除此之外,细胞还可以释放膜囊泡,外泌体与微泡就是其中两种,二者相似但形成方式不同:外泌体是细胞内内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中的膜囊泡,而微泡则是细胞出芽与细胞膜融合后直接脱落形成的囊泡,且外泌体大小均一, 直径在40~100 nm,其大小取决于其起源部位以及细胞中的脂质双层结构;而微泡大小不一,直径在50 ~1000 nm之间。外泌体的组成:外泌体主要含有融合蛋白和转运蛋白、热休克蛋白(HSP 70)、CD类蛋白以及磷脂酶和其他脂质相关蛋白,但是不同来源的外泌体的组成有差异。外泌体富含胆固醇和鞘磷脂。吉林云序外泌体平台
外泌体的生物学功能:1、first报道的外泌体生物功能是红血球成熟过程中排出来的蛋白质。 2、进一步的研究表明其功能包括排泄不必要的蛋白质和RNA等物质。 3、可促进生物体免疫应答反应。 4、对凝血和血管生成其促进作用。 5、可通过化学信号参与ai细胞的转移。 6、在哺乳期的免疫调节过程中起到重要的作用。 7、不仅参与触发下游信号传导,而且特异性靶向受体细胞和交换蛋白。 8、可提供特殊的核酸且起到运输功能。 9、作为细胞-细胞之间传递信息的重要分子。 10、在病毒和朊蛋白等多种病原体之间起着独特的作用。河南云序生物外泌体环状RNA测序外泌体可通过化学信号参与ai细胞的转移。
已有研究显示人类胚胎干细胞来源的MSC也可释放外泌体发挥心肌保护的作用。有研究在小鼠心肌缺血-再灌注损伤模型中发现,心肌内递送MSCs外泌体,可使心肌梗死面积减少,有效提高心肌细胞存活率。 蔡东升博士及其研究团队证明,下丘脑干细胞分泌的外泌体可以延缓衰老。该研究发现,随着下丘脑干细胞的消失,小鼠开始出现衰老症状。但随着植入经过改造的健康的下丘脑干细胞后,小鼠的衰老症状延迟并且寿命延长,进一步研究发现,该过程一部分是下丘脑干细胞通过释放外泌体来实现的。
流式细胞仪不仅可以检测囊泡的大小、数量,而且通过荧光标记可以检测囊泡的来源,将囊泡进行分类,因此,流式细胞仪是进行囊泡快速、高通量、多参数检测的较优de选择。但是,传统流式细胞仪无法测量<300nm的外泌体,因此很难进行精确地定量和定性分析。 纳米颗粒跟zong分析技术(Nanosight Tracking Analysis,NTA)是一种比较新颖的表征纳米颗粒的方法,它可直接并实时观测纳米颗粒。NTA 通过光学显微镜收集纳米颗粒的散射光信号,拍摄一段纳米颗粒在溶液中做布朗运动的影像,对每个颗粒的布朗运动进行追踪和分析,从而计算出纳米颗粒的流体力学半径和浓度。外泌体大小均一, 直径在40~100 nm。
目前,外泌体的分离多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤三种方法。磁珠免疫捕获:利用外泌体表面特有的表面标记物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合,即可将外泌体吸附并分离出来。磁珠法具有特异性高、操作简便、不影响外泌体形态完整等优点,但是效率低,外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响,不利于下游实验,难以普遍普及。人体中几乎所有类型的细胞都能产生外泌体,它普遍存在于组织细胞间隙及体液中。以往认为外泌体属于细胞“垃圾”,且因此低估它的重要作用。虽然外泌体在30多年前被发现,但是直到较近才开始意识到其重要性。外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。海南测序外泌体价格
离心法:此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足。吉林云序外泌体平台
近来外泌体在MSCs中的作用机制正被普遍关注和研究,其内容物可以通过参与细胞间的信息传递和信号传导,以及在体内改变细胞或组织代谢,影响机体的损伤修复,并参与tumour、感ran等疾病的诊断及医治。MSCs的外泌体包含细胞因子、生长因子、信号脂质、各种mRNA和调节 miRNA等内容物。由于其纳米大小的尺寸和脂质外层特性,将其注入后,很容易通过血液循环到达损伤部位。目前MSCs来源的外泌体已用于器guan损伤动物模型、tumour抑制及免疫应答调控模型等多项研究。吉林云序外泌体平台
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