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鼠尾胶原包被培养板：胎干细胞在体外可诱导分化为血管内皮细胞,进而形成血管,因而成为血管组织工程理想的种子细胞来源之一。目的:探讨建立定向诱导人胚胎干细胞向血管内皮细胞分化的方法。方法:在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上培养人胚胎干细胞H1,将H1细胞团块转移到鼠尾胶原包被的培养板,贴壁24-48h后,培养基换为含不同辅助因子和内皮细胞生长添加剂的EGM-2内皮细胞培养基。结果与结论:①在EGM-2内皮细胞培养基诱导下,细胞逐步表达内皮细胞特异性标记基因VEGFR-2、PECAM1、vWF、CD34、VE-cadherin、GATA-2。②分化细胞表达内皮细胞特异性标记VE-cadherin、CD31。③分化细胞具有吞噬低密度脂蛋白功能。说明将人胚胎干细胞接种在鼠尾胶原包被培养板上,通过EGM-2内皮培养体系诱导,可直接分化为功能性血管内皮细胞。为研究胞外基质对诱导胚胎干细胞血管内皮细胞分化的作用以及相关信号分子机制打下了基础。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便，成本低廉。鼠尾胶原蛋白用于生产明胶并添加到布丁和棉花糖中。郑州正规鼠尾胶原厂家批发价

鼠尾胶原是一种天然培养基和一种天然的黏附剂，可用于细胞培养皿的包被，特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养；也可用于制备三维胶原凝胶，使细胞在模拟的三维环境中生长。制备鼠尾胶原方法：1、取大鼠尾巴洗净，75%酒精浸泡5分钟；2、手持尾巴，用止血钳夹住鼠尾的较高，折断尾骨后拉出尾腱；3、将尾腱剪断置于平皿中，生理盐水浸泡；4、重复步骤2、3，直至尾腱量够用；5、吸去生理盐水，将尾腱称重（0.5-1克）；6、将尾腱置于平皿内剪碎，转移至三角烧瓶中；7、按每克尾腱50ml的比例，加入0.1%醋酸溶液；8、摇晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期；9、离心，4000转/分，10-15分钟；10、吸取上清，分装成小瓶，4℃保存。温州鼠尾胶原平均价格胶原蛋白就像骨骼中的一张充满小洞的网，它会牢牢地留住就要流失的钙质。

鼠尾胶原蛋白的提取方法，采用酸法与酶法相结合的工艺，保持恒低温无菌的环境，利用同样浓度的盐溶液进行两次盐析与离心，简化了提纯步骤。所用酸为低浓度酸溶液，并采用柠檬酸替代醋酸进行提纯。从提取原料到样品生成过程中，进行多次真空冷冻干燥，并经进一步处理获得含水率在3％以下的胶原蛋白微粉；较后由灭菌、无菌包装，成品胶原蛋白粉末的纯度在98％以上。本发明获得的胶原蛋白降低了蛋白的免疫原性，提高了产率和生物相容性，降低了成本，适用于生物医用材料，所得到的胶原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋结构。

一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法，其特征在于，包括以下步骤: 1.用0.03?0.06mol/L的柠檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，调节pH = 6.5，用的3?6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中，不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出，4°C沉淀10小时，去除上清液，去除上清液，絮状溶液高速冷冻离心处理，收集沉淀； 2.用0.03?0.06mol/L的柠檬酸再次溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液，冰水浴中，调节PH = 6.5 ;溶液依次通过阳离子交换树脂、阴离子交换树脂进行脱盐处理；3.将脱盐后的胶原蛋白溶液，-40至-20°C预冻2?4小时，然后真空冷冻干燥，冻干产品经进一步处理得到含水率在3%以下的胶原蛋白微粉，灭菌、包装，得到成品胶原蛋白粉末。鼠尾型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。

鼠尾胶原的提取步骤：配置含4.5mmol/lNacl 和0.05mol/l Tris-base 的Tris-Hcl溶液（用盐酸将其PH值调至7.5） 取鼠尾，去皮，由尖部向前分段抽取肌腱，置于生理盐水中，称重，再倒掉生理盐水，酒精中浸泡20分钟 离心胶原溶液，（1200rpm10min) 取上清 每600上述粗提液加100ml0.14mol/l NaOH溶液离心，（8000rpm 5min) 其上清，留絮状沉 10.将絮状沉淀物置于三蒸水中，用0.1mol/l(1000:6) 醋酸溶解絮状沉淀物，加入消毒过的搅拌 子，冷房搅拌数天，得絮状胶原。 注意所有和胶原有关的操作都在冰上进行\ Rat tail collagen type 配置含4.5mmol/L NaCl 和0.05mol/l Tris-base 的Tris-HCl 溶液（用盐酸将其pH值调至7.5）； 于-20冰箱中取出鼠尾，浸泡75%或70%酒精，解冻； 在一小培养皿中放置少量生理盐水，置于电子秤上，调零； 取鼠尾，去皮，由尖部向前分段抽取肌腱，置于生理盐水中。制备鼠尾胶原：重复步骤2、3，直至尾腱量够用。石家庄鼠尾胶原哪家好

成功建立了利用自制鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法，并且制作简便,成本低廉。郑州正规鼠尾胶原厂家批发价

鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用：胶原蛋白具有抗氧化作用，但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建，对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的：探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法：将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿（实验组）和普通培养皿（对照组）中，并且均用0，10，100μmol/L H2O2诱导。24 h后，以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态，应用MTT 比色法检测心肌细胞存活率，TUNEL 法检测心肌细胞凋亡形态，流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率，黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力，硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平，Western-Blot 检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。郑州正规鼠尾胶原厂家批发价

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