病理实验外包,南京英瀚斯可开展冰冻切片免疫荧光染色1. 冰冻切片室温晾干15 min,可用含10%正常山羊血清的PBS室温封闭切片1小时(此步可不洗)。2. 滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液(抗体的量视组织大小而定,原则是可以均匀覆盖组织面,且保证整个过程中不会使组织干涸)。3. 将切片放在加了PBS的免疫组化湿盒,室温孵育2小时或4℃过夜。4. 第二天先将湿盒放到37℃回温1 h,然后吸取片上的一抗进行回收,将切片插入到小染缸PBS冲洗。5. 滴加用PBS稀释好的二抗(避光)置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗,切片置于染缸内,PBS洗5 min×3次。6. 滴加DAPI工作液染核,室温10~20 min(工作浓度0.1%染色15 min)。7. 回收DAPI,滴加5-10 μl 抗荧光衰减封片剂或中性树胶,用处理干净的盖玻片封片,即可到荧光显微镜或者共聚焦显微镜下观察拍照。8. 做好的片放在切片盒内,置于4℃冰箱,可保存一周左右。病理实验外包检测,实验经验丰富,认真负责,方便高效。上海比较好的病理实验外包
病理实验外包,病理染色切片常见问题及解决方法:1.切片粘在切片刀不易取下●原因:切片时有静电作用,产生静电吸引,在冬季或气候干燥时常出现这种情况。●解决方法:可用加湿器。以增加空气中的水分,而减少静电作用。2.切片厚薄不均●原因:①切片微动部分失灵,齿轮跳格。②蜡块太大,过硬,转动时刀刃受震动。●解决方法:①修理切片机失灵的部分,调整螺旋。加机油润滑零件,必要时需请专业技术人员调整切片机。②如蜡块过大,以后取材时注意取材的大小。蜡块组织过硬,可返回水中浸泡,再重新脱水和包埋。江西生物病理实验外包推荐病理实验外包的条件,南京英瀚斯。
病理实验外包,病理染色冰冻切片介绍;冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂,将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程,明显缩短了制片时间。同时,由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等步骤,因而较适合于脂肪、神经组织和一些组织化学的制片,并作为快速切片的方法应用在临床诊断。一、取材应尽可能快地采取新鲜的材料,防止组织发生死后变化。二、速冻1.将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内(直径约2cm)。2.如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织,然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。3.当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮中,大约10~20s组织即迅速冰结成块。4在制成冻块后,即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。5.若需要保存,应快速以铝箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱贮存备用。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。
1.取材与固定固定剂同时具有硬化细胞组织的作用,使制片便于进行。2.洗涤与脱水洗涤是把深入组织中的固定剂洗去,防止染色中的结晶产生,驱除组织中的水分,利于透明和浸蜡。3.透明与浸蜡(透蜡)脱水后的组织中水分已被透明剂所代替,而有利于浸蜡。浸蜡的目的是使组织有一定的硬度而有利于切片和细胞组织保持一定的生活时状态。4.包埋与切片用石蜡和其他包埋剂(组织填充剂作包埋剂)包绕一定的形状以便于切片。将包埋好的组织块用切片机切成一定的厚度(厚度以um计)。5.贴片(展片、捞片)和染色将已且妥的切片在温水中展平整后用载玻片贴上,稍晾干后再烤片。染色可使细胞和组织被染上不同的颜色而产生一定的折射率,便于显微镜观察。6.切片染色后用胶类物质将其封固,便于长期保存。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包研究整体解决方案_英瀚斯生物。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍扫描电镜检测:扫描电子显微镜的制造是依据电子与物质的相互作用。当一束高能的人射电子轰击物质表面时,被激发的区域将产生二次电子、俄歇电子、特征x射线和连续谱X射线、背散射电子、透射电子,以及在可见、紫外、红外光区域产生的电磁辐射。同时,也可产生电子-空穴对、晶格振动 (声子)、电子振荡 (等离子体)。原则上讲,利用电子和物质的相互作用,可以获取被测样品本身的各种物理、化学性质的信息,如形貌、组成、晶体结构、电子结构和内部电场或磁场等等。扫描电子显微镜 (scanning electron microscope, SEM) 是一种用于高分辨率微区形貌分析的大型精密仪器。具有景深大、分辨率高, 成像直观、立体感强、放大倍数范围宽以及待测样品可在三维空间内进行旋转和倾斜等特点。另外具有可测样品种类丰富, 几乎不损伤和污染原始样品以及可同时获得形貌、结构、成分和结晶学信息等优点。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包,靠谱的染色服务,快速高效实验。上海比较好的病理实验外包
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病理实验外包,病理染色常见染色介绍TTC染色:TTC染色是TTC和活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶反应,生成红色的甲月赞,用来表示细胞的活力。配制多为2%,染色要避光,37度条件下,它是评价脑缺血损伤常用的指标。TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感复合物,1894年初次合成用来检测种子的生存能力,1958年开始用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。TTC可以被活细胞中的具有还原活性的酶(好像主要是琥珀酸脱氢酶)还原生成粉红色的还原产物,所以活组织部分呈现粉红色,而死亡的细胞的还原酶的活力已经消失,因此TTC不能被还原,所以死亡的组织呈现白色。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。上海比较好的病理实验外包