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外泌体(Exosome)可以由多种类型的细胞(免疫细胞、心血管细胞、神经细胞、干细胞、tumour细胞)释放到体液环境和组织间隙中。Exosome中含有细胞特异的蛋白质、脂质和核酸,能作为信号分子传递给其他细胞从而调控其他细胞的生物活性与功能。越来越多的研究表明,Exosome在多种疾病的发生和发展、诊断和医治中发挥重要作用,Exosome已成为生物医学乃至植物学与微生物学研究的方向,受到普遍的关注。外泌体中的非编码RNA,包括短链非编码RNA(microRNA/miRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA),环状RNA(circular RNA,circRNA)等介导了外泌体的诸多功能,是外泌体研究中的重要关注对象。外泌体无论在疾病诊断、微环境调控机制还是在药物载体改造等方面都受到了越来越多的关注。海南平台外泌体全转录测序

海南平台外泌体全转录测序,外泌体

外泌体是细胞分泌的50-150nm粒径大小,并具有磷脂双分子层结构的微囊泡。由于外泌体是从母本细胞内部分泌出来,因此会带有母本细胞特定的遗传物质(蛋白、核酸等)。同时,外泌体的磷脂双分子层与普通细胞膜具有同源性,很容易被其母本细胞同类的或异类的细胞摄取,进而释放遗传物质进入这些摄取外泌体的细胞内部。由于上述特性的存在,外泌体无论在疾病诊断、微环境调控机制还是在药物载体改造等方面都受到了越来越多的关注,国自然资助的项目数和总金额也逐年攀升,占据近2年生物医学研究热点的榜首。福建云序生物外泌体平台外泌体可促进生物体免疫应答反应。

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转移导致绝大多数的结直肠ai(CRC)相关死亡,但目前对CRC原发灶中转移起始细胞的具体特征和潜在机制知之甚少,而环状RNA(circRNAs)是否参与其中也尚不明确。来自中山大学的谢丹研究团队较新发表在Molecular Cancer的研究揭示了名为circLONP2的环状RNA(circRNAs)在CRC进展过程中是关键的转移启动分子。circLONP2通过调控miR-17的细胞内成熟和细胞间转移,导致原发部位的转移启动能力扩散,加速tumour细胞跨器guan转移。circLONP2或可作为CRC医治中的预后预测因子和新的抗转移医治靶点。

如今外泌体分析用于临床诊断和医治监控显然是一个重要领域。特定的跨膜蛋白信号可以识别tumour特异性的外泌体,而外泌体内蛋白的改变可以用于推断tumour细胞对医治措施的反应。虽然外泌体有如此大的临床价值,但是临床日常外泌体分析却十分困难,这是因为目前缺少足够灵敏且快速的试验平台,尤其是进行外泌体蛋白质分析。 目前人们利用电镜来分析外泌体的大小和形态,利用流式细胞仪来分析细胞表面标记,通过Western blot和ELISA等方法对蛋白进行分析,或通过qPCR和新一代测序NGS来分析RNA。外泌体在哺乳期的免疫调节过程中起到重要的作用。

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抗血管生成的酪氨酸激酶抑制剂(AA-TKI)是结直肠ai的有效疗法。在临床应用中,部分患者因各种原因停用AA-TKI后,常发生tumour血管再生。暨南大学的张冬梅团队及叶文才团队在Journal of Extracellular Vesicles上发表的一项较新研究发现,在结直肠ai小鼠模型中,停用AA-TKI后,tumour血管周围的细胞可通过胞外囊泡中的Gas6激huoAXL信号通路,以招募血管内皮祖细胞,从而促进tumour血管再生。AXL抑制剂可抑制tumour血管再生,而联用AA-TKI与AXL抑制剂可抑制结直肠ai小鼠的tumour生长并延长生存期。云序生物环状RNA测序服务,采用Cloudseq CircRNA Enrichment Kit。中国台湾技术外泌体结果

一些LncRNA可以通过与miRNA结合,调节miRNA靶基因的表达。海南平台外泌体全转录测序

外泌体的提取方式: 1、离心法:此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足。 2、过滤离心:这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样纯度不足。 3、密度梯度离心法:用此种方法分离到的外泌体纯度较高,但是前期准备工作繁杂 4、免疫磁珠法:这种方法可以保证外泌体形态的完整,特异性高、操作简单,但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。 5、色谱法:此种方法分离出的外泌体大小均一,但设备特殊,应用不普遍。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分。海南平台外泌体全转录测序

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