内蒙古外泌体环状RNA pull down

研究背景： 利用高通量测序手段，研究者们在拟南芥、小鼠、果蝇和人体内都发现了环状RNA的高度表达，证明了环状RNA在不同物种中存在。目前，已经进行过环状RNA研究的物种数量还非常有限，环状RNA数据库circBase中已收录的物种有7个。作为一种重要的模式生物，非洲爪蟾的环状RNA尚未见报道。本文通过云序生物提供的一站式环状RNA测序、环状RNA定量PCR、环状RNA的RNase R耐受性实验和生物信息学服务于全世界进行了非洲爪蟾环状RNA表达谱的构建，为后续研究脊椎动物环状RNA的生物学功能奠定了基础，非常具有借鉴意义。云序优势：一站式服务，优化的实验流程，严格的质控，专业的生物信息学分析。内蒙古外泌体环状RNA pull down

环状RNA作为一种新发现的非编码RNA，在多种组织及疾病中发挥重要的生物学功能，然而关于其在红斑狼疮性肾炎中的研究鲜有报道。红斑狼疮性肾炎作为一种免疫缺陷性疾病，严重影响了患者的身体健康和生活质量。云序携手中国医科大学周华主任团队在Cell子刊“Molecular Therapy Nucleic Acids”上发表重要研究成果，通过全转录组测序构建了该疾病的环状RNA表达谱，并从313条差异表达结果中挑选感兴趣的环状RNA--CircHLA-C。前期，作者发现miR-150在该疾病中发挥着重要的调控作用，通过生信预测结果显示该环状能够通过竞争性吸附miR-150。内蒙古m1A环状RNA修饰环状RNA可直接与蛋白质结合。

一、环状RNA表达谱： 作者将50个CRC患者和50个正常人的血清样品分别随机分为5组均匀混样，对混样后的5v5个样 品进行了外泌体全转录组测序, 检测到1924个环状RNA, 来源基因在各染色体上均有分布，环状大部分长度小于500nt。 二、CRC患者和健康人中环状RNA的差异表达 接着作者筛选出了122个在CRC与健康人血清外泌体中差异表达的环状RNA，其中100个明显上调，22个明显下调。其中65个为新发现的环状RNA。 三、差异环状RNA的功能预测 通过对环状RNA来源基因的GO分析预测差异环状RNA的功能，结果显示上调的环状的潜在功能富集在蛋白修饰和细胞对内源性刺激的反应相关功能， 高尔基体相关功能。此外KEGG分析还找到了这些基因参与的4个相关通路。

云序生物对ac4C RNA乙酰化检测手段为acRIP-Seq技术，技术原理如下：将乙酰化RNA特异性抗体与被随机打断的RNA的片段进行共孵育，抓取有乙酰化修饰的片段进行测序；同时需要平行测序一个对照（Input）样本，对照样本只含有打断的RNA的片段，并不添加RNA乙酰化特异性抗体与其共孵育。对照样本用于消除非特异性抓取的乙酰化片段的背景。对比免疫共沉淀（IP）样本和对照样本（Input）中的序列片段，将RNA乙酰化修饰位点定位到转录组上，并根据RNA-seq数据，计算样本中RNA乙酰化程度及对RNA表达水平的影响。环状RNA可通过RNA介导间接与蛋白质发生关联。

为了更全检测小麦中所有环状RNA的表达情况，研究人员分别对PEG和水处理后的小麦幼苗叶子进行环状RNA测序，共发现了88条环状RNA。通过对环状RNA的基因组来源进行分析，发现环状RNA可分为5类，其中基因间（intragenic）产生的环状RNA占大多数。接下来，研究人员系统分析了不同样本之间环状RNA的表达情况，发现62条环状RNA差异表达，这暗示着这些环状RNA可能在脱水应激中发挥作用。为了验证测序结果的准确性，研究人员挑选了16条环状RNA，利用“divergent primers”进行环状RNA定量PCR检测。CircRNA由称为“反向剪接”的非经典剪接事件产生。海南m1A环状RNA测序

RIP(RNA Immunoprecipitation)是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术。内蒙古外泌体环状RNA pull down

环状RNA作为研究持续火热的明星分子，不同于对其丰富的表达谱研究，环状RNA功能机制研究还处在起步阶段。环状RNA研究多为miRNA海绵机制，部分circRNA可竞争性结合miRNA，解除miRNA对靶基因的抑制作用，上调靶基因的表达。其实，环状RNA可以通过结合不同种类的功能蛋白，分别在转录前、后及翻译水平严格调控细胞生殖生长等过程。云序曾对环状RNA经典研究思路进行过详细解析（2018国自然研究热点一环状RNA研究深度剖析），感兴趣的老师可以查询浏览。内蒙古外泌体环状RNA pull down

上海云序生物科技有限公司是一家上海云序生物科技有限公司于2015年3月成立，坐落于上海漕河泾新兴技术开发区，专注于表观修饰以及转录组领域，依托于高通量测序、定量PCR、质谱技术和生物信息学等技术，集科研服务、医学检测、产品研发于一体的****。的公司，是一家集研发、设计、生产和销售为一体的专业化公司。云序生物作为上海云序生物科技有限公司于2015年3月成立，坐落于上海漕河泾新兴技术开发区，专注于表观修饰以及转录组领域，依托于高通量测序、定量PCR、质谱技术和生物信息学等技术，集科研服务、医学检测、产品研发于一体的****。的企业之一，为客户提供良好的RNA甲基化，表观遗传学，转录组测序，外泌体。云序生物始终以本分踏实的精神和必胜的信念，影响并带动团队取得成功。云序生物始终关注商务服务行业。满足市场需求，提高产品价值，是我们前行的力量。