15%-25%的结直肠ai(CRC)患者在较初诊断时出现肝转移,然而,肝转移的确切机制尚不清楚。来自东南大学的陈瑞和来自南京医科大学di一附属医院的王学浩研究团队近日在Hepatology发表较新研究,揭示了低氧诱导的外泌体miR-135a-5p通过转移前生态位与CRC肝转移的发展、临床严重程度和预后相关。miR-135a-5p可能是阻止CRC肝转移的一个潜在靶点。原发性结直肠ai(CRC)病变中的低氧微环境促进miR-135a-5p外泌体释放,选择性地在肝脏中启动有利的转移前生态位形成。外泌体大小均一, 直径在40~100 nm。辽宁分析外泌体研究
抗血管生成的酪氨酸激酶抑制剂(AA-TKI)是结直肠ai的有效疗法。在临床应用中,部分患者因各种原因停用AA-TKI后,常发生tumour血管再生。暨南大学的张冬梅团队及叶文才团队在Journal of Extracellular Vesicles上发表的一项较新研究发现,在结直肠ai小鼠模型中,停用AA-TKI后,tumour血管周围的细胞可通过胞外囊泡中的Gas6激huoAXL信号通路,以招募血管内皮祖细胞,从而促进tumour血管再生。AXL抑制剂可抑制tumour血管再生,而联用AA-TKI与AXL抑制剂可抑制结直肠ai小鼠的tumour生长并延长生存期。四川上海云序外泌体外泌体的磷脂双分子层与普通细胞膜具有同源性。
外泌体的内容物可以通过生物工程手段修饰。其中,将选择的蛋白内容物与外泌体的EV-sorting proteins通过细胞工程融合是较常用的方法。这种方法既可以在腔内储存可输送到靶细胞的内容物,也可以让内容物与靶细胞表面受体结合来增强它们的医治信号特性或靶向能力。因此,Silva等在单外泌体水平上,通过分析工程化外泌体技术对不同外泌体的EV-sorting proteins在促进蛋白内容物的装载效率进行了评估。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分。
一类外泌体中常见的细胞质蛋白是Rabs蛋白,是鸟苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一种。它可以调节外泌体膜与受体细胞的融合,有文献报道称RAB4, RAB5和 RAB11主要出现在早期以及回收的核内体中,RAB7 和 RAB9主要出现在晚期的核内体。现有大量的研究发现外泌体中含有40种RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌体中富含具有外泌体膜交换以及融合作用的膜联蛋白(包括膜联蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族(CD63, CD81 和CD9))、热休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些细胞特异性的蛋白包括A33(结肠上皮细胞来源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈细胞来源)、CD86(抗原提呈细胞来源)以及乳凝集素(不成熟的树突状细胞)。常规的转录组测序采用Oligo d(T)法纯化带Poly(A)尾巴的RNA分子。
大多数常规的膜出芽过程是使膜从细胞器变形到细胞质中,而外泌体是由于细胞膜内吞形成内体,内体限制膜发生多处凹陷,向内出芽形成微囊泡(intraluminal vesicles,ILVs),从而转变为具有动态亚细胞结构的多囊泡体(multi-vesicle bodys,MVBs),即晚期内体。MVBs可以在内体限制膜处通过至少2种机制产生:一种是内吞体分选转运复合体机制(endosomal sorting complex required for transport,ESCRT),另一种是非依赖性的ESCRT机制。ESCRT机制由一组胞质蛋白复合物发挥作用,其能识别泛素化修饰的膜蛋白。外泌体对凝血和血管生成其促进作用。新疆云序外泌体平台
RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中,-80℃保存,避免反复冻融。辽宁分析外泌体研究
外泌体(Exosomes)来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)的囊泡,是由活细胞分泌而来,是一类大小介于30-200nm的含有DNA、RNA、蛋白质和脂类的微囊,几乎所有类型的细胞都能分泌,普遍存在于血清、血浆 、尿液等各种体液中。Exosomes 参与调控重要的细胞生理活动,在免疫应答、凋亡、血管生成、炎症反应、凝结过程中的作用均有报道,成为多种疾病医治的潜在靶点、早期诊断标记物、靶向药物载体等,成为近年来生命科学及医学领域的重要研究热点。辽宁分析外泌体研究
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