黑龙江云序生物外泌体miRNA测序

MSCs是干细胞家族的重要成员，属于多能干细胞，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。人间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞，还能向受损组织趋化。MSCs通过旁分泌方式释放细胞因子，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器guan损伤修复，是一种有前景的能够用于疾病医治的干细胞来源。一些LncRNA可以通过与miRNA结合，调节miRNA靶基因的表达。黑龙江云序生物外泌体miRNA测序

人体中几乎所有类型的细胞都能产生外泌体，它普遍存在于组织细胞间隙及体液中。以往认为外泌体属于细胞“垃圾”，且因此低估它的重要作用。虽然外泌体在30多年前被发现，但是直到较近才开始意识到其重要性。外泌体（Exosome）是一种直径为30-100nm的纳米级脂质包裹体结构，内部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物质。外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳，外泌体是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体 )的膜性囊泡。 包括tumour细胞在内的几乎所有类型的细胞，都可以产生并释放外泌体。西藏服务外泌体文章RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中，-80℃保存，避免反复冻融。

外泌体普遍存在于生物体的免疫应答反应中，外泌体可以通过介导促炎症反应来促进免疫反应，tumour细胞分泌的外泌体还可以抑制免疫反应。tumour细胞分泌的外泌体可以促进ai症的侵袭和转移，加快ai症部位的血管生成，有助于tumour微环境中的上皮间充质转化，并且增强tumour的耐药性。外泌体通过与受体细胞特异性结合的方式，传递各种生物学信息，发挥重要的生物学作用。本文分别就外泌体的产生机制、分离与鉴定、其对机体免疫过程和疾病的发生和发展的作用等方面的研究进展进行综述。

1983年，外泌体于绵羊网织红细胞中被发现，1987年Johnstone将其命名为“Exosome”。随后的10年，外泌体并未受到足够的重视。 直至1996年，G.Raposo发现类似于B淋巴细胞能分泌抗原提呈外泌体，这种外泌体携带MHC-Ⅱ类分子、共刺激因子和粘附因子。研究表明这种B细胞来源的外泌体可以直接刺激效应CD4+细胞的抗tumour反应。 1998年，L.Zitvogel等发现树突细胞（DC cell）也能产生有抗原提呈能力的外泌体，而且外泌体含有功能性的MHC-Ⅰ类和Ⅱ类分子，还有共刺激因子。这种外泌体启动了特异性的CTL杀伤作用，促进了T细胞依赖的抗tumour效应。外泌体可提供特殊的核酸且起到运输功能。

外泌体中包含多种miRNA，调控靶细胞生理活性，本文发现脂肪组织巨噬细胞（adipose tissue macrophages，ATMs）分泌的外泌体中含有miRNA并可以转移到胰岛素的靶细胞中，从而调节靶细胞对胰岛素的敏感性以及体内的总糖代谢稳态。Olefsky团队从肥胖小鼠脂肪组织内分离出巨噬细胞，再收集细胞里的外泌体，用它们处理体型瘦的健康小鼠，发现接受了外源外泌体的小鼠虽然体重依然正常，但却出现肥胖诱导型胰岛素抵抗症状。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分，色谱法：此种方法分离出的外泌体大小均一，但设备特殊，应用不普遍。四川分析外泌体文章

多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。黑龙江云序生物外泌体miRNA测序

目前，外泌体的分离多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤三种方法。 超速离心：耗时耗力，往往需要8-30个小时；每次较多只能处理6个样品；需要大量的起始材料；产量不高。需一台超速离心机。 将欲提取的细胞培养上清液10ml，在4 ℃的环境下，300×g 10min，2000×g 20min，弃沉淀，去除细胞；然后 l0,000×g 30min ，弃沉淀，去除亚细胞成分；再用10,000×g 60min，弃掉上清液，较后所得沉淀既为exosome ，用30ml PBS 溶液重新悬浮沉淀物，混匀后再以10,000×g 60min，用 l ml PBS溶液悬浮沉淀物提纯的exosome 溶液分别装入eppendorf 管内，置于-80℃冰箱内保存备用。黑龙江云序生物外泌体miRNA测序

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