由于仪器的制造和调整误差，单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。但是，当吸收峰宽度较小，而且吸收峰两侧边缘比较陡直，此时波长准确度的影响就必须引起注意。2、透射比（吸光度）准确度很显然,透射比或吸光度的误差越大,测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。3、杂散光杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成的。杂散光是分析样品的非吸收光，随着样品浓度的增加，杂散光的影响也随之增大，将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器的灵敏度均明显减弱，杂散光的影响更不能忽视。因此，杂散光的大小也是仪器性能的一项重要指标。使用与维护1、若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。2、指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。3、比色皿使用完毕后，请立即用蒸馏水冲洗干净，并用干净柔软的纱布将水迹擦去，以防止表面光洁度被破坏，影响比色皿的透光率。4、操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯。在使用紫外可见分光度计时，设备必须能够在启动设备之前取出存放在样品室中的防潮剂。吉林元析分光光度计品牌
分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性，研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器，可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长，通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。湖南uv分光光度计教程分光光度计的光源强度、检测器的灵敏度随时间发生变化。
在上述6个容量瓶中对应的溶液中铁的含量不同其中铁含量为，其余溶液构成标准系列溶液。并用移液管吸取，并编号为7。将溶液放置15min左右；3、接通722N分光光度计电源，调节分光光度计的透光度T示数为（即T%=100%）发现此时吸光度A的示数位，波长调节至510nm条件下；4、拿出比色皿，一次只能测四种溶液，先用1、2、3、4号容量瓶中的溶液分别润洗(不能搞混了)，并依次倒入编号溶液（不能倒太满，否则容易溢出），用面巾纸擦干比色皿表面尤其是光滑的一面。将擦干装有对应溶液的比色皿依次放入分光光度计的光路中使测定的顺序为1、2、3、4（要盖上仪器的盖子）。记录对应的吸光度；5、将4上述测完的比色皿拿出，将溶液倒入废液缸中，先用蒸馏水洗净4只比色皿。在按4步骤中的方法进行操作，此时的溶液编号为5、6、7。记录对应的吸光度；6、将记录的数据在电脑上用ORANGE软件进行处理。并绘出相应的图,并根据原理求出原始待测溶液中铁的含量；7、实验完毕断开分光光度计电源，清洗玻璃仪器和比色皿，整理实验台离开实验室。实验数据处理结果记录及讨论标准系列的实验数据及测定结果铁标准溶液/mL铁含量。
一些仪器具有多种光源供选择：紫外光、可见光和甚至红外光（780nm至3,000nm）。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分（大约380nm到800nm）。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。为了测量吸光值，分光光度计制造商通常使用光电倍增管（photo-multipliertubes，PMTs）和光敏二极管。单色器是分光光度计的心脏部分，是把来自光源的混合光分解成单色光。
试剂盒包含一个空白滤光片、三个检查光度的滤光片和三个校正波长的滤光片。每个滤光片的吸光值是相对空白滤光片测定的。这个试剂盒不仅能让用户获得测量准确性的信息，也能提供精确度的信息，包括平均值和变异系数。在测量准确性和精确度时，将空白滤光片和样品滤光片放入插槽内。将测得的输出吸光度值与允许值范围比较。在检查波长时，测定三个测试滤光片在对应波长(260nm、280nm和800nm)下的吸光度，以确定每个波长的变异系数。许多分光光度计，包括Eppendorf的所有仪器，都带有一个特殊的功能——自检。Eppendorf建议用户至少每周运行一次自检，但自动自检的频率可根据需要进行设定。自检主要检查仪器的几个部分。它通过测定现有波长的随机误差来校验检测器，通过检查大能量、随机误差、基准传感器的信号和光强度来校验光源。它还通过测定紫外光谱范围内强度峰值位置的精确度来确定波长的系统及随机误差。遵照这些建议来维护分光光度计，那么在今后的使用过程中再也不用担心测量结果有问题啦。分光光度计的设计原理和工作原理，允许吸光值在一定范围内变化。上海紫外可见分光分光光度计
分光光度计的单色器则有玻璃、石英、荧石、岩盐和其它碱金属卤化物制成的棱镜以及绕射光栅和反射光栅等。吉林元析分光光度计品牌
测量过程中,“100%”点经常变动。可能原因：a.比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解决方法：用擦镜纸擦干净比色皿表面，然后将其安放在比色槽的左边，上面用定位夹定位。b.电路故障（电压、光电接收、放大电路）。解决方法：送修。数显不稳。可能原因：a.预热时间不够。解决方法：延长预热时间至30分钟左右（部分仪器由于老化等原因，长时间处于工作状态时，也会工作不稳）。b.光电管内的干燥剂失效，使微电流放大器受潮。解决方法：烘烤电路，并更换或烘烤干燥剂。c.环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等。解决方法：改善工作环境。d.光电管、电路等其它原因。吉林元析分光光度计品牌
