一类外泌体中常见的细胞质蛋白是Rabs蛋白,是鸟苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一种。它可以调节外泌体膜与受体细胞的融合,有文献报道称RAB4, RAB5和 RAB11主要出现在早期以及回收的核内体中,RAB7 和 RAB9主要出现在晚期的核内体。现有大量的研究发现外泌体中含有40种RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌体中富含具有外泌体膜交换以及融合作用的膜联蛋白(包括膜联蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族(CD63, CD81 和CD9))、热休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些细胞特异性的蛋白包括A33(结肠上皮细胞来源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈细胞来源)、CD86(抗原提呈细胞来源)以及乳凝集素(不成熟的树突状细胞)。密度梯度离心法:用此种方法分离到的外泌体纯度较高,但是前期准备工作繁杂。河北云序生物外泌体结果
外泌体(Exosome)可以由多种类型的细胞(免疫细胞、心血管细胞、神经细胞、干细胞、tumour细胞)释放到体液环境和组织间隙中。Exosome中含有细胞特异的蛋白质、脂质和核酸,能作为信号分子传递给其他细胞从而调控其他细胞的生物活性与功能。越来越多的研究表明,Exosome在多种疾病的发生和发展、诊断和医治中发挥重要作用,Exosome已成为生物医学乃至植物学与微生物学研究的方向,受到普遍的关注。外泌体中的非编码RNA,包括短链非编码RNA(microRNA/miRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA),环状RNA(circular RNA,circRNA)等介导了外泌体的诸多功能,是外泌体研究中的重要关注对象。山西平台外泌体miRNA测序进一步的研究表明外泌体功能包括排泄不必要的蛋白质和RNA等物质。
15%-25%的结直肠ai(CRC)患者在较初诊断时出现肝转移,然而,肝转移的确切机制尚不清楚。来自东南大学的陈瑞和来自南京医科大学di一附属医院的王学浩研究团队近日在Hepatology发表较新研究,揭示了低氧诱导的外泌体miR-135a-5p通过转移前生态位与CRC肝转移的发展、临床严重程度和预后相关。miR-135a-5p可能是阻止CRC肝转移的一个潜在靶点。原发性结直肠ai(CRC)病变中的低氧微环境促进miR-135a-5p外泌体释放,选择性地在肝脏中启动有利的转移前生态位形成。
H.Valadi等发现,细胞之间可以通过外泌体中的RNA来交换遗传物质。这意味着细胞可以通过外泌体影响另外一个细胞,甚至可以把自己的基因强加给另外一个细胞。研究人员逐渐对小小的外泌体产生了极大的好奇。他们发现,tumour细胞的外泌体与正常细胞的外泌体之间存在差异,tumour的外泌体会促进tumour的生长和转移,tumour周围组织细胞分泌的外泌体具备杀伤tumour细胞的能力,等等。2013年的诺贝尔生理或医学奖颁给了三位科学家,他们分别是美国科学家James E. Rothman和Randy W. Schekman,德国科学家Thomas C. Südhof,以表彰他们发现细胞内部囊泡(外泌体等)运输调控机制。使外泌体的研究达到全新的高度。就外泌体的研究方向而言,干细胞、免疫、microRNA、靶向给药、ai症的诊断及医治等都是热门研究领域。样品运输:样品置于1.5mLEppendorf管中,封口膜封好,干冰运输。
外泌体是细胞分泌的50-150nm粒径大小,并具有磷脂双分子层结构的微囊泡。由于外泌体是从母本细胞内部分泌出来,因此会带有母本细胞特定的遗传物质(蛋白、核酸等)。同时,外泌体的磷脂双分子层与普通细胞膜具有同源性,很容易被其母本细胞同类的或异类的细胞摄取,进而释放遗传物质进入这些摄取外泌体的细胞内部。由于上述特性的存在,外泌体无论在疾病诊断、微环境调控机制还是在药物载体改造等方面都受到了越来越多的关注,国自然资助的项目数和总金额也逐年攀升,占据近2年生物医学研究热点的榜首。云序生物环状RNA测序服务,采用Cloudseq CircRNA Enrichment Kit。山东外泌体
过滤离心:这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样纯度不足。河北云序生物外泌体结果
外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族(CD63, CD81 和CD9))、热休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些细胞特异性的蛋白包括A33(结肠上皮细胞来源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈细胞来源)、CD86(抗原提呈细胞来源)以及乳凝集素(不成熟的树突状细胞)。其它一些外泌体中的蛋白包括多种的代谢类的酶( 烯醇化酶 1, 醛缩酶 1, PKM2, PGK1, PDIA3, GSTP1,DPP4, AHCY, TPL1, 抗氧化蛋白, P4HB, LDH, 亲环素 A,FASN, MDH1 和CNP)、核糖体蛋白(RPS3)、信号转导因子(黑色素瘤分化相关因子, ARF1, CDC42, 人类红细胞膜整合蛋白, SLC9A3R1)、粘附因子(MFGE8、整合素)、细胞骨架蛋白以及泛素等。河北云序生物外泌体结果
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