子被发现比使用Lipofectamine2000试剂递送的DNA分子晚约。***，虽然PepFect6和Lipofectamine2000试剂都可用于alphavirus研究，但PepFect6更受青睐，因为它不会引起正常细胞表型的变化，也不会影响先前转染细胞中病毒的正常复制***周期12。奶牛子宫内膜原代上皮细胞：应用带有FAM标记的miRNA-185mimics为报告基因，检测两种不同转染试剂（LipofectamineRNAiMAX与Lipofectamine2000）在细胞接种12、18、24h后的转染效率。结果显示，无论使用Lipofectamine2000还是LipofectamineRNAiMAX作为奶牛子宫内膜原代上皮细胞的转染试剂，各组间12h的转染效率均极***高于18、24h，18h的转染效率均极***高于24h；LipofectamineRNAiMAX各时间点的转染效率均极***高于Lipofectamine2000。使用LipofectamineRNAiMAX作为奶牛子宫内膜原代上皮细胞的转染试剂时，12h的荧光强度极***高于18、24h。 甘肃Lipo2000转染试剂
