青海云序生物外泌体分析

外泌体是细胞分泌的50-150nm粒径大小，并具有磷脂双分子层结构的微囊泡。由于外泌体是从母本细胞内部分泌出来，因此会带有母本细胞特定的遗传物质（蛋白、核酸等）。同时，外泌体的磷脂双分子层与普通细胞膜具有同源性，很容易被其母本细胞同类的或异类的细胞摄取，进而释放遗传物质进入这些摄取外泌体的细胞内部。由于上述特性的存在，外泌体无论在疾病诊断、微环境调控机制还是在药物载体改造等方面都受到了越来越多的关注，国自然资助的项目数和总金额也逐年攀升，占据近2年生物医学研究热点的榜首。细胞样品或新鲜组织块可用TRIZOL或RNA保护剂处理，液氮冻存后-80℃保存。青海云序生物外泌体分析

1983年，外泌体于绵羊网织红细胞中被发现，1987年Johnstone将其命名为“Exosome”。随后的10年，外泌体并未受到足够的重视。 直至1996年，G.Raposo发现类似于B淋巴细胞能分泌抗原提呈外泌体，这种外泌体携带MHC-Ⅱ类分子、共刺激因子和粘附因子。研究表明这种B细胞来源的外泌体可以直接刺激效应CD4+细胞的抗tumour反应。 1998年，L.Zitvogel等发现树突细胞（DC cell）也能产生有抗原提呈能力的外泌体，而且外泌体含有功能性的MHC-Ⅰ类和Ⅱ类分子，还有共刺激因子。这种外泌体启动了特异性的CTL杀伤作用，促进了T细胞依赖的抗tumour效应。青海云序生物外泌体分析外泌体可促进生物体免疫应答反应。

较近的研究表明，非编码RNA（ncRNAs）可以选择性地包装成外泌体，并从供体细胞传递到受体细胞，从而调节受体细胞的行为。越来越多的证据表明，在转移或非转移的结直肠ai（CRC）患者以及健康对照中，血液中的外泌体ncRNAs表现出不同的表达模式。此外，外泌体ncRNAs可参与调控tumour微环境、建立转移前生态位以及通过细胞-细胞交流诱导耐药。外泌体ncRNA有潜力作为CRC患者诊断、预后预测和医治反应监测的生物标志物。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分。

大多数常规的膜出芽过程是使膜从细胞器变形到细胞质中，而外泌体是由于细胞膜内吞形成内体，内体限制膜发生多处凹陷，向内出芽形成微囊泡(intraluminal vesicles，ILVs)，从而转变为具有动态亚细胞结构的多囊泡体(multi-vesicle bodys，MVBs)，即晚期内体。MVBs可以在内体限制膜处通过至少2种机制产生：一种是内吞体分选转运复合体机制(endosomal sorting complex required for transport，ESCRT)，另一种是非依赖性的ESCRT机制。ESCRT机制由一组胞质蛋白复合物发挥作用，其能识别泛素化修饰的膜蛋白。外泌体（Exosomes）是一种直径在40-100 nm的圆形单层膜结构，是细胞外泌囊泡中体积较小的一种。

近来外泌体在MSCs中的作用机制正被普遍关注和研究，其内容物可以通过参与细胞间的信息传递和信号传导，以及在体内改变细胞或组织代谢，影响机体的损伤修复，并参与tumour、感ran等疾病的诊断及医治。MSCs的外泌体包含细胞因子、生长因子、信号脂质、各种mRNA和调节 miRNA等内容物。由于其纳米大小的尺寸和脂质外层特性，将其注入后，很容易通过血液循环到达损伤部位。目前MSCs来源的外泌体已用于器guan损伤动物模型、tumour抑制及免疫应答调控模型等多项研究。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中。新疆测序外泌体分析

外泌体在哺乳期的免疫调节过程中起到重要的作用。青海云序生物外泌体分析

纳米颗粒跟zong分析技术（Nanosight Tracking Analysis，NTA）是一种比较新颖的表征纳米颗粒的方法，它可直接并实时观测纳米颗粒。NTA 通过光学显微镜收集纳米颗粒的散射光信号，拍摄一段纳米颗粒在溶液中做布朗运动的影像，对每个颗粒的布朗运动进行追zong和分析，从而计算出纳米颗粒的流体力学半径和浓度。 通过SDS-PAGE电泳分析得到Exosome中蛋白的含量及种类；通过Western-Blot检测Exosome中特定的蛋白表达情况。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分。青海云序生物外泌体分析

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