2015年JHuan等人证实了急性髓细胞白血病(AML)的外泌体在白血病的骨髓微环境中具有抑制造血干细胞的功能。同年WANGY等人发现诱导多能干(iPS)细胞的外泌体可以在心肌细胞受到急性心肌缺血(MIR)影响时,给心肌细胞传送保护信号。 目前有关外泌体的研究,主要集中在外泌体颗粒的提取、纯化和内容物分析上。其中,外泌体的粒径表征和浓度信息是极为重要的参数。人体中几乎所有类型的细胞都能产生外泌体,它普遍存在于组织细胞间隙及体液中。以往认为外泌体属于细胞“垃圾”,且因此低估它的重要作用。虽然外泌体在30多年前被发现,但是直到较近才开始意识到其重要性。外泌体在病毒和朊蛋白等多种病原体之间起着独特的作用。天津分析外泌体miRNA测序
转移导致绝大多数的结直肠ai(CRC)相关死亡,但目前对CRC原发灶中转移起始细胞的具体特征和潜在机制知之甚少,而环状RNA(circRNAs)是否参与其中也尚不明确。来自中山大学的谢丹研究团队较新发表在Molecular Cancer的研究揭示了名为circLONP2的环状RNA(circRNAs)在CRC进展过程中是关键的转移启动分子。circLONP2通过调控miR-17的细胞内成熟和细胞间转移,导致原发部位的转移启动能力扩散,加速tumour细胞跨器guan转移。circLONP2或可作为CRC医治中的预后预测因子和新的抗转移医治靶点。平台外泌体分析人体几乎所有类型的细胞都能分泌外泌体,外泌体普遍存在并分布于各种体液中。
多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中 。 所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。 有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。 外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡,参与细胞间通讯,对外泌体的研究兴趣日益增长,无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。
超过4 600种蛋白质与外泌体有关。外泌体蛋白有以下几类:①外泌体中常见的蛋白质多与其生物发生机制有关,外泌体含有的细胞质蛋白,如膜蛋白和RAB蛋白,可以促进MVBs与细胞膜的融合及外泌体的释放;Tsg-101及附属蛋白质Alix参与ESCRT过程,促进内体膜的凹陷。②外泌体含有参与抗原呈递的蛋白质,如CD1、MHCⅠ和MHCⅡ,其在免疫调节中发挥重要作用,MHCⅠ还参与向T细胞呈递抗原的生理过程。外泌体表面还存在热休克蛋白,如HSP70和HSP90,促进了抗原肽与MHCⅠ及MHCⅡ的结合。③外泌体含有信号转导蛋白,如G蛋白和蛋白激酶。④外泌体含有丰富的蛋白水解酶,这表明外泌体能够促进细胞转移。⑤外泌体中还含有细胞质微管蛋白、肌动蛋白和肌动蛋白结合蛋白。但目前未发现外泌体中含有与内质网、高尔基体和细胞核相关的蛋白质。外泌体可通过化学信号参与ai细胞的转移。
外泌体的提取方式: 1、离心法:此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足。 2、过滤离心:这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样纯度不足。 3、密度梯度离心法:用此种方法分离到的外泌体纯度较高,但是前期准备工作繁杂 4、免疫磁珠法:这种方法可以保证外泌体形态的完整,特异性高、操作简单,但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。 5、色谱法:此种方法分离出的外泌体大小均一,但设备特殊,应用不普遍。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分。外泌体可促进生物体免疫应答反应。甘肃外泌体结果
离心法:此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足。天津分析外泌体miRNA测序
另外,MSC来源的外泌体还可以有效地促进骨折的愈合、保护修复肾损伤,心肌衰弱、及后肢局部缺血的医治,以及调节促进肌肉的再生等。动物实验中,应用MSC外泌体对于卵巢细胞衰老的医治中,起到了明显的效果。更有体外细胞实验验证,人脐带间充质干细胞分泌的外泌体能够有效抑制顺铂诱导的大鼠卵巢颗粒细胞的凋亡,提高细胞的生存率。 与传统的干细胞疗法不同,外泌体不是活细胞,因此在被注射到身体的受损伤部位后,不会发展成为ai细胞。因此,外泌体可能作为替代干细胞医治的新策略正在迅速获得重视,并且能够克服细胞医治中的诸多风险和困难。天津分析外泌体miRNA测序
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