将小鼠进行呼吸诱导麻醉(异氟烷)后,以仰卧位固定于操作台上,继续维持麻醉,常规消毒,备皮,取颈部正中切口,分离右侧颈部总动脉(CCA)、劲内动脉(ICA)和颈外动脉(ECA),结扎ECA远心端,在ECA起始端留置结扎线,用动脉夹将ICA远心端、CCA近心端夹闭。在ECA远心端结扎线外离断,将ECA拉至与ICA成一条直线,于结扎线近端用显微剪剪一斜口,将MACO栓线缓缓送入,栓线通过ECA近心端结扎线进入ICA后,单道结扎ECA近心端结扎线,使栓线与血管相对固定,随即松开ICA上的动脉夹,缓慢上提ECA近心端结扎线,将栓线缓慢送入,进线至线栓刻度位置。 缺血后再灌注:栓线插入40 min后拔出,随后将ECA近心端结扎线结扎,松开CCA近心端动脉夹,碘伏消毒后逐层缝合切口。脑卒中具有高发病率和高死亡率,严重危害人体健康,一直是人们关心的热点疾病。南京大鼠脑梗MCAO模型周期短
造模方法 颈部备皮常规消毒,取颈正中切口剪开皮肤,分离皮肤下软组织并暴露颈动脉鞘; 游离出颈总动脉1.5cm,穿线备用; 向远心端找到颈外侧动脉,游离涌现结扎,提起颈总备用线,在近心端,远心端用动脉夹夹住; 在近心端动脉夹处,用5mL注射器针头刺破血管,稍微提起动脉夹,用镊子夹住线栓,从小口插入动脉后,去掉远心端动脉夹,然后用镊子夹住线栓,线栓插入到颈内距分叉处1.8-2.0cm; 用备用线将颈总和线栓一起结扎住,*好是结扎双道,记录线栓插入时间,在将动脉夹另一边近心端颈总结扎住,去掉动脉夹; 注意缝合时不要将线栓带出,*后根据评分来判断成模性。 线栓法是国内外*常用的制作脑局部缺血再灌注损伤的方法。Koizumi 于 1986 年首先报道了用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,此后 Longa等对该方法进行了改良。线栓法脑缺血模型的研究已经取得很多突破和进展,但模型制备的稳定性受很多因素的影响,如小鼠体质量、线栓的选择等。小鼠缺血再灌注损伤后脑梗死体积百分比的变化可以为研究治*脑卒中药物时间窗提供基础依据,对进一步深入研究大鼠缺血再灌注损伤模型有重要的意义。北京动物实验脑梗MCAO模型实验外包实验外包团队他们可以帮助科研人员制定实验方案、优化实验流程、提高实验效率等。
检测方法 造模完成后等待大鼠苏醒,依据Zea longa 5分制标准筛选出2分或3分的脑缺血模型进入后续实验。0分:无神经功能缺损症状,活动正常;1分:不能伸展对侧前爪;2分:爬行时出现向左转圈;3分:行走时身体向偏瘫侧倾倒;4分:不能自发行走,意识丧失。行为学指标目前常采用跳台法、避暗法、穿梭箱法来测定动物一次性被动回避反射能力 ; Y 形水迷宫实验、Morris水迷宫实验等测定动物空间分辨学习记忆能力。研究血管性痴呆、脑卒中抑郁症等可以选择旷场试验作为行为学检测指标之一。病理检测常用HE染色观察组织水肿炎症反应等,尼氏染色可以反应神经元细胞情况。
在成功建立小鼠脑梗模型后,认知功能的检测可以通过以下方法进行: 1. 迷宫测试:这是一个常用的方法,通过让小鼠在迷宫中寻找食物,观察其寻找食物的速度和正确性,来评估其认知功能。 2. 物体识别测试:给小鼠展示两个相似的物体,观察其是否能够正确识别并记住这两个物体。 3. 社交互动测试:观察小鼠与其他小鼠的互动情况,包括是否能够正确识别其他小鼠,以及是否能够进行正常的社交行为。 这些测试可以帮助评估小鼠的认知功能,从而了解脑梗对其认知功能的影响。小鼠脑梗MCAO的构建 —艾菱菲生物整体外包一站式科研需求。
脑缺血是指由脑内血流量突然减少或代谢速率速增所致脑血流无法满足正常代谢需求的病理状态,可导致脑损伤。数据显示,脑缺血性疾病约占所有脑血管疾病的80%。根据缺血区域可分为局灶性和全脑性缺血,根据病因可分为血栓型、栓塞型和低灌注型。阻塞大脑中动脉(MCA)及其分支的技术*接近该疾病临床病理表现,大脑中动脉是其在人类缺血性中风中*常受到影响的大脑血管。在闭塞性MCA中风模型中,使用*广*的模型通过短暂或永jiu性大脑中动脉栓塞(MCAO)在顶叶皮层和纹状体中产生局灶性*变。MCAO模型的诱导包括暂时闭塞颈总动脉(CCA),将缝合线引入颈内动脉(ICA)或经横断的颈外动脉(ECA),并收紧缝合线直到其中断向MCA的血液供应。 当阻断血管达到120 min或更长时间时,会影响下丘脑的供血,导致自发性高热,影响实验结果。南京大小鼠脑梗MCAO模型水迷宫
MCAO是目前*广为接受一种药效模型。南京大鼠脑梗MCAO模型周期短
缺血性卒中的病理生理及药物治*缺血性卒中主要诱发神经血管单元(NVU)一系列的缺血级联反应(包括兴奋性氨基酸毒性,氧(氮)化应激和缺血后炎症等),从而造成神经细胞受损甚至部分死亡细胞凋亡,*终诱发大脑功能的异常。NVU是由神经元,神经胶质细胞,血管细胞(内皮细胞、周细胞、平滑肌细胞)以及基底膜共同构成,这些细胞相互作用,共同调节营养物质在细胞间质间的流动和脑血流,维持和修复髓鞘,清*代谢产物,从而实现和维持大脑的正常功能。在缺血发生时,NVU的各部分细胞发生不同程度的损伤,诱发神经元细胞的生理生化异常。部分凋亡细胞会进展为梗死灶,而梗死灶周围受损的神经细胞虽然出现了生理生化异常和功能障碍,但尚未死亡,及时低灌注可能可以改善其损伤状况使之恢复正常。这部分及时抢救仍然可以改善其功能的神经细胞一般被称为“缺血半暗带”。南京大鼠脑梗MCAO模型周期短