鼠尾胶原实验应用:鼠尾胶原在原代培养耳蜗血管纹边缘细胞中的应用。目的:建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。方法:制作鼠尾胶原,并观察利用自制的鼠尾胶原所培养出大鼠耳蜗边缘细胞的效果。结果:自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠耳蜗边缘细胞,细胞角蛋白18表达阳性,免疫组织化学结果和扫描电镜证实所培养的细胞具有典型的分泌上皮细胞特征。结论:成功建立了利用自制鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法,并且制作简便,成本低廉。鼠尾胶原是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用。郑州鼠尾胶原厂家
鼠尾胶原凝胶体在皮肤细胞原代培养中的应用:在国外的药理,毒理和皮肤病学的研究领域中已得到 的限翩,否则培养成功率极低.本文采用鼠尾胶原凝胶体作为滋养层,提高了培养细胞的 材料和方法r1]实验材料:培养液DEIdE(G皿}ao),表皮细胞生长因子(EGF Sigma),小牛血清(上海祟明生物制品厂),氢化可的松,胰岛素(Sigm,青,链霉素,胰 蛋白酶,]~DTA,细胞培养皿~35mill(00rningrSA).(2)皮肤基底细胞的分离和细胞 悬液的制备:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮肤,剪下 皮肤后.以 消化12h.轻刷表皮面,收集细胞悬液,加入细胞培养液. 用梯度离心收集细胞,以3xi0/m]浓度接种平 皿.(3)鼠尾胶原 凝胶体的制备:具体方法参见文献c13o(4)培养皿的胶原铺制:i.0ml的酸溶解胶原滴 入~35mm培养皿中,铺满平皿底部;将平皿暴露于氨气中30min,然后置空气中 30rain,散尽剩余氨气。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。南京正规鼠尾胶原厂家现货一种基于鼠尾胶原蛋白:根据权利要求1所述的基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料。
鼠尾胶原简介:鼠尾I型胶原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在无菌下制备,纯度达到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于细胞培养皿的包被,特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养;也可用于制备三维胶原凝胶,使细胞在模拟的三维环境中生长。质量标准:1、SDS-PAGE分析纯度大于95%。2、无菌检验结果为阴性。3、本品2μg/cm2包被细胞培养皿后培养PC-12细胞,贴壁及生长正常。4、本品浓度1mg/mL,pH7.0时形成具有一定强度的三维胶原凝胶,NIH-3T3细胞在三维凝胶内生长正常、PC-12细胞在三维凝胶表面生长正常。
一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法,其特征在于,包括以下步骤: (1)将无组织纤维、脂肪和多糖残留的鼠尾腱,真空冷冻干燥备用;(2)冻干鼠尾腱经低温冻干粉碎至200?400目; (3)在冰水浴中将粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶胀,鼠尾腱与醋酸的固液比为I克:10mL?I克:120mL,期间不断搅拌,防止冻结成块,得到胶原溶胀液; (4)称取胃蛋白酶加入到胶原溶胀液中,鼠尾腱与蛋白酶质量比为50: I?100: 1,在4°C,48?74小时酶解,期间间歇性搅拌; (5)将黏稠的胶体溶液进行高速冷冻离心处理,收集上清液;在冰水浴中,用的3?6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中,不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出,4°C沉淀10小时,去除上清液,絮状溶液高速冷冻离心处理,收集沉淀。I型胶原蛋白分布非常普遍,是主纤维束的主要成分。
鼠尾胶原凝胶体在皮肤细胞原代培养中的应用:在国外的药理,毒理和皮肤病学的研究领域中已得到 的限翩,否则培养成功率极低.本文采用鼠尾胶原凝胶体作为滋养层,提高了培养细胞的 材料和方法r1]实验材料:培养液DEIdE(G皿}ao),表皮细胞生长因子(EGF Sigma),小牛血清(上海祟明生物制品厂),氢化可的松,胰岛素(Sigm,青,链霉素,胰 蛋白酶,]~DTA,细胞培养皿~35mill(00rningrSA).(2)皮肤基底细胞的分离和细胞 悬液的制备:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮肤,剪下 皮肤后.以 消化12h.轻刷表皮面,收集细胞悬液,加入细胞培养液. 用梯度离心收集细胞,以3xi0/m]浓度接种平 皿.(3)鼠尾胶原 凝胶体的制备:具体方法参见文献c13o(4)培养皿的胶原铺制:i.0ml的酸溶解胶原滴 入~35mm培养皿中,铺满平皿底部;将平皿暴露于氨气中30min,然后置空气中 30rain,散尽剩余氨气。利用鼠尾Ⅰ型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。徐州武汉鼠尾胶原
制备鼠尾胶原:按每克尾腱50ml的比例,加入0.1%醋酸溶液。郑州鼠尾胶原厂家
一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法:随着现代医学的发展,各种医用耗材的更新换代也是日新月异。止血材料是常见的医疗器械产品。但是现今市面上的止血材料不光存在着容易引起伤口传染的缺点;同时还存在着容易与伤口粘附不易去除,导致伤口溃烂,或者因为粘附导致传染;再次就是止血材料多是通过吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血,很少有止血材料是使用能够自身具有止血性质的材料来生产的。现今市面上的可吸收止血材料有氧化纤维素、α -氰基丙烯酸酯类组织胶、医用止血明胶等,但是都有各自的缺点。如氧化纤维素可引起组织周围PH值升高;α -氰基丙烯酸酯类组织胶降解过程中释放出氰和甲醛等有毒物质;医用止血明胶黏附性较差,易脱落,因其吸收血液后膨胀可能压迫伤口周围组织等。郑州鼠尾胶原厂家
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鼠尾胶原醋酸溶解:1.将鼠尾胶原加入到0.1M的醋酸中,制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2.建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3.稀释一定数量的胶原溶液。4.按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。吸去生理盐水,将尾腱称重(0.5-1克)。石家庄鼠尾胶原单价鼠尾胶原实验应用:探讨应用鼠尾胶原在豚鼠前庭毛细胞膜片钳实验中的促进毛细胞贴壁效...