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  • 生物实验室数字ELISA灵活,数字ELISA
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数字ELISA基本参数
  • 品牌
  • 芯弃疾JX-8B
  • 产品名称
  • 数字ELISA
  • 用途
  • 应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒
  • 生产企业
  • 勃望初芯
  • 有效期
  • 12个月
  • 优势
  • 多重、超敏、微量、极速、灵活、开放
数字ELISA企业商机

芯弃疾JX-8B数字ELISA产品

每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

人类形式的蛋白质被加入到25%牛血清中以代替临床测试样本;通常使用四倍稀释因子以减少免疫测定中的基质效应4。使用数字ELISA检测25%血清中的PSA,从该实验中确定了LOD为~50aM(1.5fg/mL),相当于整个血清中的LOD为~200aM(6fg/mL)。检测到的比较低浓度为250aM,相当于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通过外推背景浓度来确定的加上背景的三个标准差,不同运行的LOD取决于背景的CV。在具有典型背景方差的几个实验中,全血清PSA的亚飞摩尔LOD得以保持。相比之下,一种前列的商业PSA检测方法(ADVIACentaur,西门子)报告在人血清中的LOD为3pM(0.1ng/mL),并且已经报道了LOD在10-30fM17,26。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,低成本单分子检测;生物实验室数字ELISA灵活

芯弃疾JX-8B数字ELISA产品参考simoa原理;Simoa技术(Single-moleculeArray,Quanterix公司)特点是通用阵列化检测,实现超高的灵敏度,较传统ELISA方法能够高出3个数量级,达到飞克级别(fg/ml)甚至更低。已拿阿兹海默症的两个FDAbreakthroughdevice;通常用于各种科研方向:神经因子、蛋白组学、细胞因子等。

以常见的IL-6指标为例,单指标灵敏度可达2-3fg/mL;3指标联检可达6-10fg/mL;文献表明,simoa方案的灵敏度、精密度、准确性均优于其他蛋白指标检测方案; 生物实验室数字ELISA灵活芯弃疾JX-8B单分子ELISA检测产品,少至可以进行8孔、4孔的灵活检测。

创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA

我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。

用DNA捕获探针(5‘-NH2/C12-GTTGTCAAGATGCTA)功能化的微球CCGTTCAGAG-3‘)是按照制造商的说明制备的。这些珠子与生物素化互补DNA的1μM(5’-生物素-CTCT)孵育。在含有0.5MNaCl和0.01%Tween-20的TE缓冲液中过夜(16h)孵育GAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘。孵育后,用PBS洗涤珠子三次含0.1%Tween-20的缓冲液。将珠子样品分装至微孔板中100μL中每孔给予400,000个微球。从微孔板孔中吸取缓冲液,将微球重悬后与不同浓度的ofSβG孵育。

芯弃疾JX-8B数字ELISA产品

每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

动力学上,对于200,000个微球分散在100μL中,珠子之间的平均距离约为80μm。大小为TNF-α和PSA(分别为17.3和30kDa)的蛋白质将在不到1min的时间内扩散80μm。表明,在2小时的孵育过程中,蛋白质分子的捕获不会受到限制动力学上。其次,必须有足够的珠子被加载到阵列上以限制泊松噪声。200,000个珠子加载到50,000孔阵列中,通常会导致20,000–30,000个微球被困在1mL孔中。对于典型的背景信号为1%活性微球(见下文),这种装载导致背景信号为200-300个活性微球检测到,对应于泊松噪声的可接受变异系数(CV)为6-7%。第三,过高的微球浓度可能导致:a)非特异性结合增加,降低信噪比;以及b)分析物与微球的比例过低,导致活性微球的比例过低,从而导致泊松噪声引起的高CV。这些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人第5页因素意味着每100μLoftest样品含有20万到100万颗珠子是比较好的数字ELISA。同时,为了获得可接受的背景信号(1%)和泊松噪声)。 芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,每个实验室都能用的单分子检测;

芯弃疾JX-8B数字ELISA产品

每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

由于活性珠子的百分比接近50%(酶与微球的比例大于~1:1.5),然而,使用图像分析软件区分“开启”和“关闭”孔变得具有挑战性,我们达到了数字动态范围的实际上限。例如,图2中7fM(~45%活性)的信号偏离了线性。因此,这里使用50,000个孔展示的数字线性动态范围是从3.5fM到350zM,即大约四个对数单位。前提是蛋白质使用适当的酶浓度进行标记,这种动态范围对于许多临床应用来说是足够的 6)数字化高敏ELISA芯片试剂盒,10ul样本可同时测2-4个指标;阵列单分子数字ELISA试剂开放

芯弃疾JX-8B数字ELISA, 极速检测,快15min能完成 的ELISA检测!生物实验室数字ELISA灵活

    芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测SiMoA通过将单个酶产生的荧光团限制在极小范围内,从而能够检测到非常低浓度的酶标记物体积(~50fL),导致荧光产物分子的局部高浓度。为了在免疫测定中实现这种定位,在第二步中,将珠子加载到一个阵列为离散的微升大小的孔(图1C)。本研究中使用的2毫米宽阵列有~50,000个孔,孔径为μm,孔深为μm。加载后的阵列在含有荧光酶底物液滴的情况下,用橡胶密封圈密封。Rissin等人,第3页将每个微球隔离在飞升反应室中。具有单一酶的微球标记的免疫复合物在50飞升的反应室中产生局部高浓度的荧光产物(图1D)。通过使用标准显微镜光学系统获取阵列的时间变化荧光图像,可以区分与单一酶分子相关的微球(“开启”孔)和不与酶相关的微球(“关闭”孔);补充图1显示了“开启”和“关闭”孔的荧光直方图。成像阵列可以成千上万的单个免疫复合物同时检测。通过测定供试品中的蛋白质浓度来确定计算含有珠子和荧光产物的孔数相对于含有珠子的孔数(图1D)。使用SiMoA,浓度是因此,我们称SiMoA应用于检测单个免疫复合物为数字ELISA。 生物实验室数字ELISA灵活

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