电转染方式：机制概述：电转染是利用电场作用使细胞膜产生可逆性的通透性增加，从而使RNA分子能够进入细胞。在适当的电场条件下，细胞膜上会形成微孔，RNA分子通过这些微孔进入细胞。当电场消失后，细胞膜会逐渐恢复正常状态。在不同细胞类型中的表现：在人脂肪干细胞（hADSC）中，Optimization6电转方式转染hADSC的效率高于其他电转染方式（Optimization4）和脂质体转染试剂RNAiMAX。荧光显微镜观察及流式分析均表明电转染方式的蛋白表达优于RNAiMAX脂质体转染。这说明电转染方式在hADSC中能够更有效地将modRNA转染入细胞，并实现特定蛋白的表达10。鱼精蛋白相关转染试剂：机制概述：鱼精蛋白是一种天然阳离子肽混合物，可用于稳定和递送核酸，包括信使RNA（mRNA）等。当与RNA混合时，鱼精蛋白会自发地产生粒径在20-1000nm范围内的颗粒，这些颗粒可用于疫苗接种和免疫刺激。不同等级的鱼精蛋白在与mRNA形成复合物时表现出不同的转染能力，其转染机制可能与鱼精蛋白的来源等因素有关。在不同细胞类型中的表现：鱼精蛋白相关转染试剂在多种细胞类型中的具体表现目前文献中未详细提及，但研究表明不同来源的鱼精蛋白制剂在其组成和转染mRNA的能力上存在很大差异。常用的物理/机械转染方法包括电穿孔、声孔、基因显微注射和激光照射。广西转染试剂企业
脂质体转染是一种常用的将外源基因导入细胞的方法，脂质体大小：脂质体的大小也可能影响转染效率。较小的脂质体可能更容易进入细胞，但可能携带的 DNA 量较少。较大的脂质体可能携带更多的 DNA，但可能更难进入细胞。研究发现，阳离子脂质体的大小与转染效率之间存在一定的关系。随着脂质体尺寸的增加，转染的主要途径可能从网格蛋白介导的内吞作用转变为脂筏介导的内吞作用，同时也可能观察到巨胞饮作用。这种变化可能会影响脂质体在细胞内的运输和释放，从而影响转染效率。DNA转染试剂代做在转染中，DNA通常通过病毒或非病毒载体(如质粒)转运到宿主细胞中。
阳离子脂质体合成中常用的分子是中性脂质二油基磷脂酰乙醇胺(DOPE)。DOPE的作用是促进膜融合，并有助于质膜或核内体的不稳定。此外，由于阳离子脂质相互排斥，因此需要DOPE等辅助脂质来稳定阳离子脂质体（CLs）悬浮液，并抵消其他载体如聚乙烯亚胺(PEI)和树状大分子中存在的阴离子糖胺聚糖的抗转染作用。没有中性脂质的脂质体具有较低的转染率，尽管情况并非总是如此。不同的转染率可能是由用于配制脂质体的阳离子:中性脂质的不同比例引起的。如上所述，CLs介导的核酸转移的成功取决于许多因素，这些因素可能解释了脂质体(脂质体介导的转染)的内在变异性，特别是在体内。
考虑实验目的和应用场景不同的实验目的和应用场景可能需要不同类型的转染试剂。***应用：如果转染试剂用于基因***或药物研发等应用，那么需要选择具有良好生物相容性和安全性的试剂。在安全有效的递送mRNA使用改性PEI基脂质聚合物的研究中，探索了All-Fect和Leu-FectC作为新型转染试剂，这些试剂具有优异的生物相容性、高效的递送能力和强大的溶酶体逃逸能力，可直接增加mRNA稳定性并促进高效基因翻译，适用于基因***等应用4。基础研究：对于基础研究实验，可能更注重转染效率和实验的可重复性。在不同转染方式用于modRNA转染人脂肪干细胞的初步研究中，比较了不同转染方式的转染效率和蛋白表达情况，以及在体内促进血管再生的效果，为基础研究提供了参考10。综上所述，选择**适合的RNA转染试剂需要综合考虑转染效率、细胞毒性、RNA需求、血清兼容性、多因子转染能力以及实验目的和应用场景等多个因素。在选择转染试剂时，可以参考已有的研究文献，进行预实验以评估不同试剂的性能，并根据实验需求和条件选择**合适的转染试剂。RNA 转染试剂在不同实验环境下表现出不同的效果。
对基因表达的影响：在微小RNA-1180转染对肾*细胞生长的影响的研究中，肾*细胞分为两组：dsControl组和miR-1180组。实时定量（qRT）-PCR检测p21mRNA的表达变化，结果显示转染miR-1180后，786-O和ACHN细胞中p21mRNA水平分别上调（P〈）和（P〈），p21蛋白表达趋势与qRT-PCR结果相符，CDK4、CDK6和CyclinD1蛋白的表达明显下调。同时，流式细胞术（FCM）检测细胞周期变化显示细胞周期被阻滞在G0/G1期，MTS结果显示细胞活力明显降低，集落形成实验显示细胞增殖能力降低。结论是miR-1180能******肾*细胞中p21蛋白的表达，并抑制肾*细胞786-O和ACHN的生长1。在微小RNA-330-5p过表达对宫颈*细胞C33A中肿瘤坏死因子受体相关因子4（TRAF4）基因表达的抑制作用和对C33A细胞增殖的影响的实验中，通过Lipofectamine2000转染试剂分别向宫颈*细胞系C33A瞬时转染miR-330-5p模拟物（设为实验组）或者转染miR-NC（设为对照组），结果显示与对照组相比，实验组C33A细胞中TRAF4mRNA下降（p＜），TRAF4蛋白下降（p＜）。集落形成实验显示，实验组C33A细胞的增殖能力明显下降（p＜）。结论是miR-330-5p可通过降低宫颈*细胞C33A中TRAF4的表达抑制宫颈*细胞C33A的增殖。 脂质颗粒的加入导致内体DNA释放增加。河南青岛转染试剂
纳米颗粒可以参与内体途径，并可以通过细胞质将DNA运输到细胞核。广西转染试剂企业
二、影响因素的差异细胞接种密度：不同类型的细胞在比较好转染效率下的细胞接种密度不同。例如，宫颈*细胞Hela和Siha的比较好接种密度为每24孔板的每孔1.5×10⁴个细胞1，而研究中Caco-2细胞的比较好接种密度为2×10⁵9。DNA用量：各种细胞所需的DNA用量也存在差异。如PC12细胞转染的比较好DNA用量为2μg3，而Caco-2细胞转染时比较好DNA用量为4μg9。脂质体与DNA的比例：不同细胞类型对应的比较好脂质体与DNA的比例不同。Hela细胞中miRNA与脂质体比例为1:0.5，Siha细胞中为1:0.71；Caco-2细胞转染时比较好脂质体与DNA比例为2.5:19。复合物形成时间和孵育时间：不同细胞类型对脂质体-DNA复合物的形成时间和细胞与复合物的孵育时间要求不同。例如，Hela和Siha细胞未明确提及复合物形成时间和孵育时间，而Caco-2细胞的比较好脂质体-DNA复合物形成时间为30min，细胞与复合物孵育时间为6h9。广西转染试剂企业
