大脑中动脉闭塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)是缺血性脑血管病的重要类型,是颅内动脉粥***的晚期。部分患者在疾病进展过程中可能形成间接代偿,但如果代偿不足,则可能发生短暂性脑缺血发作(TIA),甚至脑卒中。在患有脑卒中的人群中,大概有三分之一的患者会发生死亡,脑卒中的高致死率与其复杂的发病机制密切相关据统计,我国己逐渐成为脑卒中的多发国家,且新发脑卒中患者有逐年增加的趋势。脑卒中己成为严重威胁人类健康的疾病,不仅给国家和家庭造成了沉重的经济负担还给患者带来严重的心理负担和劳动能力的丧失。注意缝合时不要将线栓带出,*后根据评分来判断成模性。脑局部缺血再灌注损伤脑梗MCAO模型Y迷宫
造模方法 颈部备皮常规消毒,取颈正中切口剪开皮肤,分离皮肤下软组织并暴露颈动脉鞘; 游离出颈总动脉1.5cm,穿线备用; 向远心端找到颈外侧动脉,游离涌现结扎,提起颈总备用线,在近心端,远心端用动脉夹夹住; 在近心端动脉夹处,用5mL注射器针头刺破血管,稍微提起动脉夹,用镊子夹住线栓,从小口插入动脉后,去掉远心端动脉夹,然后用镊子夹住线栓,线栓插入到颈内距分叉处1.8-2.0cm; 用备用线将颈总和线栓一起结扎住,*好是结扎双道,记录线栓插入时间,在将动脉夹另一边近心端颈总结扎住,去掉动脉夹; 注意缝合时不要将线栓带出,*后根据评分来判断成模性。 线栓法是国内外*常用的制作脑局部缺血再灌注损伤的方法。Koizumi 于 1986 年首先报道了用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,此后 Longa等对该方法进行了改良。线栓法脑缺血模型的研究已经取得很多突破和进展,但模型制备的稳定性受很多因素的影响,如小鼠体质量、线栓的选择等。小鼠缺血再灌注损伤后脑梗死体积百分比的变化可以为研究治*脑卒中药物时间窗提供基础依据,对进一步深入研究大鼠缺血再灌注损伤模型有重要的意义。脑局部缺血再灌注损伤脑梗MCAO模型Y迷宫采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价。
局灶性缺血模型/线栓法引起的大脑中动脉栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)由于大(小)鼠脑血管解剖结构与人类相似,大脑中动脉也是临床缺血性卒中的高发部位,同时,采用线栓法也便于观察缺血和再灌注、永jiu(持续)和短暂性损伤等多种状态,在评价药物量效关系和确认治*时间窗等方面有一定优势,因此,MCAO是目前*广为接受一种药效模型。将尼龙线由大(小)鼠的颈外动脉(ECA)插入,经颈内动脉(ECA)阻断一侧MCA起始端,导致一侧(局灶性)脑缺血。术后再使用激光散斑血流仪或多普勒血流仪对造模效果进行验证和确认。
通过神经功能缺损评分,研究人员可以定量地评估脑梗死后对动物神经功能的影响。这对于研究脑梗死的病理过程、治*方法以及药物效果具有重要的意义。同时,这种评分方法也可以为临床医生提供参考,帮助他们更好地评估患者的神经功能缺损程度。 需要注意的是,神经功能缺损评分只是一种评估方法,不能完全戴*动物的神经功能状态。因此,在实验中还需要结合其他指标和方法进行综合评估。此外,由于实验动物的个体差异和环境因素的影响,实验结果也可能存在一定的误差。因此,在进行实验研究时需要严格控制实验条件和操作过程,以保证实验结果的准确性和可靠性。脑缺血是指由脑内血流量突然减少或代谢速率速增所致脑血流无法满足正常代谢需求的病理状态,可导致脑损伤。
动物疾病模型的标准化和规范化非常重要,因为这可以确保研究结果的可重复性和可比性,从而提高研究的科学性和可信度。首先,标准化和规范化可以确保研究中使用的动物疾病模型具有一致的特征和表现,这有助于减少实验误差和结果的不确定性。例如,如果使用不同品系的小鼠来建立同一种疾病模型,那么由于它们的基因组和表型差异,可能会导致实验结果的差异,从而影响研究的可靠性。其次,标准化和规范化可以确保研究中使用的动物疾病模型符合伦理和法律要求,从而保护动物的福利和权益。例如,对于使用动物进行研究的实验室,需要遵守相关的伦理和法律规定,包括动物福利法和实验动物管理规定等。标准化和规范化可以确保实验室符合这些规定,从而保证动物的福利和权益得到保护。除此之外,标准化和规范化可以促进研究结果的共享和交流,从而加速科学研究的进展。如果研究中使用的动物疾病模型没有标准化和规范化,那么其他研究人员可能无法重复这些实验或者比较不同实验之间的结果,从而影响科学研究的进展。综上所述,动物疾病模型的标准化和规范化对于确保研究结果的可重复性和可比性、保护动物的福利和权益以及促进科学研究的进展都非常重要。在实验中,研究人员会观察动物的行为表现,例如运动协调能力、平衡能力等,以评估神经功能缺损的程度。脑局部缺血再灌注损伤脑梗MCAO模型Y迷宫
在实验过程中,应建立严格的质量控制体系,包括实验操作规范、数据记录和分析等环节。脑局部缺血再灌注损伤脑梗MCAO模型Y迷宫
采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价,0分:无神经功能缺损症状;1分:出现左侧 Honer征,轻度神经功能缺损;2分:提尾对侧前肢内旋,肩内收,中度神经功能缺损;3分:向对侧转圈、向对侧倾倒,重度神经功能缺损;4分:不能自发行走,部分意识丧失。鼠侧倾倒,评分为3分。 沿脑桥上界面切断,去除嗅球,称全脑重,立即放入-20℃冰箱, 20 min 后取出,由前向后做连续冠状切片(切片厚度2 mm)。将脑切片置入0.1% TTC溶液中,后放入恒温振荡器中,37℃避光染色30 min,将脑切片取出后放入固定液中固定 24 h,取出脑片,相机拍照,用 Motic Images Plus 显微图像分析系统计算脑梗死面积和梗死体积。脑局部缺血再灌注损伤脑梗MCAO模型Y迷宫