人类精子冷冻保存和储存：增加了冷冻样本的安全性、精液冷冻保存方案、快速液氮熏蒸冷冻、冷冻精液的解冻、玻璃化冷冻等内容，更具可操作性。本手册对人类精子的冷冻保存提出了具体建议：将样本分管分罐分开储存；对使用的材料和留存标本建立定期核验程序；所有储罐都应有液位监控报警系统，以监测温度和液氮液位，传感器应连接警报器，可通过实验室人员的终端进行提醒。新证据表明，玻璃化冷冻是冷冻保存精液的一种有价值的方法。该方法的原理是将小体积样本与无污染液氮直接接触并快速冷冻，可以防止冰晶的形成，并减少精子的渗透性损伤。在麦管玻璃化冷冻(无菌玻璃化冷冻)中，也可以使用封闭系统，不需要无菌的液氮。Hamilton Thorne精子分析仪的操作简单易懂，用户无需具备专业知识也能够轻松上手使用。香港狗精子分析精子动力分析
定量测定是医学发展的重要保证。WHO1980年出版了男科实验室手册***版及以后版本［1］对有关男科的实验进行了详细的阐述。对计算机辅助精子分析进行质量管理包括：计算机本身的软硬件、CASA分析结果、工作人员的具体操作几方面。CASA参数包括精子数量和各种活动力变量其质量包括所测得数据的可靠性、精确度、如何避免差错和数据的正确性及确认以及分析中的标准［2］。
CASA质量管理关系到男科实验室中**分析的质量具有以下特点：⑴在实验室内部质量和医生处置质量方面优于其它测定精子运动的方法；⑵CASA结果及结果质量的评估较困难；⑶WHO标准是医生处置质量保证的基础；⑷今后应加强操作人员的培训。 人精子分析W.H.O 5所有操作人员都应接受规范的CASA分析仪使用培训，严格按照使用指南进行操作。
精液检查前有什么注意事项？
一、留精液前，病人应停止**4～7天。检查前1周不能用丙酸睾丸酮、**睾丸酮、苯丙酸诺龙。采取精液时，可用软皂或石蜡油做**按摩，将标本收集在无菌的试管中；也可用避孕套（冲洗干净，不含杀精子药物）或采用**中断法收集精液，但这样收集的量往往不多。如用上述方法采不到精液，可经直肠内按摩精囊及输精管末端、压迫采尿，检查沉渣中有无精子。不要将精液暴露在过热和过冷的环境中。及时交给医生备查，不得超过30分钟。冷天要注意保暖，送检时可放在内衣口袋里保温。
二、如果要进行细菌培养，应先冲洗、消毒尿道口，再将精液收集在无菌试管中。夫妻同居3年以上，没有采取任何避孕措施而未能受孕的称不孕症。如果是不孕症，在双方未进行检查前，不能盲目怀疑某一方，更不能认为不孕的原因是女方。妊娠是夫妻双方的事。实现受孕，男方的精液含量应正常，形态和动力也应正常。女方能正常排卵，精子和卵子能结合成受精卵，这种受精卵能在子宫内膜种植。上述的几个环节中的某一个环节发生障碍，都可引起不孕。
三、如果上述检查结果精液是正常的，女方也应去医院检查，包括全身情况、生殖***、卵巢排卵功能、输卵管通畅否、免疫检查。
精液显微镜检查
(1)精子存活率：排精后30～60分钟，正常精子存活率应为80%～90%，精子存活率降低是导致不育的重要原因。(2)精子活动力：指精子活动状态，也是指活动精子的质量。世界卫生组织(WHO)推荐将精子活动力分为4级：①精子活动好，运动迅速，活泼有力，直线向前运动；②精子活动较好，运动速度尚可，游动方向不定，呈直线或非直线运动，带有回旋；③精子运动不良，运动迟缓，原地打转或抖动，向前运动能力差；④死精子，精子完全不活动。正常精子活动力应在③级以上，若＞40%的精子活动不良(③、④)级，常是导致男性不育的重要原因。精子活动力低，主要见于精索静脉曲张、泌尿生殖系统非特异性***，应用某些药物如抗疟药、雄***等所致。 传统的CASA系统仍使用传统阈值图像处理方法，准确率有待提高。
CASA可将每个精子的活力按以下分级：（1）前向运动型（PR）：精子运动活跃、线性运动或者在较大的范围内运动。（2）非前向运动型（NP）：所有其他非前向运动的形式，如精子在较小的范围内运动，精子头部轻微移位或只观察到尾部摆动。（3）完全不动型（IM）：精子完全不动。CASA系统检测的这些参数有一套标准的术语。（1）VCL=曲线速度（mm/s）。精子头沿其实际的曲线，即在显微镜下见到的二维方式运动轨迹的平均速度。检测细胞活力。（2）VSL=直线速度（mm/s）。根据精子头在开始检测时的位置与***所处位置之间的直线运动的时间平均速度。（3）VAP=平均路径速度（mm/s）。精子头沿其空间平均轨迹移动的时间平均速度。（4）ALH=精子头侧摆幅度（mm）。精子头沿其空间平均轨迹侧摆的幅度。以侧摆的最大值或平均数值表示。（5）LIN=直线性。曲线轨迹的直线性。即VSL/VCL。（6）WOB=摆动性。精子头沿其实际轨迹的空间平均路径摆动的尺度。即VAP/VCL。（7）STR=前向性。空间平均路径的直线性。即VSL/VAP。（8）BCF=鞭打频率（Hz）。精子曲线轨迹越过其平均路径轨迹的时间平均速率。（9）MAD=平均移动角度（度）。精子头沿其曲线轨迹瞬间转折角度的时间平均***值。男性精液检测主要依赖计算机辅助精子分析仪(computer assistant semen analyses，CASA)。香港马精子分析DSL
WHO第6版明确提出：使用CASA系统须遵循适当的程序步骤，才能获得可靠和可重复的结果。香港狗精子分析精子动力分析
精子手工计数原理及操作方法
1.原理：将精液用适当的稀释液作一定量稀释后，混匀注入计数池内计数，再算出每毫升精液中精子数。2.方法（按照***版第四版《全国临床检验操作规程》）1).于小试管内加精子稀释液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀释液内混匀。2).充分摇匀后,滴入改良Neubauer计数板的计数池内,静置1~2分钟,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。
3.计算1).如每个**中方格内精子少于10个,应计数所有25个中方格内的精子数。2).如每个**中方格内精子在10~40个,应计10个中方格内的精子数。3).如每个**中方格内精子多于40个,应计数5个中方格内的精子数。公式：精子数=计数结果/计数中方格×25×1/计数池高度×20×103/ml=计数结果/计数中方格×1/计数池高度×5×103/ml 香港狗精子分析精子动力分析
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