鼠尾胶原:含细胞三维胶原凝胶的制备(以配制1mg/mL三维胶1mL为例)准备好悬浮于培养液的细胞,并放置于冰浴中。将200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23μL10×PBS或10×培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要测定pH值)。加入760μL的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。本品在室温下pH中性时可迅速成胶,在操作过程中要尽量保持低温。保存条件4℃保存,切勿冻存,有效期一年。在操作过程中要尽量保持低温。保存条件4℃保存,切勿冻存,有效期一年。南京正规鼠尾胶原直销厂家
鼠尾胶原蛋白的用途是什么:在工业应用方面,鼠尾胶原蛋白用于培养容器等实验室设备的内部涂层。设备上的胶原蛋白薄层通常被允许干燥。它还可以用来制造一种凝胶,可当作悬浮细胞的培养基。此外,还可以把它当胶水使用。在化妆品行业,鼠尾胶原蛋白可当作沐浴液和肥皂中的凝胶。它还用于生产能减少皱纹和改善皮肤质量的面霜或护肤霜。不过,用于抚纹,或使嘴唇显得更大更饱满的注射用胶原蛋白通常是从牛或猪提取。不过,用于抚纹,或使嘴唇显得更大更饱满的注射用胶原蛋白通常是从牛或猪提取。南京正规鼠尾胶原产品介绍加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。
鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:三维胶原的制备 鼠尾胶原蛋白 型在浓度1mg/ml 以上, pH 左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度 1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中,在成胶过程中需要加入 0.06体积的 0.1mol/L NaOH 来中和。 需要的溶液 (均需要无菌、 预冷) 10mg/L 酚红用于pH 指示) 0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一 般不用),双蒸水 200ul鼠尾胶原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中,加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到胶原溶液中, 会由于 NaOH 不能迅速混匀而产生局部的 胶原凝结) 立即混匀。再加入 100ul 10PBS 10培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后 pH 左右,如果PBS 或培养液中没有加 酚红,初次使用时需要用 pH 试纸测试)。
实验应用:探讨应用鼠尾胶原在豚鼠前庭毛细胞膜片钳实验中的促进毛细胞贴壁效果。方法制作鼠尾胶原,观察全细胞膜片钳实验中,自制的鼠尾胶原对前庭毛细胞的贴壁黏附作用。结果无鼠尾胶原时,前庭毛细胞悬浮于外液,不宜封接;有鼠尾胶原时,前庭毛细胞贴附于培养皿底壁,易于封接和长时间(约8h)的观察和记录。鼠尾胶原对前庭毛细胞具有良好的贴壁黏附促进作用。结论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三个月以上的时间。
鼠尾胶原蛋白的获取也相当“讲究”,首先要以无毒方法捕到家鼠。取尾长20cm以上者,齐尾根部切下尾巴,洗净后浸于75%酒精中。在无菌操作下剥去鼠尾皮肤,即可见附于鼠尾骨上的4束韧带。每束韧带中,位于外面及近骨一面的为白色纤维,较光洁,微发亮。纤维之间为易碎裂的间质。而剥去下来的“纤维”,就放置在嘉兴眼库中,以供需要时及时提取。让小小的老鼠尾巴发挥其神奇的作用,以医学人严谨、踏实、不断进取的医学态度,让鼠尾胶原蛋白帮助更多的人,恢复角膜的光明,重现光明的世界。一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法,采用酸法与酶法相结合的工艺。南京正规鼠尾胶原产品介绍
制备鼠尾胶原:将尾腱剪断置于平皿中,生理盐水浸泡。南京正规鼠尾胶原直销厂家
一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法,其特征在于,包括以下步骤: 1.用0.03?0.06mol/L的柠檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,调节pH = 6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中,不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出,4°C沉淀10小时,去除上清液,去除上清液,絮状溶液高速冷冻离心处理,收集沉淀; 2.用0.03?0.06mol/L的柠檬酸再次溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,冰水浴中,调节PH = 6.5 ;溶液依次通过阳离子交换树脂、阴离子交换树脂进行脱盐处理;3.将脱盐后的胶原蛋白溶液,-40至-20°C预冻2?4小时,然后真空冷冻干燥,冻干产品经进一步处理得到含水率在3%以下的胶原蛋白微粉,灭菌、包装,得到成品胶原蛋白粉末。南京正规鼠尾胶原直销厂家
鼠尾胶原醋酸溶解:1.将鼠尾胶原加入到0.1M的醋酸中,制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2.建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3.稀释一定数量的胶原溶液。4.按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。吸去生理盐水,将尾腱称重(0.5-1克)。石家庄鼠尾胶原单价鼠尾胶原实验应用:探讨应用鼠尾胶原在豚鼠前庭毛细胞膜片钳实验中的促进毛细胞贴壁效...