美国Hamilton Thorne的TOX IVOS精子分析仪已经被FDA和国内外毒理学实验室所使用。本试验研究目的对精子分析仪和血细胞计数板在大鼠附睾精子计数结果的比较验证。方法选取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,对三批次雄鼠的精子计数进行比较。健康雄鼠通过戊巴比妥钠麻醉实施安乐死后,取左侧附睾尾称重,将附睾尾部放入37℃预热的含有M199培养液平皿中,剪碎附睾尾,放入培养箱中37℃孵育5 min,然后吸取1份精子悬液,用M199培养液进行一定倍数的稀释,混匀后,取1滴稀释液,滴入精子分析仪**载玻片上,将载玻片放入TOX IVOS精子分析仪载物台,进行精子计数,同时吸取稀释后的精子悬液滴入血细胞计数板内,通过光学显微镜进行计数,比较两种计数方法的差异性。结果***批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为165.9±91.7,140.0±59.6。三个批次的精子分析仪和血细胞计数板的精子计数结果无统计学差异(P>0.05)。结论精子分析仪是一种方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理学研究中具有重要的应用价值。该设备的设计紧凑,占用空间小,适合不同规模的实验室使用。人精子分析W.H.O 6
精子分析仪使用方法
仪器的使用方法因型号、厂家差异不尽相同,操作人员上岗前必须经过严格培训,了解工作原理、操作规程、校正方法等,使用前必须仔细阅读说明书。一般仪器都会经历如下操作步骤 [1]:开机接通电源,打开计算机辅助**分析系统。1.输入患者信息及**理学检查结果。2.加样取液化的**1滴,滴入精子计数板的计数池中,置显微镜操作平台上,点击“活动显示”菜单,调节好显微镜焦距,显示器上即可显示待测标本的精子运动图像。3.分析点击“计算分析”菜单,系统进入自动分析状态,图像显示区出现精子分割图像并进行分析。4.打印报告分析结束后,可根据需要打印出分析结果。 上海马精子分析WHO第6版明确提出:使用CASA系统须遵循适当的程序步骤,才能获得可靠和可重复的结果。
精子计数是在显微镜下计算一次排出的精液中精子的数量将精子计数值乘以精液量就可得出一次**的量。
精液液化后将样本按一定比例稀释和固定后,滴于血细胞计数板上,在显微镜下计数红细胞计数区内的所有精子数并换算为每m1内所含精子数。此外还可用电子细胞计数仪经调整阈值设置后计数精子数量。
将已经液化的精液标本均匀混合,用白细胞计数吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀释液至11刻度,振荡三分钟,然后置于血球计数板内,计数二大格(每格面积1平方毫米)之精子数,在尾数后加5个“0”即得每毫升精液内精子数。例如计数为1280个,则每毫升精子应为128,000,000。精液稀释液之配制:重碳酸钠5克、福尔马林1毫升、蒸馏水加至100毫升。稀释液内重碳酸钠有消化粘液的作用,福尔马林有使精子制动的作用。如精液之稠度过高而不易吸取时,可以精液1毫升混匀于稀释液19毫升内,稀释后进行计数。如精子的数目极少,亦可改为稀释10倍计数。每次排精75%的精子是从附睾尾部所贮存的,还有25%是由输精管道的其他部分来的,因此单凭一次排精的精子计数来衡量睾丸生精机能是不***的。只有在排精后间隔4-5天以后多次精液检查,才能比较正确地从这些精子计数来反映睾丸的生精机能。
[临床意义]1. 若数日未**、且精液量少于1.5ml者为不正常,说明精囊或前列腺有病变;若精液量减至数滴,甚至排不出,称为无精液症,见于生殖系统的特异性***,如结核、淋病和非特异性炎症等。2.若精液量过多(一次超过8ml),则精子被稀释而相应减少,有碍生育。二、颜色检查[正常参考值]灰白或乳白色,久未**者可呈浅黄色。[临床意义]1.黄色或棕色脓样精液:见于精囊炎或前列腺炎等。2.鲜红或暗红色血性精液:见于生殖系统的炎症、结核和**等。三、粘稠度和液化检查[正常参考值]粘稠胶冻状,30分钟内自行液化。[临床意义]1.精液粘稠度低,似米汤样,可因精子量减少所致,见于生殖系统炎症。??2.液化时间过长或不液化,可抑制精子活动而影响生育,常见于前列腺炎症等。四、精子活动率检测[正常参考值]正常精子活力一般在Ⅲ级(活动较好,有中速运动,但波形运动的较多)以上,**后1小时内有Ⅲ级以上活动能力的精于应>0.60。[临床意义]如果0级(死精子,无活动能力,加温后仍不活动)和Ⅰ级(活动不良,精子原地旋转、摆动或抖动,运动迟缓)精子在0.40以上,常为男性不育症的重要原因之一。CASA系统操作简便,检测速度快,且重复性优于人工检测。
精液显微镜检查
(1)精子存活率:排精后30~60分钟,正常精子存活率应为80%~90%,精子存活率降低是导致不育的重要原因。(2)精子活动力:指精子活动状态,也是指活动精子的质量。世界卫生组织(WHO)推荐将精子活动力分为4级:①精子活动好,运动迅速,活泼有力,直线向前运动;②精子活动较好,运动速度尚可,游动方向不定,呈直线或非直线运动,带有回旋;③精子运动不良,运动迟缓,原地打转或抖动,向前运动能力差;④死精子,精子完全不活动。正常精子活动力应在③级以上,若>40%的精子活动不良(③、④)级,常是导致男性不育的重要原因。精子活动力低,主要见于精索静脉曲张、泌尿生殖系统非特异性***,应用某些药物如抗疟药、雄***等所致。 Hamilton Thorne精子分析仪采用先进的光学成像,能够实时分析精子的动力学参数,提供有效的精子质量评估。美国鱼精子分析DSL
精子分析仪节省时间,提高实验室的工作效率,让医生和科研人员更快速地获取实验分析结果。人精子分析W.H.O 6
精子检测是通过一系列检测方法来评估男性生育能力的指标之一。而检测方法的选择直接影响到检测的准确性和结果的可靠性。目前,常用的检测方法有手动计数法、显微镜计数法、电子显微镜计数法、精子运动轨迹分析法等。手动计数法是通过显微镜手动计算精液中精子数量的方法,该方法简单易行,但因操作者技能不同,容易出现误差。显微镜计数法是通过显微镜观察精液中精子数量的方法,该方法比手动计数法更加准确,但需要专业的技能和经验。电子显微镜计数法是通过电子显微镜观察精液中精子数量的方法,该方法非常准确,但需要昂贵的设备。精子运动轨迹分析法是通过计算机分析精子运动轨迹来判断精子活力和数量的方法,该方法不仅准确性,而且可以直观地显示精子的运动状态,但需要较为复杂的技术。除了以上常见的检测方法,还有一些新兴的检测方法,如流式细胞术、全自动分析系统等。这些检测方法虽然在检测精子数量、活力等方面具有一定优势,但由于技术上的限制和设备的昂贵,目前还没有得到广泛应用。在选择检测方法时,需要考虑检测的目的、检测的准确性和结果的可靠性等因素。同时,需要选择正规的医疗机构进行检测,避免因设备不足或技术不过关等因素导致检测结果出现误差。人精子分析W.H.O 6
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