高效液相色谱进样装置
⑴注射器进样装置:进样所用微量注射器及进样方式与 GC法一样。进样压力150×10^5Pa时,必须采用停流进样。⑵高压定量进样阀:与GC法用的流通法相似,能在高压下进样。
高效液相色谱色谱柱
色谱柱是色谱仪**重要的部件(心脏)。通常用厚壁玻璃管或内壁抛光的不锈钢管制作的,对于一些有腐蚀性的样品且要求耐高压时,可用铜管、铝管或聚四氟乙烯管。柱子内径一般为1~6 mm。常用的标准柱型是内径为4.6 或3.9mm ,长度为15 ~30cm 的直形不锈钢柱。填料颗粒度5 ~10μm ,柱效以理论塔板数计大约 7000 ~10000。
发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。 更高的流速:达 5 mL/min。湖南液相色谱系统厂家直销
液相色谱类型
液相色谱按其分离机理,可分为四种类型--吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱、凝胶色谱法
凝胶色谱法
目前,凝胶色谱法既适用于水溶液的体系,又适用于有机溶剂的体系。当所用的洗脱剂为水溶液时,称为凝胶过滤色谱,凝胶过滤色谱在生物界的应用比较多;采用有机溶剂为洗脱剂时,称为凝胶渗透色谱,凝胶渗透色谱在高分子领域应用比较多。
四种不同类型的液相色谱,可以依据样品性质的不同,选择不同的方法,灵活应用。
山东高效液相色谱系统价格在无需暂停实验更换溶剂的情况下,可实现多达九种不同溶剂组合。高效液相色谱分离原理
离子
(Ion Chromatography)
用离子交换树脂为固定相,电解质溶液为流动相。以电导检测器为通用检测器,为消除流动相中强电解质背景离子对电导检测器的干扰,设置了***柱。试样组分在分离柱和***柱上的反应原理与离子交换色谱法相同。
以阴离子交换树脂(R-OH)作固定相,分离阴离子(如Br-)为例。当待测阴离子Br-随流动相(NaOH)进入色谱柱时,发生如下交换反应(洗脱反应为交换反应的逆过程):
***柱上发生的反应:
R-H Na OH- === R-Na H2O
R-H Na Br- === R-Na H Br-
可见,通过***柱将洗脱液转变成了电导值很小的水,消除了本底电导的影响;试样阴离子Br-则被转化成了相应的酸H Br-,可用电导法灵敏的检测。
离子色谱法是溶液中阴离子分析的比较好方法。也可用于阳离子分析。
高效液相色谱分离原理
液—固
流动相为液体,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等)。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是:当试样进入色谱柱时,溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附(未进样时,所有的吸附剂活性中心吸附的是S),可表示如下:Xm nSa ====== Xa nSm
式中:Xm--流动相中的溶质分子;Sa--固定相中的溶剂分子;Xa--固定相中的溶质分子;Sm--流动相中的溶剂分子。
当吸附竞争反应达平衡时:
K=[Xa][Sm]/[Xm][Sa]
式中:K为吸附平衡常数。[讨论:K越大,保留值越大。]
是兼备**离效率、样品通量、易用性、重现性和方法转换效率等诸多优点的系统。高效液相色谱分离原理
离子交换
(Ion-exchange Chromatography)
IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流
动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下:
X-(溶剂中) (树脂-R4N Cl-)=== (树脂-R4N X-) Cl- (溶剂中)
当交换达平衡时:
KX=[-R4N X-][ Cl-]/[-R4N Cl-][ X-]
分配系数为:
DX=[-R4N X-]/[X-]= KX [-R4N Cl-]/[Cl-]
[讨论:DX与保留值的关系]
凡是在溶剂中能够电离的物质通常都可以用离子交换色谱法来进行分离。
**度碳涂层的陶瓷进样阀和柱塞杆经过特殊设计,具有始终如一的性能和重现性。上海Vanquish液相色谱系统价格引进独特而用途***的电雾式检测器。湖南液相色谱系统厂家直销
高效液相色谱综述
HPLC的出现不过三十多年的时间,但这种分离分析技术的发展十分迅猛,应用十分***。其仪器结构和流程多种多样。典型的高效液相色谱仪结构和流程可用下列方框图表示(See Fig.3-4)。高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置(用双泵)、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件。
高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂,抗氧化剂、杀虫剂、除锈剂的分析等物质的分析。
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